山羊GnRH elisa檢測試劑盒夾心法

山羊GnRH elisa檢測試劑盒夾心法：
（一）雙抗體夾心法
將特異性抗體與固相載體連接，形成固相抗體；加入待測樣本，孵育使樣本中的抗原與固相抗體充分反應，形成固相抗體-抗原復合物，之后洗滌除去其他未結(jié)合物；加入標記特異性抗體并孵育，使標記抗體與固相抗體-抗原復合物結(jié)合，形成固相抗體-抗原-標記抗體復合物（雙抗體夾心），洗滌除去未結(jié)合的標記抗體；*根據(jù)不同的方法學，加入不同的反應物質(zhì)（如酶促底物、堿性溶液、氧化劑等），得到反應信號；讀取信號，根據(jù)預先設(shè)定的COV或標準曲線，進行定性或定量的結(jié)果判讀。
雙抗體夾心法易受干擾。常見的干擾物質(zhì)包括人抗動物抗體（HA）和類因子（RF），可造成假陰性及假陽性結(jié)果。在診斷檢測過程中，HA可結(jié)合多種類型的無關(guān)抗原，從而干擾抗原-抗體的特異性結(jié)合反應，如一個干擾抗體分子分別與固相抗體及標記抗體結(jié)合，盡管樣本中沒有待測抗原的存在，標記抗體通過干擾抗體連接到固相抗體，在洗滌過程中不會被洗去，因此產(chǎn)生了相應的信號，造成假陽性結(jié)果；或干擾抗體分別與固相抗體及標記抗體結(jié)合，占據(jù)固相抗體與標記抗體上的特異性結(jié)合位點，造成無法產(chǎn)生相應的信號，造成假陰性結(jié)果。
（二）雙抗原夾心法
原理與雙抗體夾心法類似，特異性抗體與固相載體連接，形成固相抗原；加入待測樣本，孵育使樣本中的抗原與固相抗體充分反應，形成固相抗原-抗體復合物，洗滌除去未結(jié)合物質(zhì)；加入標記特異性抗原并孵育，是標記抗原與固相抗原-抗體復合物結(jié)合，形成固相抗原-抗體-標記抗原復合物（雙抗原夾心），洗滌除去未結(jié)合的標記抗原，加入反應物質(zhì)，判讀結(jié)果。