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產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
保存條件 | |
品牌 | 莼試 |
貨號 | CSX4454 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 詳見說明書 |
細(xì)胞形態(tài) | 球形克隆 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 是 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 小鼠胚胎內(nèi)細(xì)胞團(tuán) |
物種來源 | 詳見說明書 |
包裝規(guī)格 | 詳見說明書 |
純度 | 詳見說明書% |
是否進(jìn)口 | 是 |
小鼠胚胎干細(xì)胞C57BL/6(干細(xì)胞庫保藏)培養(yǎng)來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實(shí)驗(yàn)等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室,可無菌操作并提供相關(guān)科研項目解決方案以及實(shí)驗(yàn)服務(wù)。產(chǎn)品僅用于科研
產(chǎn)品名稱 | 類型 | 佛號 |
小鼠胚胎干細(xì)胞C57BL/6(干細(xì)胞庫保藏)培養(yǎng) | 小鼠胚胎內(nèi)細(xì)胞團(tuán) | CSX4454 |
資源名稱 小鼠胚胎干細(xì)胞C57BL/6(干細(xì)胞庫保藏)
種屬:C57BL/6
類型:小鼠胚胎內(nèi)細(xì)胞團(tuán)
形態(tài):球形*
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:mES完全培養(yǎng)液配方(600 ml): DMEM (Invitrogen 12430) 497 ml ES級FBS (biochrom S4115) 90 ml Glutamax (Invitrogen 35050) 6 ml NEAA (Invitrogen 11140) 6 ml LIF (Millipore ESG1107) 60 μl(終濃度為1000U/ml) β-Mer (Invitrogen 21985) 1.5 ml 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度。
培養(yǎng)操作步驟:
小鼠胚胎干細(xì)胞C57BL/6(干細(xì)胞庫保藏)培養(yǎng)產(chǎn)品僅用于科研1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,同時,可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時,可采用*化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備 記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣,如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等;
適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進(jìn)行有針對性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對較經(jīng)濟(jì)可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對象。
以下是公司正在在熱銷的產(chǎn)品:
羊藿苷F2質(zhì)量規(guī)格:BR,美國進(jìn)口Icariside F2 CLIAKitforVZV-IgM(HumanVaricellazostervirusIgMELISAKit人病毒IgM規(guī)格:48T/96T 大鼠緊張素(1-7)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
多韋替尼質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRDovitinib 羅丹明123(RHODANMINE123)溶液(50微摩爾)0.5毫升 人細(xì)胞角蛋白18(CK-18)試劑盒 Human CK-18 ELISA Kit
乙酰黃芪皂苷I質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%Acetytastragaloside ELISAKitIgA人球蛋白A規(guī)格:48T/96T 谷酰胺合成酶(GS)測試盒 可見分光光度法 50管/24樣
5-苯基-2,4-戊二烯酸(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品5-Phenyl-2,4-pentadienoic acid 小鼠Klothoβ蛋白(KLβ)ELISA試劑盒 ,英文名: KLβ ELISA Kit RatovalbuminspecificIgE,OVAsIgEELISA試劑盒大鼠卵清蛋白特異性IgE(OVAsIgE)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
化細(xì)胞色素C氧化酶活性測定試劑盒20 29106-49-8原B2規(guī)格 Procyanidin B2
RatInhibinbindingprotein,INHBPELISA試劑盒大鼠抑制素結(jié)合蛋白(INHBP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 4852-22-6原 proanthocyanidins
小鼠粘蛋白/粘液素7(MUC7)ELISA試劑盒 ,英文名: MUC7 ELISA Kit 1453-93-6原人參三醇說明書 Protopanaxatriol
小鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1IgA/G/M)ELISA檢測試劑盒Mouseβ2-glycoprotein1aibodyIgA/G/M,β2-GP1IgA/G/MELISAKit 96T/48T 55056-80-9原薯蕷皂苷品牌 Protodioscin
人巨噬細(xì)胞刺激蛋白(MSP)試劑盒 Human MSP ELISA Kit 162857-78-5遠(yuǎn)志山酮III規(guī)格 Polygalaxanthone III
2450-53-5異綠原酸A說明書 Isochlorogenic acid A 英文名稱RatSomatostatinELISAKit大鼠生長抑素(SS)規(guī)格:96T/48T
24502-78-1乙酰紫草素說明書 Acetylshikonin 英文名稱RatSomatostatinELISAKit大鼠生長抑素(SS)規(guī)格:96T/48T
24211-30-1杜鵑素說明書 Farrerol 英文名稱RatSODELISAKit大鼠超氧化物歧化酶(SOD)規(guī)格:96T/48T
24063-71-6異莪術(shù)烯醇品牌 Isocurcumenol 英文名稱RatSODELISAKit大鼠超氧化物歧化酶(SOD)規(guī)格:96T/48T
2385-63-9蓮心堿高氯酸鹽說明書 Liensinine Perchlorate 英文名稱RatSHBGELISAKit大鼠性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)規(guī)格:96T/48T
小鼠胚胎干細(xì)胞C57BL/6(干細(xì)胞庫保藏)培養(yǎng)小鼠脂蛋白脂酶(LPL)ELISA檢測試劑盒Mouselipoproteinlipase,LPLELISAKit 96T/48T 548-04-9金絲桃素品牌 Hypericin
人抗sp100抗體(sp100)試劑盒 Human ai-sp100-aibody ELISA Kit 521-34-6金松雙黃酮規(guī)格 Sciadopitysin
Rat17-Hydroxycoicosteroids,17-OHCSELISAKit大鼠17羥皮質(zhì)類(17-OHCS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 6902-77-8京尼平 Genipin
載玻片細(xì)胞JNK/SAPK蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒10/20 27741-01-1京尼平苷酸說明書 Geniposidic acid
IL-1αELISA試劑盒魚類白介素1α規(guī)格:96T/48T 29307-60-6京尼平龍膽雙糖苷品牌 genipin-1-b-D-gentiobioside
操作流程:
1.1主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞,以0.25%胰酶消化成單細(xì)胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,計數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d,繪制細(xì)胞生長曲線