資源名稱　小鼠胚胎干細(xì)胞R1/E（干細(xì)胞庫(kù)保藏）產(chǎn)品僅用于科研
種屬:R1/E

類型:小鼠3.5 dpc胚胎內(nèi)細(xì)胞團(tuán)

形態(tài):球形*

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:mES完全培養(yǎng)液配方（600 ml）： DMEM (Invitrogen 12430) 497 ml ES級(jí)FBS (biochrom S4115) 90 ml Glutamax (Invitrogen 35050) 6 ml NEAA (Invitrogen 11140) 6 ml LIF (Millipore ESG1107) 60 μl（終濃度為1000U/ml） β-Mer (Invitrogen 21985) 1.5 ml 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度。

生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
小鼠胚胎干細(xì)胞R1/E（干細(xì)胞庫(kù)保藏） 來(lái)源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實(shí)驗(yàn)等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室，可無(wú)菌操作并提供相關(guān)科研項(xiàng)目解決方案以及實(shí)驗(yàn)服務(wù)。

培養(yǎng)操作步驟：
小鼠胚胎干細(xì)胞R1/E（干細(xì)胞庫(kù)保藏） 1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布； 
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）； 
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)； 
4．將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中； 
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。 
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用*化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備  記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等； 
適用的對(duì)象范圍廣，從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物，一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。

操作流程：
產(chǎn)品僅用于科研1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開(kāi),吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長(zhǎng)至60%～70%融合時(shí)，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中，每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計(jì)算貼壁率。 
1.6 生長(zhǎng)曲線 取指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線

以下是公司正在在熱銷的產(chǎn)品：
銀杏內(nèi)酯A(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Ginkgolide A  CLIAKitforBeta-EPR(MouseBeta-Endorphieceptor)ELISAKit小鼠β內(nèi)啡肽受體規(guī)格：48T/96T  大鼠雙氫睪酮(DHT)ELISA試劑盒 ，英文名： DHT ELISA Kit

銀杏內(nèi)酯B(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Ginkgolide B  細(xì)菌鹽肉湯500毫升  人解整合素樣金屬蛋白酶8(ADAM8)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanADisiegrinAndMetalloprotease8,ADAM8ELISAKit 96T/48T

TG100-115質(zhì)量規(guī)格：>98%,PI3Kγ/δ抑制劑TG100-115  RabbitHeatShockProtein40,HSP-40ELISAKit兔熱休克蛋白40(HSP-40)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  鯨皮質(zhì)醇(Coisol)試劑盒 Whale Coisol ELISA Kit

鹽酸地芬尼多（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：供含量測(cè)定用Difenidol   豚鼠白介素8(IL-8)ELISA試劑盒 ，英文名： IL-8 ELISA Kit  CLIAKitforPP(MouseProteinPhosphatase)ELISAKit小鼠蛋酸酶規(guī)格：48T/96T
人巨泌乳素試劑盒 Human Macroprolactin ELISA Kit  14215-86-2獐牙菜苷說(shuō)明書  Sweroside

Ratamyloidbetapeptide1-40,Aβ1-40ELISAKit大鼠β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  17388-39-5獐牙菜苦苷品牌  Swertiamarin

載玻片細(xì)胞鈣交換體(NCX)蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20  526-07-8芝麻林素規(guī)格   Sesamolin

MouseactivatedproteinC,APCELISA試劑盒小鼠活化蛋白C(APC)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  607-80-7芝麻素    Sesamin

小鼠粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)ELISA試劑盒 ，英文名： MUC5AC ELISA Kit  41059-79-4知母皂苷AⅢ說(shuō)明書  Timosaponin A-Ⅲ
23513-14-66-姜酚規(guī)格  6-Gingerol   英文名稱RatsecretoryIgAELISAKit大鼠分泌型IgA(sIgA)規(guī)格：96T/48T

23496-41-5貝母素甲   Peimine   英文名稱RatsecretoryIgAELISAKit大鼠分泌型IgA(sIgA)規(guī)格：96T/48T

23445-00-3當(dāng)藥醇苷規(guī)格  Swertianolin    英文名稱RatsCD86ELISAKit大鼠sCD86(sCD86)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

23313-21-5大黃素-8-O-β-D-葡萄糖苷   Emodin-8-glucoside   英文名稱RatsCD86ELISAKit大鼠sCD86(sCD86)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

23180-57-6芍藥苷品牌  Paeoniflorin  英文名稱RatPyruvateKinaseM2ELISAKit大鼠同酸激酶M2型同工酶(M2-PK)規(guī)格：96T/48T
小鼠胚胎干細(xì)胞R1/E（干細(xì)胞庫(kù)保藏） 小鼠脂聯(lián)素(Acrp30)ELISA試劑盒 ，英文名： Acrp30 ELISA Kit  552-58-9圣草酚說(shuō)明書  Eriodictyol

小鼠膽酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISA檢測(cè)試劑盒Mousecholesterolesteransferprotein,CETPELISAKit 96T/48T  152743-19-6石吊蘭素品牌  Lysionotin

人卷曲蛋白8(FZD8)試劑盒 human FZD8 ELISA Kit  108853-14-1石斛酚規(guī)格  dendrophenol

ratadrencocoicoopichormone,ACTHELISAKit大鼠促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  2115-91-5石斛堿   Dendrobine

載玻片細(xì)胞AIL蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20  102518-79-6石杉?jí)A甲說(shuō)明書  Huperzine-A