培養(yǎng)操作步驟：
小鼠胚胎干細(xì)胞D3（干細(xì)胞庫保藏） 1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布； 
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）； 
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時； 
4．將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中； 
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。產(chǎn)品僅用于科研 

資源名稱　小鼠胚胎干細(xì)胞D3（干細(xì)胞庫保藏）
種屬:D3

類型:小鼠囊胚內(nèi)細(xì)胞團(tuán)

形態(tài):球形*

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:mES完全培養(yǎng)液配方（600 ml）： DMEM (Invitrogen 12430) 497 ml ES級FBS (biochrom S4115) 90 ml Glutamax (Invitrogen 35050) 6 ml NEAA (Invitrogen 11140) 6 ml LIF (Millipore ESG1107) 60 μl（終濃度為1000U/ml） β-Mer (Invitrogen 21985) 1.5 ml 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度。

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實際需要進(jìn)行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時，可采用*化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備  記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等； 
適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟(jì)可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實驗對象。
以下是公司正在在熱銷的產(chǎn)品：
吲哚乙酸酯Indoxyl acetate質(zhì)量規(guī)格：0.97  超白金TAGDNA聚合酶200U  Humanmucosaeassociatedepitheliachemokine,MECELISAKit 人粘膜相關(guān)上皮趨化因子(MEC/CCL28)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

α-環(huán)糊精α-Cyclodextrin質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR  Ratglucocoicoidreceptor,GRELISA試劑盒大鼠糖皮質(zhì)類受體(GR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  HumanMelatonin,MTELISA試劑盒人褪素(MT)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

氧化酶(XOD)Xanthine Oxidase from bovine milk質(zhì)量規(guī)格：BR，>7U/MG, powder  小鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)ELISA試劑盒 ，英文名： TFR/CD71 ELISA Kit  組織*脂酶活性比色法定量檢測試劑盒20

?；?/span>,L-氨基?；?/span>Acylase from Aspergilus sp.質(zhì)量規(guī)格：酶活力≥30000u/g  小鼠心肌營養(yǎng)素1(CT-1)ELISA檢測試劑盒Mousecardioophln1,CT-1ELISAKit 96T/48T  HumangranzymesA，Gzms-AELISAKit人顆粒酶A(Gzms-A)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
載玻片細(xì)胞鈣ATP酶PMCA蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒10/20  470-17-7異土木香內(nèi)酯說明書  isoalantolactone

Mouseacetylcholinereceptoraibody,AChRabELISA試劑盒小鼠乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  52012-29-0異夏佛塔苷品牌  Isoschaftoside

小鼠粘蛋白5B(MUC5B)ELISA試劑盒 ，英文名： MUC5B ELISA Kit  548-19-6異銀杏素規(guī)格  Isoginkgetin

血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA檢測試劑盒MonkeyPlateletFactor4,PF-4ELISAKit 96T/48T  22368-21-4異澤蘭黃素   Eupatilin

犬球蛋白M(IgM)試劑盒 Canine Immunoglobulin M,IgM ELISA Kit  83-95-4茵芋堿說明書  Skimmianine
26791-73-1蒼耳亭說明書  Xanthatin   英文名稱RatThyroid-PeroxidaseELISAKit大鼠甲狀腺過氧化物酶(TPO)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

26575-95-1澤瀉醇B-23-醋酸酯規(guī)格   Alisol B 23-acetate  英文名稱RatThyroid-PeroxidaseELISAKit大鼠甲狀腺過氧化物酶(TPO)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

26575-93-9澤瀉醇C-23-醋酸酯    Alisol C monoacetate  英文名稱RatThyroidAbELISAKit大鼠甲狀腺素抗體(ThyroidAb)規(guī)格：96T/48T

26575-93-923-乙酰澤瀉醇C說明書  23-Acetyl alisol C   英文名稱RatThyroidAbELISAKit大鼠甲狀腺素抗體(ThyroidAb)規(guī)格：96T/48T

26544-34-3芹菜苷說明書  Apiin  英文名稱RatThyroglobulinELISAKit大鼠甲狀腺球蛋白(TG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠胚胎干細(xì)胞D3（干細(xì)胞庫保藏） 小鼠粘蛋白/粘液素2(MUC2)ELISA試劑盒 ，英文名： MUC2 ELISA Kit  50773-41-6重樓皂苷I規(guī)格  Polyphyllin I

小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ(PPAR-γ)ELISA檢測試劑盒MousePeroxisomeProliferator-activatedreceptorγ,PPAR-γELISAKit 96T/48T  76296-72-5重樓皂苷II   Polyphyllin II

人相關(guān)抗原9(SPAG9)抗體試劑盒 Human sperm associated aigen 9 (SPAG9) aibody ELISA Kit  19057-60-4重樓皂苷III說明書  Polyphyllin III

RatandrogenELISAKit大鼠雄激素(androgen)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  76296-75-8重樓皂苷VII品牌  Polyphyllin VII

載玻片細(xì)胞線粒體復(fù)合物III蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒10/20  55916-51-3重樓皂苷VI規(guī)格  Polyphyllin VI
操作流程：
1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。產(chǎn)品僅用于科研
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長曲線
小鼠胚胎干細(xì)胞D3（干細(xì)胞庫保藏） 來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實驗等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實驗室，可無菌操作并提供相關(guān)科研項目解決方案以及實驗服務(wù)。