小鼠胚胎干細(xì)胞J1（干細(xì)胞庫保藏）說明書來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實驗等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實驗室，可無菌操作并提供相關(guān)科研項目解決方案以及實驗服務(wù)。產(chǎn)品僅用于科研

資源名稱　小鼠胚胎干細(xì)胞J1（干細(xì)胞庫保藏）
種屬:J1

類型:小鼠胚胎內(nèi)細(xì)胞團(tuán)

形態(tài):球形*

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:mES完全培養(yǎng)液配方（600 ml）： DMEM (Invitrogen 12430) 497 ml ES級FBS (biochrom S4115) 90 ml Glutamax (Invitrogen 35050) 6 ml NEAA (Invitrogen 11140) 6 ml LIF (Millipore ESG1107) 60 μl（終濃度為1000U/ml） β-Mer (Invitrogen 21985) 1.5 ml 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度。

培養(yǎng)操作步驟：
小鼠胚胎干細(xì)胞J1（干細(xì)胞庫保藏）說明書產(chǎn)品僅用于科研1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布； 
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）； 
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時； 
4．將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中； 
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。 
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實際需要進(jìn)行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時，可采用*化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備  記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等； 
適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟(jì)可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實驗對象。
以下是公司正在在熱銷的產(chǎn)品：
隱丹參酮(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Cryptotanshinone  大鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化因子(ECF)ELISA檢測試劑盒Rateosinophilchemotacticfactor,ECFELISAKit 96T/48T  人體CyclinA1基因甲基化檢測試劑盒20

隱丹參酮質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥97%，BRCryptotanshinone  人S100鈣結(jié)合蛋白A9/鈣粒蛋白B(S100A9)試劑盒 human S100A9 ELISA Kit  ELISAKitAFA人抗角蛋白絲聚集素/絲集蛋白抗體規(guī)格：48T/96T

?；蛆Z去氧膽酸(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Taurochenodeoxycholic acid  英文名稱MouseuPARELISAkit小鼠尿激酶型血漿酶原激活因子受體(uPAR)規(guī)格：96T/48T  大鼠孕酮受體(PGR)ELISA試劑盒 ，英文名： PGR ELISA Kit

陰丹酮質(zhì)量規(guī)格：Indanthrone  XTT比色法細(xì)胞繁殖測定試劑盒500  人補體蛋白4(C4)ELISA檢測試劑盒HumanCompleme4,C4ELISAKit 96T/48T
RatImmunoglobulinE,IgEELISA試劑盒大鼠球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  29702-25-8異牡荊苷   Isovitexin

小鼠長停滯特異性基因產(chǎn)物6(gas-6)ELISA試劑盒 ，英文名： gas-6 ELISA Kit  486-21-5異嗪皮啶說明書  Isofraxidin

小鼠抗子宮內(nèi)膜抗體(EMAb)ELISA檢測試劑盒MouseEndomeiumAibody,EMAbELISAKit 96T/48T  51014-29-0異去氫鉤藤堿品牌  Isocorynoxeine

人巨噬細(xì)胞集落刺激因子(M-CSF)試劑盒 Human M-CSF ELISA kit  480-19-3異鼠李素規(guī)格  Isorhamnetin

RatAlternativemacrophageactivation-associatedCCchemokine1,AMAC-1ELISAKit大鼠巨噬細(xì)胞替代激活相關(guān)化學(xué)因子1(AmAC-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  55033-90-4異鼠李素-3-O-新橙皮苷   Isorhamnetin-3-O-neohespeidoside
27200-12-0二氫楊梅素規(guī)格  Dihydromyricetin   英文名稱RatTissuePolypeptideAigenELISAKit大鼠組織多肽抗原(TPA)ELISAKit規(guī)格：96T/48T

27013-91-8α-常春藤皂苷規(guī)格  α-hederin   英文名稱RatTissuefactorpathwayinhibitorELISAKit大鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)規(guī)格：96T/48T

26904-64-3氧化槐果堿說明書  Oxysophocarpine   英文名稱RatTissuefactorpathwayinhibitorELISAKit大鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)規(guī)格：96T/48T

26833-87-4高三尖杉酯堿   Homoharringtonine   英文名稱Ratthyroopin-releasinghormoneELISAKit大鼠促甲狀腺素釋放激素(H)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

2680-81-1去氫二異丁香酚品牌  Dehydrodiisoeugenol  英文名稱Ratthyroopin-releasinghormoneELISAKit大鼠促甲狀腺素釋放激素(H)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠胚胎干細(xì)胞J1（干細(xì)胞庫保藏）說明書小鼠再生胰島衍生蛋白3γ(REG3γ)ELISA試劑盒 ，英文名： REG3γ ELISA Kit  135247-95-9白頭翁皂苷B說明書  Pulchinenoside B

白介素2受體(IL-2R)ELISA檢測試劑盒MonkeyIerleukin-2receptor,IL-2RELISAkit 96T/48T  14216-03-6常春藤苷C品牌  Hederacoside C

犬抗激素/加壓素/精氨酸加壓素(AVP)試劑盒 Dog arginine vasopressin,AVP ELISA kit  366814-42-8苦蘇花皂苷C規(guī)格  Cussosaponin C

英文名稱HumanPAFELISAKit人血小板活化因子(PAF)ELISAKit規(guī)格：96T/48T  128730-82-5常春藤苷H   Kalopanaxsaponin H

化線粒體II型L-3羥?；?/span>-CoA脫氫酶/β淀粉樣蛋白結(jié)合乙醇脫氫酶(HADHII/ABAD)活性比色法定量檢測試劑盒20  173220-07-0構(gòu)樹堿A說明書  Broussonetine A
操作流程：
1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長曲線