培養(yǎng)操作步驟：
人SV40轉(zhuǎn)染成骨細(xì)胞 1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布； 
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）； 
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)； 
4．將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中； 
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。產(chǎn)品僅用于科研 

資源名稱　人SV40轉(zhuǎn)染成骨細(xì)胞
種屬:hFOB 1.19

類型:骨；成骨細(xì)胞；以SV40巨細(xì)胞抗原轉(zhuǎn)染

形態(tài):***

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:D-MEM/F-12培養(yǎng)基(GIBCO,貨號12400024，添加L-glutamine 150mg/L, NaHCO3 1.5g/L)，90%；0.3mg/ml G418；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：33.5攝氏度。

生長特性:貼壁生長

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時(shí)間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用*化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備  記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等； 
適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對較經(jīng)濟(jì)可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對象。
以下是公司正在在熱銷的產(chǎn)品：
硬脂酸(Standard for GC,>99%(GC))質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC,>99%(GC)Stearic acid  RatTumornecrosisfactorβ,TNF-βELISAKit大鼠β(TNF-β)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  人P選擇素(P-Selectin/CD62P/GMP140)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

環(huán)丁砜(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.8% (GC)Sulfolane  Murashige&Skoog完全培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑  兔子Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢ)試劑盒 Rabbit procollagen Ⅲ N-terminal peptide,PⅢ ELISA Kit

環(huán)丁砜(Standard for GC,≥99.5%(GC))質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC,≥99.5%(GC)Sulfolane  PorcineFollicle-stimulatinghormone,FSHELISA試劑盒豬促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  去乙酰化饑餓激素(dGHRL)ELISA試劑盒 ，英文名： dGHRL ELISA Kit

十四烷(Standard for GC,>99%(GC))質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC,>99%(GC)Tetradecane  小鼠核因子κB(NF-Kb)ELISA試劑盒 ，英文名： NF-Kb ELISA Kit  RabbitB-cellleukemia/lymphoma2,Bcl-2ELISA試劑盒兔子B細(xì)胞瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
載玻片細(xì)胞βCOLLAGENI蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒10/20  1354-84-3雪上一枝蒿甲素說明書  Bullatine A

Mouse8-Hydroxy-desoxyguanosine,8-OHdGELISA試劑盒小鼠8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  466-26-2雪上一枝蒿乙素品牌  BullatineB

小鼠整合素β3(ITGβ3)ELISA試劑盒 ，英文名： ITGβ3 ELISA Kit  5578-73-4血根堿規(guī)格  Sanguinarine

內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA檢測試劑盒MonkeyEndothelin1,ET-1ELISAKit 96T/48T  鹽酸血根堿   Sanguinarine Chloride

犬腦素/腦尿肽(BNP)試劑盒 Canine brain naiuretic peptide,BNP ELISA Kit  148244-82-0亞麻木酚素說明書  Secoisolariciresinol Diglucoside
31008-19-2辛夷脂素   Fargesin   魚類白介素1α(IL-1α)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

31008-18-1木蘭脂素規(guī)格  Magnolin    魚骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA檢測試劑盒FishOsteocalcin/Boneglaprotein,OT/BGPELISAkit 96T/48T

30964-13-71,5-二咖啡酰奎寧酸說明書  1,5-Dicaffeoylquinic acid   魚肝油維生素A含量熒光定量檢測試劑盒20

3081-61-6L-茶氨酸規(guī)格  L-Theanine   游離脂肪酸化學(xué)比色法定量檢測試劑盒50

306-08-1高香草酸說明書  Homovanillic acid   油脂DNA萃取試劑盒10
人SV40轉(zhuǎn)染成骨細(xì)胞 小鼠牛小腸堿性1酸酶(CIAP)ELISA檢測試劑盒MouseCalfiestinalalkalinephosphatase,CIAPELISAKit 96T/48T  299-39-8硫酸司巴丁   Sparteine sulfate

人結(jié)核菌桿抗體IgM(TB-Ab IgM)試劑盒 Human tuberculosis aibody IgM,TB-Ab IgM ELISA Kit  去甲斑蝥酸說明書 

RatAi-glucoprotein210,GP210ELISAKit大鼠抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  去甲斑蝥酸鈉品牌   Demethylcantharidate

組蛋白H3-K14乙?；瘷z測試劑盒10/20等  21082-33-7苔黑酚葡萄糖苷規(guī)格  Orcinol glucoside

MouseangiotensionⅠ,Ang-ⅠELISA試劑盒小鼠緊張素Ⅰ(Ang-Ⅰ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  氧代川南亭堿
操作流程：
1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長至60%～70%融合時(shí)，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。產(chǎn)品僅用于科研
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計(jì)算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長曲線
人SV40轉(zhuǎn)染成骨細(xì)胞 來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實(shí)驗(yàn)等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室，可無菌操作并提供相關(guān)科研項(xiàng)目解決方案以及實(shí)驗(yàn)服務(wù)。