資源名稱　大額牛皮膚細胞產(chǎn)品僅用于科研
種屬:BFR-S3

形態(tài):成纖維細胞樣

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:M-199:withEarle＇sBalancedSaltsSolution(EBSS)15%NBS

生長特性:貼壁生長
大額牛皮膚細胞 來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實驗室，可無菌操作并提供相關(guān)科研項目解決方案以及實驗服務(wù)。

培養(yǎng)操作步驟：
大額牛皮膚細胞 1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布； 
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）； 
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時； 
4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中； 
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。 
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用*化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設(shè)備  記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應用的學科領(lǐng)域較為寬廣，如細胞學、免疫學、學、生物化學、遺傳學、分子生物學等； 
適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。

操作流程：
產(chǎn)品僅用于科研1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù)，按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液＝(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細胞生長曲線

以下是公司正在在熱銷的產(chǎn)品：
玉米素核苷同分Zeatin riboside mixed Isomers質(zhì)量規(guī)格：美國進口  載玻片細胞線粒體復合物I蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒10/20  Humangrowthhormone,HGHELISAKIT 人生長因子(HGH)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

鹽酸多佐胺；鹽酸杜塞酰胺（標準品）Dorzolamide HCl質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品  Mouseadrenergicalpha-1Areceptor,ADRA1AELISA試劑盒小鼠能a1A受體(ADRA1A)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  Humanoctameranscriptionfactor2A,OTF2AELISA試劑盒人八聚體轉(zhuǎn)錄因子(OTF2A)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

甲磺酸多沙唑嗪Doxazosin Mesylate質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR  小鼠載脂蛋白H(APOH)ELISA試劑盒 ，英文名： APOH ELISA Kit  ELISAKitTM豬調(diào)節(jié)蛋白規(guī)格：48T/96T

甲磺酸多沙唑嗪（標準品）Doxazosin Mesylate質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品  猴可溶性細胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA檢測試劑盒Monkeysolublevasccularcelladhesionmolecule1,sVCAM-1ELISAKit 96T/48T  HumanEsiol，E3ELISAKit人雌三醇(E3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
犬固酮(ALD)試劑盒 Canine aldosterone,ALD ELISA Kit  63223-86-9人參皂苷Rh1說明書  Ginsenoside Rh1

英文名稱HumanInhibinAELISAKit人抑制素A(INHA)規(guī)格：96T/48T  78214-33-2人參皂苷Rh2品牌  Ginsenoside Rh2

化RNA樣品儲存液50毫升  105558-26-7人參皂苷Rh3規(guī)格  Ginsenoside Rh3

RatHexokinase,HKELISA試劑盒大鼠己糖激酶(HK)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  174721-08-5人參皂苷Rh4   Ginsenoside Rh4

小鼠脂聯(lián)素受體1(ADIPOR1)ELISA試劑盒 ，英文名： ADIPOR1 ELISA Kit  364779-15-7人參皂苷Rk3說明書  Ginsenoside Rk3
474-25-9鵝去氧膽酸說明書   Chenodeoxycholic acid    脂質(zhì)過氧化物4-羥基壬烯酸(4-HNE)ELISA定量測定試劑盒48/96

474-25-9鵝去氧膽酸    Chenodeoxycholic acid    脂肪酸酰胺水解酶(FAAH)活性熒光定量檢測試劑盒20

473-98-3白樺脂醇說明書  Betulin   脂蛋白脂酶活性比色法定量檢測試劑盒20

473-08-5a-香附酮   α-Cyperone   正常人體腎組織微粒體組分(5毫克/毫升)500微升

472-26-4遠華蟾蜍精說明書  Telocinobufagin   真菌格莫瑞(Gomori'sMethenamineSilver;GMS)銀染試劑盒50
大額牛皮膚細胞 人解整合素樣金屬蛋白酶10(ADAM10)試劑盒 Human A Disiegrin And Metalloprotease 10,ADAM10 ELISA Kit  (R型)原人參二醇說明書  20(R)Protopanaxdiol

Ratai-cenolandcenosomeaibody,ACAELISAKit大鼠抗中性粒/中心體抗體(ACA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  340982-22-1遼東楤木皂苷VII品牌  Araloside VII

組蛋白H2B-K46甲基化(di)檢測試劑盒10/20等  344911-90-6遼東楤木皂苷X規(guī)格  Araloside X

MouseAngiopoietin4,ANG-4ELISA試劑盒小鼠生成素4(ANG-4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  340963-86-2遼東楤木皂苷V   Araloside V

小鼠游離甲狀腺素(FT4)ELISA試劑盒 ，英文名： FT4 ELISA Kit  10376-48-4紫菀酮說明書  Shionone