人正常肝細(xì)胞苯并芘轉(zhuǎn)化細(xì)胞系 冷凍保存細(xì)胞之方法：

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
細(xì)胞凍存步驟：

資源名稱　人正常肝細(xì)胞苯并芘轉(zhuǎn)化細(xì)胞系
種屬:HL-7702BaPT

形態(tài):上皮樣

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle＇sBalancedSalts)10%FBS

生長特性:貼壁生長
細(xì)胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因為復(fù)蘇手法對于細(xì)胞狀態(tài)影響較大，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好，很難說是細(xì)胞自身不行，還是復(fù)蘇沒操作好；另外溫度對細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細(xì)胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種：產(chǎn)品僅用于科研
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運輸也對細(xì)胞影響也不大，只需加25元運費(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞培養(yǎng)過程：

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
以下是人正常肝細(xì)胞苯并芘轉(zhuǎn)化細(xì)胞系 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品：
硬脂酸Lead (II) stearate質(zhì)量規(guī)格：BR  HumancalnexinELISAKit 人鈣聯(lián)蛋白(calnexin)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝  人內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體2(VEGFR-2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

硫酸(>99%,BC)Lead (II) sulfate質(zhì)量規(guī)格：>99%,BC  CLIAKitforADMA(Humanasymmeicaldimethylarginine)ELISAKit人不對稱二甲基精氨酸規(guī)格：48T/96T  豬瘦素(LEP)試劑盒 Porcine Leptin,LEP ELISA Kit

左旋多巴(標(biāo)準(zhǔn)品)L-dopa,Levodopa質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品  血液乙脫氫酶3活性比色法定量檢測試劑盒20  Humaelomerase,TEELISAKit 人端粒酶(TE)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

左旋多巴L-dopa質(zhì)量規(guī)格：HPLC>97%,BR  MousesecretoryimmunoglobulinA,sIgAELISAKit小鼠分泌型球蛋白A(sIgA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  HumanMacrophageInflammatoryProtein-1α,MIP-1αELISA試劑盒人巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠脂蛋白脂酶(LIPD)ELISA試劑盒 ，英文名： LIPD ELISA Kit  61281-37-6五味子乙素說明書  Schizandrin B

α1微球蛋白(α1-MG)ELISA檢測試劑盒Monkeyα1-microglobulin,α1-MGELISAKit 96T/48T  61301-33-5五味子丙素品牌  schisandrin C

犬皮質(zhì)醇(Coisol)試劑盒 Canine Coisol ELISA Kit  58546-56-8五味子酯甲規(guī)格  Schisantherin A

英文名稱HumanInsulin-likegrowthfactorbindingprotein4,IGFBP4ELISAkit人樣生長因子結(jié)合蛋白4(IGFBP4)規(guī)格：96T/48T  58546-55-7五味子酯乙   schisantherin B

化人體RUNX3基因重組表達(dá)載體(pcDNA-RUNX3)10微克  西貝母素苷說明書  imperialine-e--D-glocoside
35286-59-0地榆皂苷II規(guī)格  Ziyuglycoside II   載玻片細(xì)胞FSH-BETA蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒10/20

35286-59-0地榆皂苷Ⅱ規(guī)格  Ziyuglycoside II    載玻片細(xì)胞ERK蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒10/20

35286-58-9地榆皂苷I品牌  Ziyuglycoside I   載玻片細(xì)胞ERBETA蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒10/20

35286-58-9地榆皂苷I品牌  Ziyuglycoside I   載玻片細(xì)胞EGFR蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒10/20

3520-14-7右旋四氫巴馬汀品牌  Glycitein  載玻片細(xì)胞DHPR受體蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒10/20
人正常肝細(xì)胞苯并芘轉(zhuǎn)化細(xì)胞系 小鼠兒茶酚胺(CA)ELISA檢測試劑盒Mousecatecholamine,CAELISAKit 96T/48T  57420-46-9胡麻屬苷品牌  Sesamoside

人抗α-胞襯蛋白抗體(IgG)試劑盒 Human ai-alpha-Fodrin aibody IgG ELISA Kit  98243-57-3湖貝甲素規(guī)格  Hupehenine

RabbitUrokinase-typePlasminogenActivatorReceptor,PLAUR/uPARELISAKit兔尿激酶型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  535-83-1葫蘆巴堿   Trigonelline

載玻片細(xì)胞GSK-3BETA蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒10/20  1370264-16-6擬人參皂苷-Rh2說明書  3-O-β-D-glucopyranosyl-3β,12β,25-trihydroxyldammar-(E)-20(22)-ene

Humanβ-Lactamaseinhibitors,BLIELISA試劑盒人β內(nèi)酰胺酶抑制劑(BLI)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  6199-67-3葫蘆素B品牌  Cucurbitacin B
收到人正常肝細(xì)胞苯并芘轉(zhuǎn)化細(xì)胞系 處理方法
產(chǎn)品僅用于科研1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細(xì)胞密度超過80%，可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作。