G418抗性的小鼠胚胎成纖維細胞（干細胞庫保藏）形態(tài)來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業(yè)的實驗室，可無菌操作并提供相關(guān)科研項目解決方案以及實驗服務。產(chǎn)品僅用于科研

資源名稱　G418抗性的小鼠胚胎成纖維細胞（干細胞庫保藏）
種屬:G418-R MEF

類型:取孕12.5天的neo轉(zhuǎn)基因C57小鼠的胚胎制備后經(jīng)過射線處理

形態(tài):成纖維細胞

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:MEF細胞完全培養(yǎng)基（100 ml）： DMEM (Invitrogen, 12430) 88 ml FBS (Biochrom, S0115) 10 ml Glutamax (Invitrogen, 35050) 1 ml Non-essential Amino Acids, 100×(Invitrogen, 11140) 1 ml 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度。

培養(yǎng)操作步驟：
G418抗性的小鼠胚胎成纖維細胞（干細胞庫保藏）形態(tài)產(chǎn)品僅用于科研1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布； 
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）； 
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時； 
4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中； 
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。 
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用*化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設(shè)備  記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應用的學科領(lǐng)域較為寬廣，如細胞學、免疫學、學、生物化學、遺傳學、分子生物學等； 
適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。
以下是公司正在在熱銷的產(chǎn)品：
右旋酮洛芬氨丁三醇(標準品)(S)-Ketoprofen trometamol質(zhì)量規(guī)格：含量測定  小鼠內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)ELISA檢測試劑盒MouseVascularEndothelialcellGrowthFactor,VEGFELISAKIT 96T/48T  ELISAKitsIgA小鼠分泌型球蛋白A規(guī)格：48T/96T

植物凝膠(Sigma)Phytagel質(zhì)量規(guī)格：進分;SigmaP8169  人高香草酸(HVA)試劑盒 Human Homovanillic acid,HVA ELISA Kit  Human6-keto-prostaglandinF1a,6-K-PGF1aELISAKit人6同素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

右旋酮洛芬(S)-(+)-Ketoprofen質(zhì)量規(guī)格：>98.5%  RatgranzymesB,Gzms-BELISAKit大鼠顆粒酶B(Gzms-B)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  人抗核因子抗體(ANF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

甲地孕酮(標準品)Megestrol base質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品  BAD蛋白共沉淀分析試劑盒5  小鼠膠原交聯(lián)(PYD)試劑盒 Mouse pyridinoline,PYD ELISA Kit
Mouse17-Hydroxyprogesterone,17-OHPELISA試劑盒小鼠17羥孕同(17-OHP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  103548-82-9石杉堿乙品牌  Huperzine B

小鼠脂解激活脂蛋白受體(LSR)ELISA試劑盒 ，英文名： LSR ELISA Kit  476-28-8石蒜堿規(guī)格  Lycorine

犬白細胞分化抗原6(CD6)ELISA檢測試劑盒Canineclusterofdiffereiation6,CD6ELISAKit 96T/48T  7084-24-4矢車菊素-3-O-葡萄糖苷   Cyanidin-3-O-glucoside chloride

犬素F2α(PGF2α)試劑盒 Canine Prostaglandin F2α,PGF2α ELISA Kit  6155-35-7鼠李糖說明書  L-Rhamnose monohydrate

英文名稱HumanacetylcholinereceptoraibodyELISAKit人乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  5957--80-2鼠尾草酚品牌  Carnosol
41060-15-5新補骨脂異黃酮說明書  Neobavaisoflavone  載玻片細胞βRUNX3蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒10/20

41059-79-4知母皂苷AⅢ說明書  Timosaponin A-Ⅲ    載玻片細胞βCOLLAGENI蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒10/20

40957-83-3黃豆黃素品牌  Glycitein   載玻片細胞βCOLLAGENII蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒10/20

404-86-4辣椒堿規(guī)格  Capsaicin  載玻片細胞βAMYLOID蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20

40437-72-7山柰酚-3-O-葡萄糖鼠李糖苷規(guī)格  Kaempeerol-3-Oglucorhamnoside  載玻片細胞βAMYLOID蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒10/20
G418抗性的小鼠胚胎成纖維細胞（干細胞庫保藏）形態(tài)人抗單核細胞抗體(AMA)試劑盒 Human ai-Monocyte aibody,AMA ELISA Kit  27215-14-1新穿心蓮內(nèi)酯規(guī)格  Neoandrographolide 

RabbitThromboxaneB2,TX-B2ELISAKit兔素B2(TXB2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  43043-74-9去氧紫草素   Deoxyshikonin 

載玻片細胞CDK3蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒10/20  29782-68-1水飛薊寧說明書  Silydianin 

Humanα-Synuclein,α-SYNELISA試劑盒人α突觸核蛋白(α-SYN)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  24063-71-6異莪術(shù)烯醇品牌  Isocurcumenol 

小鼠組織因子通道抑制因子(TFPI)ELISA試劑盒 ，英文名： TFPI ELISA Kit  952068-64-3巴利森苷D規(guī)格  Parishin D
操作流程：
1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù)，按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液＝(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細胞生長曲線