細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程：

產(chǎn)品僅用于科研冷凍保存細(xì)胞之方法：
非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS5B培養(yǎng)冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí)， 以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

資源名稱　非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS5B培養(yǎng)
種屬:Vero-HCV-NS5B

形態(tài):上皮樣細(xì)胞

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:DMEM-H:Dulbecco＇sModifiedEagle＇sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS　

生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)

細(xì)胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運(yùn)輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因?yàn)閺?fù)蘇手法對(duì)于細(xì)胞狀態(tài)影響較大，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好，很難說(shuō)是細(xì)胞自身不行，還是復(fù)蘇沒(méi)操作好；另外溫度對(duì)細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細(xì)胞儲(chǔ)存的zui好方式，快遞時(shí)間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞，QC通過(guò)后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運(yùn)輸也對(duì)細(xì)胞影響也不大，只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞凍存步驟：

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
產(chǎn)品僅用于科研一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號(hào)11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號(hào)16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。

收到非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS5B培養(yǎng)處理方法
1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請(qǐng)拍照，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落；先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸浮）、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%，可正常傳代；若未超過(guò)80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí)，若細(xì)胞密度超過(guò)80%，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過(guò)80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作。
以下是非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS5B培養(yǎng)的相關(guān)熱銷產(chǎn)品：
（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定Lauric acid  RatAi-ThrombinⅢ,AT-ⅢELISA試劑盒大鼠抗凝血酶Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  己糖激酶(HK)測(cè)試盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/48樣

結(jié)晶質(zhì)量規(guī)格：>95%,BRCrystalline  小鼠CXC趨化因子受體3(CXCR3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  Ratplasminogenactivatorinhibitor,PAIELISA試劑盒大鼠纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Delta-催激素質(zhì)量規(guī)格：>95%,BRDelta-MSH  Rat vitamin K1 (VK1) ELISA Kit 大鼠維生素K1(VK1)ELISA試劑盒  HumanInhibin,INH-AELISA試劑盒人抑制素A(INH-A)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

內(nèi)皮素2，人，犬質(zhì)量規(guī)格：>95%,BREndothelin 2 (human, canine)  Humanacetylcholinereceptoraibody,AChRabELISAKit 人乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝  Humanmembraneattackcomplex,MACELISAKit人膜攻擊復(fù)合物(MAC)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
犬腎損傷分子1(Kim-1)試劑盒 Canine kidney injury molecule 1,Kim-1 ELISA Kit  4233-96-9沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯規(guī)格  GCG；Epigallocatechin gallate

英文名稱HumanLpaELISAKit人脂蛋白(Lpa)規(guī)格：96T/48T  4233-96-9沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯   GCG；Epigallocatechin gallate

沉淀法去內(nèi)試劑盒20  美迪紫檀素說(shuō)明書(shū)  Medicarpin

Ratheatshockprotein60,hSP-60ELISA試劑盒大鼠熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  480-36-4蒙花苷品牌  Buddleoside

小鼠配體超家族成員13(TNFSF13)ELISA試劑盒 ，英文名： TNFSF13 ELISA Kit  20283-92-5迷迭香酸規(guī)格  Rosmarinic acid
512-04-9薯蕷皂苷元說(shuō)明書(shū)  Diosgenin  植物源性食品腰果(cashew)試劑盒20

511-96-6支脫皂苷元   Gitogenin   植物源性食品小麥(wheat)試劑盒20

51059-44-0漢黃芩苷說(shuō)明書(shū)  Wogonoside   植物源性食品土豆(potato)試劑盒20

510-30-5刺囊酸說(shuō)明書(shū)  Echinocystic acid   植物源性食品山核桃(pecan)試劑盒20

510-30-5刺囊酸規(guī)格  Echinocystic acid   植物源性食品開(kāi)心果(Pistachio)試劑盒20
非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS5B培養(yǎng)犬維生素A(VA)ELISA檢測(cè)試劑盒CanineVitaminA,VAELISAKit 96T/48T  487-41-2連翹苷   Phillyrin

犬透明質(zhì)酸酶1(HAase 1)試劑盒 Canine Hyaluronidase 1,HAase 1 ELISA Kit  79916-77-1連翹脂苷A說(shuō)明書(shū)  Forsythoside A

英文名稱HumaumornecrosisfactorβELISAKIT人β(TNFβ)規(guī)格：96T/48T  81525-13-5連翹脂苷B品牌  Forsythoside B

超氧化物歧化酶(SOD)細(xì)胞裂解樣品制備試劑盒50  2586-96-1蓮心堿規(guī)格  Liensinine

ratgrowthhormonereleasinghormone,GHRHELISA試劑盒大鼠促生長(zhǎng)激素釋放激素(GRH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  5088-90-4蓮心堿高氯酸鹽   Liensinine Perchlorate