資源名稱　PG13 逆轉(zhuǎn)錄病毒包被的TK-NIH3T3細胞產(chǎn)品僅用于科研
種屬:PG13

提供形式:P4-5代T25細胞培養(yǎng)瓶

安全等級:2

模式菌株:未知

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:90%DMEM+10%FBS

生長條件:95%空氣+5%二氧化碳 37攝氏度

生長特性:貼壁細胞

存儲條件:50%DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮
PG13 逆轉(zhuǎn)錄病毒包被的TK-NIH3T3細胞 來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實驗室，可無菌操作并提供相關(guān)科研項目解決方案以及實驗服務(wù)。

培養(yǎng)操作步驟：
PG13 逆轉(zhuǎn)錄病毒包被的TK-NIH3T3細胞 1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布； 
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）； 
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時； 
4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中； 
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。 
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用*化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設(shè)備  記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學科領(lǐng)域較為寬廣，如細胞學、免疫學、學、生物化學、遺傳學、分子生物學等； 
適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學性狀相似的實驗對象。

操作流程：
產(chǎn)品僅用于科研1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù)，按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液＝(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細胞生長曲線

以下是公司正在在熱銷的產(chǎn)品：
章胺鹽酸鹽；正辛弗林DL-Octopamine HCl質(zhì)量規(guī)格：>98%  小鼠胰島素(INS)ELISA試劑盒 ，英文名： INS ELISA Kit  ELISAKitPⅠCP豬Ⅰ型前膠原羧基端肽規(guī)格：48T/96T

舒林酸Sulindac質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR  小鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA檢測試劑盒Mousepigmeepithelium-derivedfactor,PEDFELISAKit 96T/48T  Humancysteinylleukoienes，CysLTsELISAKit人半胱氨酰白三烯(CysLTs)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

舒林酸(標準品)Sulindac質(zhì)量規(guī)格：>98%,標準品  人甲狀腺刺激球蛋白(TSI)試劑盒 human thyroid stimulating immunoglobulin,TSI ELISA Kit  人食欲素/阿立新B(OX-B)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

托品酸(標準品)Tropic acid質(zhì)量規(guī)格：>98%  Ratbetacellulin,BTCELISAKit大鼠β細胞素(BTC)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  小鼠脂聯(lián)素(ADP)試劑盒 Mouse adiponectin,ADP ELISA Kit
小鼠轉(zhuǎn)化生長因子β(TGFβ1)ELISA試劑盒 ，英文名： TGFβ1 ELISA Kit  572-31-6黃杞苷說明書  Engeletin

小鼠糖原1酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISA檢測試劑盒MouseGlycogenphosphorylaseMM,GP-MMELISAKit 96T/48T  21967-41-9黃芩苷品牌  Baicalin

人抗SS-B/La抗體試劑盒 Human SS-B/La Aibody,ELISA Kit  491-67-8黃芩素規(guī)格  Baicalein

Rabbitα2-Aiplasmin,α2-APELISAKit兔子α2抗纖溶酶(α2-AP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  860-79-7黃楊堿   Cyclovirobuxin D

載玻片細胞IL蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒10/20  140360-29-8灰氈毛忍冬皂苷甲說明書  Macranthoidin A
568-72-9丹參酮IIA   Tanshinone IIA   豬血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)試劑盒 Porcine Fibrinogen Degradation Product,FDP ELISA Kit

56725-99-6淫羊藿苷I規(guī)格  Icarisid I  豬血纖蛋白原(Fbg)ELISA檢測試劑盒PorcineFibrinogen,FbgELISAKit 96T/48T

5610-40-2一葉萩堿規(guī)格  Securinine   豬調(diào)節(jié)蛋白(TM)試劑盒 Porcine thrombomodulin,TM ELISA Kit

55916-51-3重樓皂苷VI規(guī)格  Polyphyllin VI  豬素A2(TXA2)試劑盒 Pig Thromboxane A2,TXA2 ELISA Kit

5578-73-4血根堿規(guī)格  Sanguinarine  豬血清淀粉樣蛋白A(SAA)試劑盒 Pig serum amyloid A,SAA ELISA Kit
PG13 逆轉(zhuǎn)錄病毒包被的TK-NIH3T3細胞 牛結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISA檢測試劑盒BovineHaptoglobin,Hpt/HPELISAKIT 96T/48T  23599-69-1去甲異波爾定   Norisoboldine

人apelin 13(AP13)試劑盒 Human apelin 13,AP13 ELISA Kit  107316-88-1去甲澤拉木醛說明書  Demethylzeylasteral

英文名稱MouseIerleukin-3,IL-3ELISAKIT小鼠白介素3(IL-3)規(guī)格：96T/48T  2680-81-1去氫二異丁香酚品牌  Dehydrodiisoeugenol

冰凍切片中性脂質(zhì)油紅O染色試劑盒50  去氫茯苓酸規(guī)格  Dehydropachymic acid

Ratcholesterolesteransferprotein,CETPELISA試劑盒大鼠膽酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  1630-94-4去氫鉤藤堿   corynoxeine