細(xì)胞培養(yǎng)過程：

產(chǎn)品僅用于科研冷凍保存細(xì)胞之方法：
豬胚胎睪丸傳代細(xì)胞形態(tài)冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

資源名稱　豬胚胎睪丸傳代細(xì)胞形態(tài)
種屬:ST

形態(tài):上皮細(xì)胞樣

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle＇sBalancedSalts)10%FBS　

生長特性:貼壁生長

細(xì)胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運(yùn)輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因?yàn)閺?fù)蘇手法對于細(xì)胞狀態(tài)影響較大，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好，很難說是細(xì)胞自身不行，還是復(fù)蘇沒操作好；另外溫度對細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細(xì)胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運(yùn)輸也對細(xì)胞影響也不大，只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞凍存步驟：

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
產(chǎn)品僅用于科研一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。

收到豬胚胎睪丸傳代細(xì)胞形態(tài)處理方法
1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細(xì)胞密度超過80%，可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作。
以下是豬胚胎睪丸傳代細(xì)胞形態(tài)的相關(guān)熱銷產(chǎn)品：
正癸醇(Standard for GC,≥99.5%(GC))n-Decyl alcohol質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC,≥99.5%(GC)  小鼠ELISA試劑盒  素B2(TXB2)ELISA試劑盒 ，英文名： TXB2 ELISA Kit

琥珀(standard for GC,≥99.6%(GC))Diethyl succinate質(zhì)量規(guī)格：standard for GC,≥99.6%(GC)  小鼠前動力蛋白2(PK2)ELISA試劑盒 ，英文名： PK2 ELISA Kit  MouseCompleme1inhibitoraoaibody,C1INHELISA試劑盒小鼠補(bǔ)體1抑制物抗體(C1INH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

癸二(Standard for GC, ≥99.5% (GC))Diethyl sebacate質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC, ≥99.5% (GC)  人維生素D2(VD2)ELISA檢測試劑盒HumanVitaminD2,VD2ELISAKit 96T/48T  ELISAKitS-100小鼠S100蛋白規(guī)格：48T/96T

二十二烷(standard for GC,≥99.0%(GC))Docosane質(zhì)量規(guī)格：standard for GC,≥99.0%(GC)  大鼠整合素αM型((ITG αM/CD11b)試劑盒 Rat Iegrin αM,ITG/CD11b ELISA Kit  Chickeoxoplasmacirculatingaigen,TCAELISAKit雞弓形蟲循環(huán)抗原(TCA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠兒茶酚胺(CA)ELISA檢測試劑盒Mousecatecholamine,CAELISAKit 96T/48T  57420-46-9胡麻屬苷品牌  Sesamoside

人抗α-胞襯蛋白抗體(IgG)試劑盒 Human ai-alpha-Fodrin aibody IgG ELISA Kit  98243-57-3湖貝甲素規(guī)格  Hupehenine

RabbitUrokinase-typePlasminogenActivatorReceptor,PLAUR/uPARELISAKit兔尿激酶型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  535-83-1葫蘆巴堿   Trigonelline

載玻片細(xì)胞GSK-3BETA蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒10/20  1370264-16-6擬人參皂苷-Rh2說明書  3-O-β-D-glucopyranosyl-3β,12β,25-trihydroxyldammar-(E)-20(22)-ene

Humanβ-Lactamaseinhibitors,BLIELISA試劑盒人β內(nèi)酰胺酶抑制劑(BLI)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  6199-67-3葫蘆素B品牌  Cucurbitacin B
59-30-3葉酸說明書  Folic acid   豬早老素2(PS-2)試劑盒 Pig Presenilin 2,PS-2 ELISA Kit

59219-65-7豯薟苷品牌  Darutoside  豬早老素1(PS-1)試劑盒 Pig Presenilin 1,PS-1 ELISA Kit

590-46-5鹽酸甜菜堿說明書  Betaine   豬載脂蛋白E(Apo-E)試劑盒 Pig apolipoprotein E,Apo-E ELISA Kit

58812-37-6川楝素規(guī)格  Toosendanin   豬載脂蛋白B100(apo-B100)試劑盒 Porcine apo-B100 ELISA Kit

58749-23-8甘草查爾酮B規(guī)格  Licochalcone B   豬載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA檢測試劑盒PorcineapoproteinB100,apo-B100ELISAKit 96T/48T
豬胚胎睪丸傳代細(xì)胞形態(tài)化大鼠腎上腺髓質(zhì)素(AM)基因重組表達(dá)載體(pGEFP-AM)10微克  64849-39-4甜葉懸鉤子苷說明書  Rubusoside

RatHistoneDeacetylase,HDELISA試劑盒大鼠組織蛋白去乙?；?/span>(HD)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  20137-37-5鐵冬青酸品牌  Rutundicacid 

小鼠脂多糖/內(nèi)(LPS)ELISA試劑盒 ，英文名： LPS ELISA Kit  191729-45-0通關(guān)藤苷H規(guī)格  Tenacissoside H

小鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA檢測試劑盒Mouseα1-Acidglycoprotein,α1-AGPELISAKit 96T/48T  928151-78-4通關(guān)藤苷F   Tenacissoside F

人巨噬細(xì)胞移動抑制因子(MIF)試劑盒 Human MIF ELISA Kit  191729-44-9通關(guān)藤苷I說明書  Tenacissoside I