人紅系細胞說明書冷凍保存細胞之方法：

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
細胞凍存步驟：

資源名稱　人紅系細胞說明書
種屬:TF-1

形態(tài):淋巴母細胞樣　

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:RPMI1640(w/oHepes)10%FBS；4mMglutamine　

傳代方法:維持細胞濃度在3×104~5×105cells/ml；2~3天換液1次。

生長特性:懸浮生長　

存儲條件:基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
細胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因為復蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大，一旦細胞狀態(tài)不好，很難說是細胞自身不行，還是復蘇沒操作好；另外溫度對細胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種：產(chǎn)品僅用于科研
是我們復蘇好細胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶，排除復蘇造成影響，常溫運輸也對細胞影響也不大，只需加25元運費(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。
細胞培養(yǎng)過程：

細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?/span>10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。
以下是人紅系細胞說明書的相關(guān)熱銷產(chǎn)品：
正十三烷基-beta-D-麥牙糖苷(>98%,BC)n-Tridecyl-b-D-maltopyranoside (e)質(zhì)量規(guī)格：>98%,BC  病毒HRP標記制備試劑盒5(100微克/)  HumanapoproteinB100,apo-B100ELISAKit 人載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

辛二酸(>Octanedioic acid質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR  Ratfibroblastgrowthfactor-10,FGF-10ELISA試劑盒大鼠成纖維細胞生長因子10(FGF-10)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  Humanmannanbindinglectinassociatedserineprotease,MASPELISA試劑盒人甘露聚糖結(jié)合凝集素相關(guān)絲氨酸蛋白酶(MASP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

橄欖油Olive oil質(zhì)量規(guī)格：商品級  小鼠組織蛋白酶S(CTSS)ELISA試劑盒 ，英文名： CTSS ELISA Kit  組織氧化應(yīng)激活性氧(ROS)比色法測定試劑盒(單線態(tài)氧氣)20

鄰甲氧基肉桂醛(>o-Methoxycinnamaldehyde質(zhì)量規(guī)格：>98%，BR  綿羊白介素1(IL-1)ELISA檢測試劑盒SheepIerleukin1,IL-1ELISAKit 96T/48T  HumanHelicobacterpyloriIgM，Hp-IgMELISAKit人幽門螺旋桿菌IgM(Hp-IgM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
犬素B2(TXB2)ELISA檢測試劑盒CanineThromboxaneB2,TX-B2ELISAKit 96T/48T  66280-25-9戈米辛J   Gomisin J

犬心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)試劑盒 Canine Cardiac oponin Ⅰ,cTn-Ⅰ ELISA kit  61371-55-9格列風內(nèi)酯說明書  Griffonilide

英文名稱HumanHistoneDeacetylaseELISAKit人組織蛋白去乙酰化酶(HD)規(guī)格：96T/48T  3681-99-0葛根素品牌  Puerarin

超聲化鮭魚精單鏈DNA10毫升  60-81-1根皮苷規(guī)格  Phlorizin

RatGlycogenphosphorylaseBB,GP-BBELISA試劑盒大鼠糖原1酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  60-82-2根皮素   Phloretin
61281-38-7五味子甲素   schisandrin A  轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品35S試劑盒20

61281-37-6五味子乙素說明書  Schizandrin B  豬組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)試劑盒 Porcine Tissue-type Plasiminogen Actilyse,t-PA ELISA Kit

61276-17-3毛蕊花糖苷   acteoside  豬組胺(HIS)試劑盒 Porcine Histamine ELISA Kit

611-71-2苦杏仁酸   Mandelic acid  豬組胺(HIS)ELISA檢測試劑盒PorcineHistamine,HISELISAKit 96T/48T

611-40-5射干苷說明書  Tectoridin  豬轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR)試劑盒 Pig ansferrin receptor,TFR ELISA Kit
人紅系細胞說明書超氧陰離子清除劑TEMPOL溶液1毫升/500毫摩爾  485-72-3芒柄花黃素說明書  Formononetin

Ratheatshockprotein27,HSP-27ELISA試劑盒大鼠熱休克蛋白27(HSP-27)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  4773-96-0芒果苷品牌  Mangiferin

小鼠受體超家族成員10A(TNFRSF10A)ELISA試劑盒 ，英文名： TNFRSF10A ELISA Kit  138-59-0莽草酸規(guī)格  Shikimic acid

犬特異性抗原(PSA)ELISA檢測試劑盒Canineprostatespecificaigen,PSAELISAKit 96T/48T  毛地黃素   Digitaline

犬生長激素(GH)試劑盒 Dog growth hormone,GH ELISA Kit  毛萼結(jié)晶甲說明書  Maoecrystal A
收到人紅系細胞說明書處理方法
產(chǎn)品僅用于科研1、首先，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸浮）、細胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細胞密度超過80%，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml；若細胞密度未超過80%，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。