野生型人c-kit受體細(xì)胞株培養(yǎng)冷凍保存細(xì)胞之方法：

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí)， 以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
細(xì)胞凍存步驟：

資源名稱　野生型人c-kit受體細(xì)胞株培養(yǎng)
種屬:A7d

形態(tài):圓形

提供形式:T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶/凍存管

模式菌株:未知

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:RPMI1640(w/oHepes)10%FBS；IL-3

傳代方法:1:3傳代；3~4天1次。

生長(zhǎng)特性:懸浮生長(zhǎng)

存儲(chǔ)條件:基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
細(xì)胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運(yùn)輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因?yàn)閺?fù)蘇手法對(duì)于細(xì)胞狀態(tài)影響較大，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好，很難說(shuō)是細(xì)胞自身不行，還是復(fù)蘇沒操作好；另外溫度對(duì)細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細(xì)胞儲(chǔ)存的zui好方式，快遞時(shí)間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。
第二種：產(chǎn)品僅用于科研
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞，QC通過(guò)后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運(yùn)輸也對(duì)細(xì)胞影響也不大，只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程：

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號(hào)11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號(hào)16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
以下是野生型人c-kit受體細(xì)胞株培養(yǎng)的相關(guān)熱銷產(chǎn)品：
中性蛋白酶Neutral Protease from Bacillus polymyxa質(zhì)量規(guī)格：酶活：20萬(wàn)u/g  10%中性Formalin固著液50毫升  病毒Ⅱ型(DFV-Ⅱ)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?/span>) 48T

Tigecycline質(zhì)量規(guī)格：含量>99.0%  Mousecarbonicanhydrase2,CA-2ELISA試劑盒小鼠酶2(CA-2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  HumanProteinase3Aibody,PR3AbELISA試劑盒人蛋白酶3抗體(PR3Ab)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

（標(biāo)準(zhǔn)品）Tigecycline質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品  小鼠血纖蛋白原(Fbg)ELISA試劑盒 ，英文名： Fbg ELISA Kit  ELISAKitFree-T3小鼠游離三甲狀腺原氨酸規(guī)格：48T/96T

替米考星Tilmicosin質(zhì)量規(guī)格：干品度≥90.0%，干品含量≥85.0%，USP34  小鼠信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子(Smad1)ELISA檢測(cè)試劑盒Mousesignalansduction-Smad1ELISAKit 96T/48T  HumanColonCancerAigen，CCAELISAKit人抗原(CCA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
犬性因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)試劑盒 Dog von Willebrand Factor,vWF ELISA Kit  97-53-0丁香酚規(guī)格  Eugenol

英文名稱FN纖維連結(jié)蛋白規(guī)格：96T/48T  530-57-4丁香酸   Syringic acid

腸胃活檢螺旋桿菌(H.PYLORI)亞甲基藍(lán)(METHYLENEBLUE)染色試劑盒50  12777-70-7東北貫眾素說(shuō)明書  Dryocrassin ABBA

Ratghcagons-likepepfide1,GLP-1ELISA試劑盒大鼠胰素樣肽1(Glp-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  531-44-2東莨菪苷品牌  Scopolin

小鼠轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(TNPO1)ELISA試劑盒 ，英文名： TNPO1 ELISA Kit  51-34-3東莨菪堿規(guī)格  Scopolamine
6926-14-3乙酰哈巴苷說(shuō)明書  8-O-Acetylharpagide   組蛋白H4-K8乙?；瘷z測(cè)試劑盒10/20等

6926-14-3乙酰哈巴苷品牌  Acetylharpagide  組蛋白H4-K5乙?；瘷z測(cè)試劑盒10/20等

69091-17-4β-乙酰氧基異戊酰阿卡寧規(guī)格  β-acetoxyisovalerylalkannin  組蛋白H4-K31(mono)甲基化檢測(cè)試劑盒10/20等

6902-91-6吉馬酮說(shuō)明書  Germacrone   組蛋白H4-K20(mono/di/i)甲基化檢測(cè)試劑盒10/20等

6902-77-8京尼平   Genipin   組蛋白H4-K16乙酰化檢測(cè)試劑盒10/20等
野生型人c-kit受體細(xì)胞株培養(yǎng)Very low density lipoprotein receptor (VLDLR) ELISA Kit 人極受體(VLDLR)ELISA試劑盒  93675-88-8連翹酯苷E說(shuō)明書  Forsythoside E 

guineapigLeukoieneB4,LT-B4ELISAKit 豚鼠白三烯B4(LTB4)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝  28282-25-9β-欖香酮酸品牌  β-EleMonic acid 

CLIAKitforANG-IIELISAKit大鼠緊張素Ⅱ規(guī)格：48T/96T  173429-83-9補(bǔ)骨脂香豆素A規(guī)格  Ficusin A 

血液脯氨酰肽酶(prolinase)比色法定量檢測(cè)試劑盒20  7437-55-08-香葉草氧基補(bǔ)骨脂素   8-Geranyloxypsoralen 

PorcineDexamethasone,DexELISAKit豬地塞米松(Dex)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  14259-47-3香蜂草苷說(shuō)明書  DidyMin
收到野生型人c-kit受體細(xì)胞株培養(yǎng)處理方法
產(chǎn)品僅用于科研1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請(qǐng)拍照，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%，可正常傳代；若未超過(guò)80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí)，若細(xì)胞密度超過(guò)80%，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過(guò)80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作。