人晶體上皮細(xì)胞永生系培養(yǎng)來(lái)源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實(shí)驗(yàn)等提供全程服務(wù)。我司擁有專(zhuān)業(yè)的實(shí)驗(yàn)室，可無(wú)菌操作并提供相關(guān)科研項(xiàng)目解決方案以及實(shí)驗(yàn)服務(wù)。產(chǎn)品僅用于科研

資源名稱(chēng)　人晶體上皮細(xì)胞永生系
種屬:SRA01/04[HLE]

類(lèi)型:貼壁生長(zhǎng)

形態(tài):上皮樣細(xì)胞

提供形式:T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶/凍存管

安全等級(jí):1

模式菌株:未知

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:90%高糖DMEM（含4mM L-谷氨酰胺、丙酮酸鈉）+10%FBS

傳代方法:1:3傳代；3~4天1次。

生長(zhǎng)條件:95%空氣+5%二氧化碳 37攝氏度

存儲(chǔ)條件:90%FBS+10%DMSO 液氮

培養(yǎng)操作步驟：
人晶體上皮細(xì)胞永生系培養(yǎng)產(chǎn)品僅用于科研1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布； 
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）； 
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)； 
4．將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中； 
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。 
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀(guān)察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類(lèi)型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用*化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀(guān)察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備  記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等； 
適用的對(duì)象范圍廣，從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物，一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。
以下是公司正在在熱銷(xiāo)的產(chǎn)品：
重水,氧化氘(0.6ml*10)質(zhì)量規(guī)格：D,99.9%Deuterium Oxide  英文名稱(chēng)RatmicroalbunminuriaELISAKIT大鼠微量白(ALB)規(guī)格：96T/48T  人T細(xì)胞活化連接蛋白(LAT)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

重水,氧化氘(0.6ml*10)質(zhì)量規(guī)格：D,99.96%Deuterium Oxide  烘賠食物L-天門(mén)冬酰胺化學(xué)比色法定量檢測(cè)試劑盒20  兔子S100B蛋白(S-100B)試劑盒 Rabbit Soluble protein-100B,S-100B ELISA Kit

重水,氧化氘(10G)質(zhì)量規(guī)格：D,99.96%Deuterium Oxide  ELISAKitHB-β人血紅蛋白β亞基規(guī)格：48T/96T  熱穩(wěn)定抗原(HSA/CD24)ELISA試劑盒 ，英文名： HSA/CD24 ELISA Kit

重水,氧化氘(25G)質(zhì)量規(guī)格：D,99.9%Deuterium Oxide  小鼠色素瘤(Melanoma)ELISA試劑盒 ，英文名： Melanoma ELISA Kit  Rabbitalpha-granularmembraneprotein,GMP-140ELISA試劑盒兔血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
人抗白色念珠菌(C.albicans)IgE抗體 試劑盒 Human Candida Albicans(C.albicans)IgE aibody ELISA Kit  110623-73-9朝藿定B規(guī)格  Epimedin B

Rabbitansforminggrowthfactorβ2,TGFβ2ELISAKit兔轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGFβ2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  110642-44-9朝藿定C   Epimedin C

載玻片細(xì)胞EGFR蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20  7212-44-4橙花叔醇說(shuō)明書(shū)  Nerolidol

Humanβ2-Glycoprotein1AibodyIgM,β2-GP1AbIgMELISA試劑盒人β2糖蛋白1抗體IgM(β2-GP1AbIgM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  67979-25-3橙黃決明素品牌  Aurantio-obtusin

小鼠組蛋白H2B(H2B)ELISA試劑盒 ，英文名： H2B ELISA Kit  520-26-3橙皮苷規(guī)格  Hesperidin
79559-55-0乙氧基白屈菜紅堿   Ethoxychelerythrine  組織ARG/ABL2激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20

79498-31-0藍(lán)萼甲素說(shuō)明書(shū)  glaucocalyxin A  組織AMPK激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20

79484-75-6刺五加苷D規(guī)格  Eleutheroside D   組織Akt3/PKBγ激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20

78763-58-3去芹糖桔梗皂苷D說(shuō)明書(shū)  Deapio platycodinD   組織Akt2/PKBβ激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20

78478-28-1白花前胡素E說(shuō)明書(shū)  Praeruptorin E   組織Akt1/PKBa激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20
人晶體上皮細(xì)胞永生系培養(yǎng)Rathepatocytegrowthfactor,HGFELISA試劑盒大鼠肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  32791-84-7人參三醇品牌  Panaxatriol

小鼠脂氧素A4(LXA4)ELISA試劑盒 ，英文名： LXA4 ELISA Kit  39262-14-1人參皂苷CK規(guī)格  Compound CK

小鼠熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA檢測(cè)試劑盒Mouseheatshockprotein60,hSP-60ELISAKit 96T/48T  53963-43-2人參皂苷F1   Ginsenoside F1

人軍團(tuán)菌抗體IgA(LP Ab-IgA)試劑盒 Human Legionella aibody IgA,LP Ab-IgA ELISA Kit  62025-49-4人參皂苷F2說(shuō)明書(shū)  Ginsenoside F2

RatActivinA,ACV-AELISAKit大鼠活化素A(ACV-A)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  62025-50-7人參皂苷F3品牌  Ginsenoside F3
操作流程：
1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開(kāi),吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長(zhǎng)至60%～70%融合時(shí)，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀(guān)察 在倒置顯微鏡下觀(guān)察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀(guān)察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中，每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計(jì)算貼壁率。 
1.6 生長(zhǎng)曲線(xiàn) 取指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線(xiàn)