培養(yǎng)操作步驟：
大額牛肺細(xì)胞形態(tài)1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布； 
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）； 
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)； 
4．將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中； 
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。產(chǎn)品僅用于科研 

資源名稱　大額牛肺細(xì)胞
種屬:BFR-L1

形態(tài):成纖維細(xì)胞樣

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:M-199:withEarle＇sBalancedSaltsSolution(EBSS)胎牛血清15%

生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類(lèi)型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用*化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備  記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等； 
適用的對(duì)象范圍廣，從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物，一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。
以下是公司正在在熱銷(xiāo)的產(chǎn)品：
唑來(lái)1酸（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Zoledronic acid hydrate  人小扁結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體2(AFP-L2)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanalpha-fetoproteinLensculinarisaggliin2,AFP-L2ELISAKit 96T/48T  Humancalmodulin,CAMELISA試劑盒人鈣調(diào)素(CAM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

檸檬酸鉍質(zhì)量規(guī)格：BRBismuth (III)   大鼠溶質(zhì)載體家族2(易化葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白),成員2(SLC2A2)試劑盒 Rat Sole carrier family 2,facilitated glucose anspoer member 2,SLC2A2 ELISA kit  HumancytotoxicTlymphocyteassociatedaigen4,CTLA-4ELISAKit人細(xì)胞毒性T細(xì)胞相關(guān)抗原4(CTLA-4/CD152)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

化鉍鉀質(zhì)量規(guī)格：BRBismuth (III) potassium iodide  英文名稱RatEndothelialniicoxidesyhase3ELISAKit大鼠內(nèi)皮型合成酶3(eNOS-3)規(guī)格：96T/48T  犬內(nèi)皮型合成酶(eNOS)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

硫酸鉍(>質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRBismuth (III) sulfate  基因靶標(biāo)技術(shù)試劑盒5  山羊促生長(zhǎng)激素釋放激素(GHRH)試劑盒 Goat growth hormone releasing hormone,GHRH ELISA Kit
Very low density lipoprotein receptor (VLDLR) ELISA Kit 人極受體(VLDLR)ELISA試劑盒  93675-88-8連翹酯苷E說(shuō)明書(shū)  Forsythoside E 

guineapigLeukoieneB4,LT-B4ELISAKit 豚鼠白三烯B4(LTB4)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝  28282-25-9β-欖香酮酸品牌  β-EleMonic acid 

CLIAKitforANG-IIELISAKit大鼠緊張素Ⅱ規(guī)格：48T/96T  173429-83-9補(bǔ)骨脂香豆素A規(guī)格  Ficusin A 

血液脯氨酰肽酶(prolinase)比色法定量檢測(cè)試劑盒20  7437-55-08-香葉草氧基補(bǔ)骨脂素   8-Geranyloxypsoralen 

PorcineDexamethasone,DexELISAKit豬地塞米松(Dex)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  14259-47-3香蜂草苷說(shuō)明書(shū)  DidyMin
醉魚(yú)草皂苷Ⅳ規(guī)格  buddlejasaponin IV  組織長(zhǎng)鏈脂酰輔酶A脫氫酶(ACYLCOADEHYDROGENASE)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20

總大豆皂苷B     組織長(zhǎng)鏈烯脂酰輔酶A水合酶(ENOYLCOAHYDRATASE)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20

紫萁酮品牌  Osmundacetone  組織氧化酶(DAO)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒20

遠(yuǎn)志皂苷B品牌  Onjisaponin B; Senegin III   組織氧化酶(DAO)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20

遠(yuǎn)志皂苷A說(shuō)明書(shū)  Onjisaponin A   組織型肝炎病毒蛋白酶(HCVPROTEASE)活性熒光淬滅法定量檢測(cè)試劑盒20
大額牛肺細(xì)胞形態(tài)ATP酶法冰凍切片動(dòng)物肌肉組織分型染色試劑盒20  20315-25-7原B1說(shuō)明書(shū)  Proanthocyanidin B1

MouseHistamine,HISELISA試劑盒小鼠組胺(HIS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  480-36-4蒙花苷品牌  Buddleoside

小鼠原肌球調(diào)節(jié)蛋白3(TMOD3)ELISA試劑盒 ，英文名： TMOD3 ELISA Kit  343-27-1鹽酸去氫駱駝蓬堿規(guī)格  Harmine 

猴載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA檢測(cè)試劑盒MonkeyapoproteinA1,apo-A1ELISAKit 96T/48T  1241-87-81-咖啡?？鼘幩?   Cyclohexanecarboxylicacid

犬基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/Gelatinase A)試劑盒 Canine Maix metalloproteinase 2/Gelatinase A,MMP-2 ELISA kit  柴胡皂苷B說(shuō)明書(shū)  Saikosaponin B
操作流程：
1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開(kāi),吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長(zhǎng)至60%～70%融合時(shí)，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。產(chǎn)品僅用于科研
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中，每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計(jì)算貼壁率。 
1.6 生長(zhǎng)曲線 取指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線
大額牛肺細(xì)胞形態(tài)來(lái)源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實(shí)驗(yàn)等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室，可無(wú)菌操作并提供相關(guān)科研項(xiàng)目解決方案以及實(shí)驗(yàn)服務(wù)。