家豬皮膚細胞說明書冷凍保存細胞之方法：

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
細胞凍存步驟：

資源名稱　家豬皮膚細胞說明書
種屬:SSC-S1

形態(tài):成纖維細胞樣

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:M-199:withEarle＇sBalancedSaltsSolution(EBSS)15%NBS；1ng/mlFGF

生長特性:貼壁生長
細胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因為復蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大，一旦細胞狀態(tài)不好，很難說是細胞自身不行，還是復蘇沒操作好；另外溫度對細胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種：產(chǎn)品僅用于科研
是我們復蘇好細胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶，排除復蘇造成影響，常溫運輸也對細胞影響也不大，只需加25元運費(順豐)。
質量保證：我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。
細胞培養(yǎng)過程：

細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。
以下是家豬皮膚細胞說明書的相關熱銷產(chǎn)品：
SLAMF7 Others Human 人 SLAMF7 / CRACC / CD319 人細胞裂解液 (陽性對照) 瓊脂糖凝膠4Bshēng huà shì jì容量：10毫克

CL-0080WB-F344(大鼠肝上皮樣干細胞)5×106cells/瓶×2苯扎溴銨 Benzyldodecyldimethylammonium bromide,... 7281-4-1 1G 通用試劑

AKT3 Others Human 人 AKT3 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 異務迷;二異務迷 IsocMyl qtqr;DiisocMy qtqr;3-Mqthyl-1-(γ-Mqthyl butoxy)butcnq;1,1′-Oxybis[3-Mqthylbutcnq];lsopqntyl qtqr 244-01-4

SMCFectagen? 平滑肌細胞轉染試劑盒H-半胱酸-甘酸-OH，英文名或英文縮寫：Cys-Gly，級別：BR，98%，規(guī)格：100克

LoVo細胞，人細胞 HEK293,人胚腎上皮細胞,293A細胞 腎動脈平滑肌細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)(*)(易)potewwium perchlorate
293A，人胚腎上皮細胞系(腺病毒包裝級別) 小鼠胚胎成纖維細胞(前脂肪)，3T3L1細胞 Hs 683(人腦視神經(jīng)細胞)雄1二酮（標準品）質量規(guī)格：分析標準品,≥99%4-Androstene-3,17-dione

人侵襲性脈絡膜色素瘤細胞;MuM-2B赤芝酸A 質量規(guī)格：HPLC≥97%Lucidenic acid A

CADM1 Others Human 人 CADM1 / IGSF4A 人細胞裂解液 (陽性對照) 維生素E琥珀酸酯;D-α-生育酚琥珀酸酯質量規(guī)格：>95%,BRVitamin E succinate

293來源病毒包裝細胞;ΦA-GP伊沙匹隆質量規(guī)格：>99%,BRIxabepilone (Azaepothilone B; BMS 247550)

FST Others Human 人 FST / Follistatin 人細胞裂解液 (陽性對照) 新補骨脂異黃酮(標準品)質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品Neobavaisoflavone
CD200R1L Others Cynomolgus 食蟹猴 CD200Rla 人細胞裂解液 (陽性對照) 麥康凱瓊脂平板shēng huà shì jì容量：1米

人胚肝二倍體細胞;CCC-HEL-12,4-二錄本氧基醋 2,4-Dichlorophqnoxyccqtic ccid 94-72-7

大鼠星形膠質細胞(RA)(5×105)胰蛋白胨水shēng huà shì jì容量：100克

非洲綠猴腎細胞系/IgR;VERO/IgR鄰本二shēng huà shì jì容量：500克

KM小鼠子瘤株;U14 小鼠腎小球內皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL17282-04-12-錄-3-扶2-Chloro-3-fluoropyridine
家豬皮膚細胞說明書SMPD1 Others Mouse 小鼠 SMPD1 / ASM 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 丹蒽醌（標準品）1,8-Dihydroxyanthraquinone質量規(guī)格：含量測定

CM-H030人外周血白細胞完全培養(yǎng)基100mL己定（標準品）Chlorhexidine 質量規(guī)格：HPLC法含量測定

MG-63, 人細胞 細胞,CBRH-7919細胞 TT(人骨髓樣細胞)鹽酸甲氧那明（標準品）Methoxyphenamine HCl質量規(guī)格：含量測定

正常小鼠Sertoli細胞;TM4愈創(chuàng)木酚磺酸鉀（標準品）Potassium guaiacolsulfonate hemihydrate質量規(guī)格：供HPLC法含量測定用

CD7 Others Human 人 CD7 人細胞裂解液 (陽性對照) 棓丙酯（標準品）Propyl gallate質量規(guī)格：含量測定
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產(chǎn)品僅用于科研1、首先，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細胞形態(tài)、所用基礎培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng)基，預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內液體全部轉移至50ml無菌離心管內，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細胞密度超過80%，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml；若細胞密度未超過80%，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。