細(xì)胞培養(yǎng)過程：

產(chǎn)品僅用于科研冷凍保存細(xì)胞之方法：
豬內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài)冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

資源名稱　豬內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài)
種屬:ZYM-SVEC01

形態(tài):上皮細(xì)胞樣

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle＇sBalancedSalts)10%FBS

生長特性:貼壁生長

細(xì)胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因為復(fù)蘇手法對于細(xì)胞狀態(tài)影響較大，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好，很難說是細(xì)胞自身不行，還是復(fù)蘇沒操作好；另外溫度對細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細(xì)胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運輸也對細(xì)胞影響也不大，只需加25元運費(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞凍存步驟：

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
產(chǎn)品僅用于科研一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。

收到豬內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài)處理方法
1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細(xì)胞密度超過80%，可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作。
以下是豬內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài)的相關(guān)熱銷產(chǎn)品：
CD8A Others Mouse 小鼠 CD8a / Lyt2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 褪素,果體素質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRMelatonine

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞(傣族);KM9403褪素,果體素（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Melatonine

MMGT1 Others Human 人 MMGT1 / EMC5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 瑞替加濱質(zhì)量規(guī)格：HPLC>95%,Retigabine

CL-0400NCI-H358(人非小細(xì)胞細(xì)胞)5×106cells/瓶×2利巴韋林質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRRibavirin

NISE-Sacy-12細(xì)胞，蓖麻蠶卵細(xì)胞 人原髓細(xì)胞細(xì)胞,HL60細(xì)胞 人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞;HK-2利巴韋林（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Ribavirin
Ca Ski 人腸轉(zhuǎn)移細(xì)胞鹽酸貝他定質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Bestatin

HCCC-9810人膽管細(xì)胞型細(xì)胞 HCCC-9810 human cholangiocarcinoma cell RPMI-1640(GIBCO)+10%FBSN-去甲基二鹽酸三氟拉嗪質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口N-Desmethyl Trifluoperazine Di

TGFB1 Protein Human 重組人 Late TGF-beta 1 / TGFB1 蛋白 (His 標(biāo)簽)雙硫侖-d20質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Disulfiram-d20

人髓核細(xì)胞(HNPC)(5×105) NIH/3T3, 小鼠成纖維細(xì)胞系 Mouse脫氧膽酸鈉鹽質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Deoxycholic Acid,  Salt

小鼠肺腺癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞(VAP33-GFP融合蛋白穩(wěn)定過表達(dá));LA1-VAP33-GFP二乙二醇二丁基(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)Diethylene Glycol Dibutyl Ether
NIH/3T3, 小鼠成纖維細(xì)胞系 Mouse對本二酚100毫克

EFNA4 Others Mouse 小鼠 EFNA4 / Ephrin-A4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 霧抑制劑 Chromium-fog inhibitor

人表皮色素細(xì)胞-深色素cDNAHEM-d cDNA聚乙二醇 6000 Poly(ethylene glycol) 6,000 (PEG6000) 25322-68-3 500G 通用試劑

IFNG Others Ferret 雪貂 IFNG / Ierferon Gamma 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 腸道菌計數(shù)瓊脂100克

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(HNP抗性);HNP MEF(CF-1)(D-半乳糖醛酸)
豬內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài)CEACAM6 Others Human 人 CD66c / CEACAM6 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 二甲基亞砜(色譜級)Dimethyl sulfoxide質(zhì)量規(guī)格：for HPLC, ≥99.7%

人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤;U-87 MG [U87MG;U87 MG]N,N-二甲基乙酰胺(色譜級)N-N-Dimethylacetamide質(zhì)量規(guī)格：for HPLC,≥99.8%(GC)

EPHB2 Others Human 人 EphB2 / Hek5 (aa 570-987) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 甘油(色譜級)Glycerol in water for HPLC verification質(zhì)量規(guī)格：for HPLC,≥99.5%

mRTEC, 小鼠腎小管上皮細(xì)胞十二烷基三甲基氯化胺[離子對色譜級]IPC-DTMA-Cl質(zhì)量規(guī)格：離子對色譜用試劑

RLF, 大鼠成纖維細(xì)胞 STJ.EPI.H7細(xì)胞 COS-1(SV40 轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞)乙酸二丁基銨(約0.5mol/L的水溶液)[離子對色譜級]IPC-DBAA (ca.  0.5mol/L in Water)質(zhì)量規(guī)格：用于液相色譜-質(zhì)譜的離子對試劑