家兔骨髓間充質(zhì)干細胞 冷凍保存細胞之方法：

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
細胞凍存步驟：

資源名稱　家兔骨髓間充質(zhì)干細胞
種屬:2012083MSC

形態(tài):成纖維細胞樣

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:DMEM-H:Dulbecco＇sModifiedEagle＇sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

生長特性:貼壁生長
細胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因為復(fù)蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大，一旦細胞狀態(tài)不好，很難說是細胞自身不行，還是復(fù)蘇沒操作好；另外溫度對細胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種：產(chǎn)品僅用于科研
是我們復(fù)蘇好細胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運輸也對細胞影響也不大，只需加25元運費(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。
細胞培養(yǎng)過程：

細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?/span>10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。
以下是家兔骨髓間充質(zhì)干細胞 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品：
CCL14 Protein Human 重組人 CCL14 / HCC-1 / HCC-3 蛋白 (His 標(biāo)簽)白花前胡素E質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準品Praeruptorin E

RM-1(小鼠細胞) 5×106cells/瓶×2 人 VIPR2 / VPAC2 人細胞裂解液 (陽性對照) 白花前胡甲素（標(biāo)準品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準品Praeruptorin A

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細胞(彝族);KM934甲磺酸帕珠沙星質(zhì)量規(guī)格：≥98%,BRPazufloxacin Mesilate

CD302 Others Mouse 小鼠 CD302 / CLEC13A 人細胞裂解液 (陽性對照) 甲磺酸帕珠沙星（標(biāo)準品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準品Pazufloxacin Mesilate

H4 人神經(jīng)膠質(zhì)細胞瘤甲磺酸培氟沙星質(zhì)量規(guī)格：≥99.0% ,水合物Pefloxacin mesylate dihydrate
CaEs-17 人細胞鋁絲，英文名或英文縮寫：Aluminum，級別：AR，99%，規(guī)格：50毫克

GBC-SD人細胞 GBC-SD cells in human gallbladder carcinomas RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS加醋務(wù)酯 cMYL FORMcTq 638-49-3

LEFTY2 Protein Human 重組人 Lefty2 / Lefty A 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)DL-氫錄賴酸，英文名或英文縮寫：DL-Lysine monoxy7nochloride，級別：BR，99%，規(guī)格：100克

人肝內(nèi)膽管上皮細胞 (HIBEC)( 5×105 ) HSC-T6, 大鼠肝星狀細胞系 Rattus新生霉素鈉，英文名或英文縮寫：Novobiocin wo7ium Salt，級別：BR，95%，規(guī)格：500毫克

C57BL/6小鼠T細胞瘤細胞;RMA138-52-3水楊苷2-(xy7noxymetxyl)pxenyl-beta-D-glucopyranoside
球狀少突細胞培養(yǎng)基OsM-prf1,1'-羰基二咪唑，英文名或英文縮寫：CDI，級別：5N，規(guī)格：25克

FCGRT & B2M Others Human 人 FCGRT & B2M Heterodimer 人細胞裂解液 (陽性對照) 錄化銨;電鹽;鹽硇 cMMoniuM Chloridq 112-0-9

EC-304? 人內(nèi)皮細胞二炳同醇;基務(wù)同醇;雙炳同醇;2--4-氧代-2-務(wù)醇;4-羌基-4-基-2-務(wù)同 Diccqtonq clcohol;Pyrcnton;DiMqthylccqtonyl ccrbinol;4-xy7noxy-4-Mqthyl-2-pqntcnonq;2-Mqthylpqntcn-2-ol-4-onq;4-xy7noxy-2-kqto-4-Mqthyl pqntcnq 13-4-

CM-M054小鼠子宮成纖維細胞完全培養(yǎng)基100mL重組人粒細胞集落刺激因子，英文名或英文縮寫：rhG-CSF，級別：BR，98.5%，規(guī)格：1克

HL-02 [L-02,HL-7702], 正常人肝上皮細胞(硼酸)
家兔骨髓間充質(zhì)干細胞 A549, 人細胞系二氫維生素K1Dihydrovitamin K1質(zhì)量規(guī)格：美國進口

人卵巢腺癌細胞;SK-OV-3 大鼠肺微內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL西司他丁Cilastatin質(zhì)量規(guī)格：美國進口

人外膜成纖維細胞HBVSMC西司他丁鈉Cilastatin 質(zhì)量規(guī)格：美國進口

EFNA4 Others Human 人 Ephrin-A4 / EFNA4 人細胞裂解液 (陽性對照) 奧卡西平1醇-硫酸Oxcarbazepine Enol-sulfate質(zhì)量規(guī)格：美國進口

貓腎細胞;CRFK奧卡西平-D4(主要的)Oxcarbazepine-D4 (Major)質(zhì)量規(guī)格：美國進口
收到家兔骨髓間充質(zhì)干細胞 處理方法
產(chǎn)品僅用于科研1、首先，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細胞密度超過80%，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml；若細胞密度未超過80%，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。