細(xì)胞培養(yǎng)過程：

產(chǎn)品僅用于科研冷凍保存細(xì)胞之方法：
人氣道上皮細(xì)胞說明書冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí)， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

資源名稱　人氣道上皮細(xì)胞說明書
種屬:HBE135-E6E7

類型:貼壁生長(zhǎng)

形態(tài):上皮細(xì)胞樣

提供形式:T25培養(yǎng)瓶細(xì)胞/凍存管

安全等級(jí):2

模式菌株:未知

應(yīng)用領(lǐng)域This cell line may be used as a reference in cDNA microarray studies to demonstrate lung cancer profiles correlating with clinical outcome or biology of tumors. RefWigle DA, et al. Molecular profiling of non-small cell lung cancer and correlation with disease-free survival. Cancer Res. 62: 3005-3008, 2002. PubMed: 12036904 

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:90%RPMI-1640+10%FBS

生長(zhǎng)條件:95%空氣+5%二氧化碳 37攝氏度

存儲(chǔ)條件:90%FBS+10%DMSO 液氮

細(xì)胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運(yùn)輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因?yàn)閺?fù)蘇手法對(duì)于細(xì)胞狀態(tài)影響較大，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好，很難說是細(xì)胞自身不行，還是復(fù)蘇沒操作好；另外溫度對(duì)細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細(xì)胞儲(chǔ)存的zui好方式，快遞時(shí)間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運(yùn)輸也對(duì)細(xì)胞影響也不大，只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞凍存步驟：

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
產(chǎn)品僅用于科研一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號(hào)11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號(hào)16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。

收到人氣道上皮細(xì)胞說明書處理方法
1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請(qǐng)拍照，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí)，若細(xì)胞密度超過80%，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作。
以下是人氣道上皮細(xì)胞說明書的相關(guān)熱銷產(chǎn)品：
紫丁香酚苷（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Syringin  英文名稱MouseFXELISAKit小鼠凝血因子X(FX)規(guī)格：96T/48T  大鼠粘蛋白/粘液素1(MUC1)ELISA試劑盒 ，英文名： MUC1 ELISA Kit

竹節(jié)參皂苷IVa（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：供含量測(cè)定用chikusetsu saponin Iva  VMA高效液相色譜電化學(xué)定量檢測(cè)試劑盒20  人β血小板球蛋白/β環(huán)蛋白(β-TG)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanβ-Thromboglobulin,β-TGELISAKit 96T/48T

毛蘭素（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：供含量測(cè)定用3'-Hydroxy-3,4,4',5-tetraMethoxybibenzyl  Rabbitplasmin-aiplasmincomplex,PAPELISA試劑盒兔纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  大鼠白介素6(IL-6)試劑盒 Rat Ierleukin 6,IL-6 ELISA KIT

石斛酚（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：鑒別dendrophenol  小鼠白介素17(IL-17)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  CLIAKitfoGF-Beta1(MouseansformingGrowthfactorBeta1)ELISAkit小鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1規(guī)格：48T/96T
山羊主要組織相容性復(fù)合體(MHC/OLA)ELISA檢測(cè)試劑盒Goatmajorhistocompatibilitycomplex,MHC/OLAELISAKit 96T/48T  70553-76-3蝙蝠葛蘇林堿   Daurisoline 

犬前體蛋白(TpP)試劑盒 Canine thrombus precursor protein,TpP ELISA Kit  524-17-4蝙蝠葛堿說明書  Dauricine 

英文名稱Mouse14-3-3proteinELISAKit小鼠14-3-3蛋白(14-3-3pro)規(guī)格：96T/48T  1258-84-0扁塑藤素品牌  Pristimerin

腸集聚型大腸埃希菌(EeroaggregativeE.coli)鑒定16SrDNAPCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒20  572-30-5扁蓄苷規(guī)格  Avicularin

RatGamma-aminobyricacid,GABAELISA試劑盒大鼠γ氨基(GABA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  524-17-4蝙蝠葛堿   Dauricine
873001-54-83,29-二苯甲?；闃侨嗜?   3,29-Dibenzoyl Rarounitriol   組織毒1蛋白酶(HIV-1PROTEASE)活性熒光淬滅法定量檢測(cè)試劑盒20

87205-99-0二氫丹參酮Ⅰ說明書  Dihydrotanshinone I   組織毒1蛋白酶(HIV-1PROTEASE)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20

86639-52-37-乙基-10羥基喜樹堿說明書  7-Ethyl-10-hydroxycamptothecin   組織β-內(nèi)酰胺酶報(bào)告基因活性熒光定量檢測(cè)試劑盒20

866366-86-1噻嗪二酮苷規(guī)格  Xanthiside   組織β氨基己糖苷酶(β-hexosaminidase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20

86632-03-33,4,5-三咖啡?？鼘幩崞放?/span>  3,4,5-Tricaffeoylquinic acid   組織α-L-巖藻糖苷酶(AFU)比色法定量檢測(cè)試劑盒20
人氣道上皮細(xì)胞說明書RatFibrinogenDegradationProduct,FDPELISA試劑盒大鼠血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  201-482-7豆甾醇   Stigmasterol

小鼠組織金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP1)ELISA試劑盒 ，英文名： TIMP1 ELISA Kit  303-45-7棉酚說明書  Gossypol

綿羊白介素2受體(IL-2R)ELISA檢測(cè)試劑盒SheepIerleukin-2receptor,IL-2RELISAkit 96T/48T  12542-36-8醋酸棉酚品牌  Gossypol acetic acid

犬胰素樣肽1(GLP1)試劑盒 Dog glucagon like peptide 1,GLP1 ELISA Kit  6812-81-3櫟癭酸規(guī)格  Roburic acid

英文名稱MouseAdenosineiphosphataseELISAKit小鼠ATP酶規(guī)格：96T/48T  81907-62-2靈芝酸A   Ganoderic acid A