上海莼試生物技術(shù)有限公司
   
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產(chǎn)品展廳
人APP-PS1雙基因轉(zhuǎn)染CHO細胞株培養(yǎng)
  • 品牌:莼試
  • 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
  • 貨號:CSX4298
  • 發(fā)布日期: 2020-06-10
  • 更新日期: 2025-03-13
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進口、國產(chǎn)
保存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
品牌 莼試
貨號 CSX4298
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
組織來源 詳見說明書
細胞形態(tài) 多角
是否是腫瘤細胞
CAS編號
保質(zhì)期 詳見說明書
器官來源 詳見說明書
免疫類型 詳見說明書
品系 詳見說明書
生長狀態(tài) 貼壁生長
物種來源 詳見說明書
包裝規(guī)格 詳見說明書
純度 詳見說明書%
是否進口

資源名稱 APP-PS1雙基因轉(zhuǎn)染CHO細胞株產(chǎn)品僅用于科研
種屬:7WPS1

形態(tài):多角 

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:DMEM-H:DulbeccosModifiedEaglesMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS;250ug/mlG418+2.5ug/mlpuromycin 

傳代方法:1:3傳代;2~31次。

生長特性:貼壁生長

存儲條件:基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
APP-PS1雙基因轉(zhuǎn)染CHO細胞株培養(yǎng)來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZJCRB等知名品牌),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業(yè)的實驗室,可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。

產(chǎn)品名稱

類型

佛號

APP-PS1雙基因轉(zhuǎn)染CHO細胞株培養(yǎng)

貼壁生長

CSX4298


培養(yǎng)操作步驟:
APP-PS1雙基因轉(zhuǎn)染CHO細胞株培養(yǎng)1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布; 
2
.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片); 
3
.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時; 
4
.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中; 
5
.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。 
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.
研究條件可以人為控制
pH
、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.
研究的樣本可以達到比較均一性通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用*化等方法使細胞達到純化。
4.
研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備  記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.
研究的范圍比較廣泛
應用的學科領域較為寬廣,如細胞學、免疫學、學、生物化學、遺傳學、分子生物學等; 
適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進行有針對性的研究。
6.
研究的費用相對較經(jīng)濟可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。

操作流程:
產(chǎn)品僅用于科研1.1主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293
細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1
細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37預熱,810倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37、5co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2
細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek293細胞48h換液1次,細胞長至60%70%融合時,用0.25%胰酶消化12min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3
細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4
細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù),按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液=(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104
1.5
細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數(shù)后分別接種于1225cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100%,計算貼壁率。 
1.6
生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d,繪制細胞生長曲線

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