細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程：

產(chǎn)品僅用于科研冷凍保存細(xì)胞之方法：
水貂肺上皮細(xì)胞培養(yǎng)冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí)， 以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

資源名稱(chēng)　水貂肺上皮細(xì)胞培養(yǎng)
種屬:Mv.1.Lu(NBL-7)

形態(tài):上皮樣

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle＇sBalancedSalts)15%NBS；0.1mMNEAA

生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)

細(xì)胞分類(lèi)：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運(yùn)輸給客戶(hù)。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因?yàn)閺?fù)蘇手法對(duì)于細(xì)胞狀態(tài)影響較大，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好，很難說(shuō)是細(xì)胞自身不行，還是復(fù)蘇沒(méi)操作好；另外溫度對(duì)細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細(xì)胞儲(chǔ)存的zui好方式，快遞時(shí)間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞，QC通過(guò)后，T-25灌滿(mǎn)培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶(hù)，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運(yùn)輸也對(duì)細(xì)胞影響也不大，只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買(mǎi)到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源，100%保證5代以?xún)?nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞凍存步驟：

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
產(chǎn)品僅用于科研一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號(hào)11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號(hào)16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。

收到水貂肺上皮細(xì)胞培養(yǎng)處理方法
1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請(qǐng)拍照，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落；先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%，可正常傳代；若未超過(guò)80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí)，若細(xì)胞密度超過(guò)80%，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過(guò)80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作。
以下是水貂肺上皮細(xì)胞培養(yǎng)的相關(guān)熱銷(xiāo)產(chǎn)品：
人氣管平滑肌細(xì)胞裂解物HTSMCL4-甲基傘花基-β-D-葡糖苷酸，英文名或英文縮寫(xiě)：MUG，級(jí)別：高，98%，規(guī)格：10U

HPAC細(xì)胞，人*癌細(xì)胞 人上皮細(xì)胞,16HBE細(xì)胞 皮膚肥大細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)拂化鈰 Cqrium fluoridq 7728-88-2

兔眼Tenon's囊成纖維細(xì)胞;RYTFL-pxenYLALANINEL-本美國(guó)藥典級(jí)白色粉末RTsigma

TGFBR2 Others Human 人 TGFβR2 / TGFR2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 酚酞-3,3'-雙-(亞甲基二乙酸)，英文名或英文縮寫(xiě)：pxenolphthalexone，級(jí)別：BR，95%，規(guī)格：250克

CL-0135L1210(小鼠細(xì)胞)5×106cells/瓶×2(脫落酸)
ADA Others Human 人 ADA / Adenosine deaminase 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 鹽酸芬戈莫德質(zhì)量規(guī)格：≥99.0%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)Fingolimod HCL /FTY-720

色素細(xì)胞培養(yǎng)基MelM鹽酸芬戈莫德(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Fingolimod HCL /FTY-720

非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO 胚絨毛癌細(xì)胞，JAR細(xì)胞 SW480 [SW-480](細(xì)胞)防己諾林堿質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Fangchinoline

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KMY0908澳茄新堿質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Solasurine

IL18RAP Others Human 人 IL18RAP / IL1R7 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 五水合硫酸金雀花堿/硫酸鷹爪豆堿(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Sparteini Sulfas
C57小鼠色素瘤瘤株;ME (Me)6-O-去甲多奈哌齊質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口6-O-Desmethyl Donepezil

WEHI 22.1細(xì)胞，B細(xì)胞 人肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞,HIBEpiC細(xì)胞 CL-0096HCT 116(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2脫氫多奈哌齊（多奈哌齊雜質(zhì)）質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Dehydro Donepezil (Donepezil Impurity)

中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞-二氫葉酸還原酶缺陷型;CHO/dhFr-多佐胺中間體質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Dorzolamide intermediate

MCPT1 Others Mouse 小鼠 MCPT1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 6‘-羥基多沙唑嗪質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口6'-Hydroxy Doxazosin

神經(jīng)少突起前質(zhì)膠質(zhì)細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)Prosapogenin CP6質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Prosapogenin CP6
水貂肺上皮細(xì)胞培養(yǎng)小鼠T瘤細(xì)胞(雞OVA基因修飾);E.G7-OVA丁苯威(標(biāo)準(zhǔn)品)Fenobucarb質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%

FZD1 Others Mouse 小鼠 FZD1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 唑螨酯(標(biāo)準(zhǔn)品)Fenpyroximate質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5%

人脈絡(luò)叢成纖維細(xì)胞HCPF精乙基噁唑禾草靈(標(biāo)準(zhǔn)品)Fenoxaprop-p-ethyl質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,97%

FES Others Human 人 FES Kinase / Feline sarcoma oncogene 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) Amberlite® IRC-748螯合型離子交換樹(shù)脂Amberlite® IRC-748質(zhì)量規(guī)格：

豚鼠心肌細(xì)胞;GP-H1Amberlyst15離子交換樹(shù)脂(濕)Amberlyst 15 ion-exchange resin質(zhì)量規(guī)格：濕