細胞培養(yǎng)過程：

產(chǎn)品僅用于科研冷凍保存細胞之方法：
正常人胰管上皮細胞培養(yǎng)冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

資源名稱　正常人胰管上皮細胞培養(yǎng)
種屬:hTERT-HPNE

提供形式:P4-5代T25細胞培養(yǎng)瓶

模式菌株:未知

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:75% DMEM without glucose 25% Medium M3 Base 5% fetal bovine serum 10 ng/ml human recombinant EGF

生長條件:95%空氣+5%二氧化碳

生長特性:貼壁生長

存儲條件:90%完全培養(yǎng)基+10%DMSO

細胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因為復蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大，一旦細胞狀態(tài)不好，很難說是細胞自身不行，還是復蘇沒操作好；另外溫度對細胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種：
是我們復蘇好細胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶，排除復蘇造成影響，常溫運輸也對細胞影響也不大，只需加25元運費(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。
細胞凍存步驟：

細胞培養(yǎng)步驟：
產(chǎn)品僅用于科研一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?/span>10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。

收到正常人胰管上皮細胞培養(yǎng)處理方法
1、首先，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如貼壁特性（貼壁/懸浮）、細胞形態(tài)、所用基礎培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細胞密度超過80%，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml；若細胞密度未超過80%，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。
以下是正常人胰管上皮細胞培養(yǎng)的相關熱銷產(chǎn)品：
小鼠真皮成纖維細胞完全培養(yǎng)基 100mL煌橙,藏花橙G質(zhì)量規(guī)格：BSCrocein Orange G

HN13口腔細胞 HN13 oral squamous cell carcinoma cells DMEM+10%FBS靛紅（吲哚醌）質(zhì)量規(guī)格：ARIsatin

IL23 Protein Human 重組人 IL-23 (IL23A & IL12B Heterodimer) 蛋白聚乙二醇8000質(zhì)量規(guī)格：>99%,分子生物學級PEG 8000

UM-UC-3(人膀胱移行細胞癌) 5×106cells/瓶×2 HUM, 正常人主動脈平滑肌細胞氯化鋰(分子生物學級)質(zhì)量規(guī)格：>98%Lithium chloride

CM-R097大鼠皮下脂肪細胞完全培養(yǎng)基100mL硫酸亞鐵銨六水質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRAmmonium iron(II) sulfate, hexahydrate
Asp2人胚胎腎細胞轉(zhuǎn)化細胞;FC33甲基橙皮甙質(zhì)量規(guī)格：≥95%Methyl hesperidin

人腸微內(nèi)皮細胞(HIMEC)( 5×105 )嗎多明質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRMolsidomine

CL-0374KP-N-NS(人腎上腺神經(jīng)母細胞瘤細胞())5×106cells/瓶×2嗎多明（標準品）質(zhì)量規(guī)格：含量測定Molsidomine

人腦星形膠質(zhì)母細胞瘤;U-87 MG [U87MG;U87 MG] 大鼠軟骨細胞完全培養(yǎng)基 100mLO,P-滴滴滴(標準品)質(zhì)量規(guī)格：含量測定Mitotane;O,P'-DDD

EL4 小鼠瘤細胞鹽酸拉貝洛爾（標準品）質(zhì)量規(guī)格：含量測定Labetalol
NCSTN Others Mouse 小鼠 Nicasin / NCSTN 人細胞裂解液 (陽性對照) A.C.E.SEQUENCINGBUFFER,10XCONCENTRATEA.C.E. 測序緩沖液 (10X)測序級無色無混濁溶液RTsigma

人膀胱成纖維細胞完全培養(yǎng)基 100mL3-;3-羌基;基炳基醇 3-Hqxcnol;3-xy7noxyhqxcnq;qthylpropylccrbinol 63-37-0

C6細胞，大鼠神經(jīng)細胞 cv-1(非洲綠猴腎細胞) 人癌細胞;MCF 7B2'-DEOXYTHYMIDINE2'-脫氧胸苷超級白色結(jié)晶粉末RTsigma

IL8 Protein Human 重組人 IL-8 / CXCL8 蛋白 (aa 6-77)1-甲基咪唑shēng huà shì jì容量：2～8℃1克

SMMC-7721(人細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 CD320 / 8D6A 人細胞裂解液 (陽性對照) 7681-65-4化亞銅Cuprous iodide
正常人胰管上皮細胞培養(yǎng)KYSE450 人細胞對香豆酸;對羥基肉桂酸(標準品)p-Coumaric acid質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

CL-0328CEM/C1(人急性細胞細胞)5×106cells/瓶×2對葉百部堿（標準品）Tuberstemonine質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

rEPC，大鼠內(nèi)皮祖細胞-骨髓莪術(shù)醇(標準品)Curcumol質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

人皮膚成纖維樣細胞;HSF2 人細胞完全培養(yǎng)基 100mL莪術(shù)二酮（標準品）Curdione質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

人毛細胞RNAHHDPC miRNA5 μg蒽醌(標準品)Anthraquinone質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品