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產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
保存條件 | 凍存則用6mL凍存液(90%FBS+10%DMSO)終止消化,吹打均勻,分為6支凍存管,用程序降溫盒于-80℃凍存,過夜轉(zhuǎn)移至液氮中保存。 |
品牌 | 莼試 |
貨號 | CSX4205 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 詳見說明書 |
細胞形態(tài) | CM15-1培養(yǎng)液中,貼壁,上皮細胞樣,多角形,短粗的梭形 |
是否是腫瘤細胞 | 是 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 貼壁生長 |
物種來源 | 詳見說明書 |
包裝規(guī)格 | 詳見說明書 |
純度 | 詳見說明書% |
是否進口 | 是 |
細胞培養(yǎng)過程:
產(chǎn)品僅用于科研冷凍保存細胞之方法:
人臍內(nèi)皮細胞形態(tài)冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
資源名稱 人臍內(nèi)皮細胞形態(tài)
種屬:HUVEC
類型:貼壁生長
形態(tài):CM15-1培養(yǎng)液中,貼壁,上皮細胞樣,多角形,短粗的梭形
分離基物人,臍;內(nèi)皮細胞。女性,年齡未指明,有限細胞系
提供形式:凍存管/T25細胞瓶
安全等級:1
模式菌株:未知
應(yīng)用領(lǐng)域可用于內(nèi)皮修復(fù)損傷的研究。
培養(yǎng)方法
傳代方法:將舊培養(yǎng)液吸除,PBS清洗兩遍后,加入6mL(/100mm皿)胰酶,在顯微鏡下觀察,期間禁止搖晃培養(yǎng)皿,細胞剛有脫落時,則吸除大部分胰酶,留約0.5mL,移至培養(yǎng)箱消化,約3min取出。傳代用12mL CM15-1培養(yǎng)液終止消化,輕輕吹打均勻細胞,后可分3~6皿培養(yǎng);
生長條件:37℃,5%CO2,CM15-1培養(yǎng)液。CM15-1培養(yǎng)液:90%F-12K+10%FBS+0.1mg/mL heparin+0.03~0.05mg/mLECGS。F-12K:F-12K培養(yǎng)液。生長因子:heparin(肝素),ECGS(內(nèi)皮細胞生長添加劑)。
存儲條件:凍存則用6mL凍存液(90%FBS+10%DMSO)終止消化,吹打均勻,分為6支凍存管,用程序降溫盒于-80℃凍存,過夜轉(zhuǎn)移至液氮中保存。
細胞分類:
第一種:
是凍存產(chǎn)品,由氮直液接拿出,干冰運輸給客戶。一般不推薦這種,也較少使用這種方式,因為復(fù)蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大,一旦細胞狀態(tài)不好,很難說是細胞自身不行,還是復(fù)蘇沒操作好;另外溫度對細胞、基因功能狀態(tài)影響很大,也不是細胞儲存的zui好方式,快遞時間也很難控制,多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量;干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種:
是我們復(fù)蘇好細胞,QC通過后,T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶,排除復(fù)蘇造成影響,常溫運輸也對細胞影響也不大,只需加25元運費(順豐)。
質(zhì)量保證:我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。
細胞凍存步驟:
細胞培養(yǎng)步驟:
產(chǎn)品僅用于科研一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080),85%;北美胎牛血清(United States,GIBCO,貨號16000-044),15%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?/span>10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。
收到人臍內(nèi)皮細胞形態(tài)處理方法
1、首先,觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸浮)、細胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞:將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細胞密度超過80%,可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至5ml;若細胞密度未超過80%,將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。
以下是人臍內(nèi)皮細胞形態(tài)的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
HL-7702(人肝正常細胞) 5×106cells/瓶×2 RLF, 大鼠成纖維細胞 人類成纖維細胞系;CNLMG-B5538SKIN銅標(biāo)準溶液(500mg/l,溶劑:1%硫酸)質(zhì)量規(guī)格:500mg/l,溶劑:1%硫酸Copper solution
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細胞;KM932鉻標(biāo)準溶液(三價鉻標(biāo)準溶液1000μg/ml)質(zhì)量規(guī)格:三價鉻標(biāo)準溶液1000μg/mlChromium solution
MERTK Others Human 人 MERTK / Mer 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 1酸二氫鈉一水(ACS級)質(zhì)量規(guī)格:ACS級,>98.5% phosphate, monobasic, monohydrate
CM-H046人肝星形細胞完全培養(yǎng)基100mL葡萄糖酸鈣質(zhì)量規(guī)格:>99%Calcium gluconate, hydrate
HL-60, 人早幼粒細胞 單核細胞-巨噬細胞,RAW264.7細胞 Hep G2(人細胞)十二烷基-β-D-麥芽糖苷;月桂?;溠刻擒召|(zhì)量規(guī)格:>99%,分子生物學(xué)級N-Dodecyl-b-maltoside
caski L-順式-鹽酸地爾硫卓質(zhì)量規(guī)格:美國進口L-cis-Diltiazem ? HCl
Hepa1-6-EGFP(CMV-GFP慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)小鼠細胞 Hepa1-6-EGFP (CMV-GFP leiviral consuct stable sain) of hepatocellular carcinoma cells in mice DMEM+10% FBS地爾硫卓質(zhì)量規(guī)格:美國進口Diltiazem
TNFSF11 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 RANKL / OPGL / TNFSF11 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)去乙酰地爾硫卓-d3質(zhì)量規(guī)格:美國進口Desacetyl Diltiazem-d3
人主動脈平滑肌細胞 (HASMC)( 5×105 ) HK-2, 人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細胞 HumanO-去甲基地爾硫卓質(zhì)量規(guī)格:美國進口O-Desmethyl Diltiazem
小鼠B細胞雜交瘤細胞;SH2地美司鈉-d8質(zhì)量規(guī)格:美國進口Dimesna-d8
MA, 小鼠星形膠質(zhì)細胞 Mouse無水錄化鈷100克
ICAM2 Others Mouse 小鼠 ICAM2 / CD102 人細胞裂解液 (陽性對照) 姆沙伯 W NAW Chromosorb W-NcW
人T瘤轉(zhuǎn)基因細胞;Jurkat D,E植酸鈉 Phytic Acid (InsP6) 14306-25-3 5G 通用試劑
NOTCH1 Others Mouse 小鼠 Notch-1 / NOTCH1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 葡萄糖胰蛋白胨瓊脂25毫升
CM-R030大鼠腸粘膜上皮細胞完全培養(yǎng)基100mL(糊精)
人臍內(nèi)皮細胞形態(tài)PVRL3 Others Human 人 PVRL3 / CD113 人細胞裂解液 (陽性對照) 二乙二醇二丁基(>98.0%(GC))Diethylene Glycol Dibutyl Ether質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
人內(nèi)根殼細胞裂解物HHIRSCL二乙二醇二乙酸酯(>98.0%(GC))Diethylene Glycol Diacetate質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
CHODL Others Rat 大鼠 CHODL / CHOndrolectin 人細胞裂解液 (陽性對照) 三甘醇二乙酸酯(>98.0%(GC))Triethylene Glycol Diacetate質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
人腦微內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基 100mLO-乙酰基蓖麻酸甲酯(>80.0%(GC))Methyl O-Acetylricinoleate質(zhì)量規(guī)格:>80.0%(GC)
MC3T3-E1細胞,小鼠成骨細胞系 V79(中國倉鼠肺細胞) 家兔骨髓間充質(zhì)干細胞;2012083MSC檸檬酸三乙酯(>99.0%(GC))Triethyl 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC)