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產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
保存條件 | 50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮 |
品牌 | 莼試 |
貨號 | CSX4203 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 詳見說明書 |
細胞形態(tài) | |
是否是腫瘤細胞 | 是 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 貼壁 |
物種來源 | 詳見說明書 |
包裝規(guī)格 | 詳見說明書 |
純度 | 詳見說明書% |
是否進口 | 是 |
人正常上皮細胞說明書來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學(xué)實驗等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實驗室,可無菌操作并提供相關(guān)科研項目解決方案以及實驗服務(wù)。產(chǎn)品僅用于科研
產(chǎn)品名稱 | 類型 | 佛號 |
人正常上皮細胞說明書 | 貼壁 | CSX4203 |
資源名稱 人正常上皮細胞
種屬:CCD 841 CON
提供形式:T25細胞培養(yǎng)瓶/凍存管
安全等級:2
模式菌株:未知
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:90%高糖DMEM+10%FBS
生長條件:95%空氣+5%二氧化碳 37攝氏度
生長特性:貼壁
存儲條件:50%高糖DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮
培養(yǎng)操作步驟:
人正常上皮細胞說明書產(chǎn)品僅用于科研1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測。
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用*化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標記等各種儀器設(shè)備 記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣,如細胞學(xué)、免疫學(xué)、學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等;
適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實驗對象。
以下是公司正在在熱銷的產(chǎn)品:
IFNA2 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNA2 / Ierferon alpha 2 人細胞裂解液 (陽性對照) 孕二1酮質(zhì)量規(guī)格:>99%Gestodene
CM-H058人子宮內(nèi)膜上皮細胞完全培養(yǎng)基100mL孕二1酮(標準品)質(zhì)量規(guī)格:>99%,標準品Gestodene
Colo205細胞,人細胞 人橫紋肌細胞,A-204細胞 人正常肝細胞;L-02來那替尼質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR,可用于細胞培養(yǎng)Neratinib(HKI-272)
FaDu(人咽鱗癌細胞) 5×106cells/瓶×2甲基原薯蕷皂苷(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品Methyl Protodioscin
BMP2 Others Human 人 BMP-2 人細胞裂解液 (陽性對照) 纖細薯蕷皂苷(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品Gracillin
CCC-HSF-1細胞,人皮膚成纖維細胞 粘質(zhì)沙雷伯氏菌 中國倉鼠肺細胞;CHL膠原蛋白(I型)質(zhì)量規(guī)格:I型,牛跟踺Collagen
CXCL11 Protein Human 重組人 I-TAC / CXCL11 蛋白維替泊芬質(zhì)量規(guī)格:>97%,BRVerteporfin
NCI-N87(人細胞) 5×106cells/瓶×2 人 VSIG8 人細胞裂解液 (陽性對照) 膠原蛋白(BR)質(zhì)量規(guī)格:BR,魚鱗或魚皮提取Collagen
C57BL/6小鼠T細胞瘤細胞;RMA右雷佐生;右丙亞胺質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRDexrazoxane
ASL Others Human 人 Arginosuccinase / ASL 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸普羅帕酮質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRPropafenone
WI38/VA13(SV-40Z轉(zhuǎn)化) 5×106cells/瓶×2丁二酸鈉六水合物shēng huà shì jì容量:25克
J82(人細胞) 5×106cells/瓶×2 LncaP, 人細胞 人細胞;SF763玉米蛋白 Zein,≥92.0% 9010-66-6 100G 通用試劑
人胚胎眼鞏膜成纖維細胞;HFSF羌安-O-磺醋 xy7noxylcMinq-O-sulfonic ccid 920-43-8
STK40 Others Human 人 STK40 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 無水錄化25克
CL-0274EJ(人細胞)5×106cells/瓶×214348-75-52,7-二溴-9-芴酮2,7-Dibromo-9H-fluoren-9-one
人正常上皮細胞說明書RHOA Others Human 人 RhoA 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 二乙酰一1(>Diacetyl monoxime質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
家兔皮膚細胞;DR-S1馬來酸二乙酯(>Diethyl maleate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
L929細胞,成纖維細胞 人*細胞,AR42J細胞 CM-R125大鼠牙細胞完全培養(yǎng)基100mL二氫細胞弛素(>Dihydrocytochalasin B質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
大鼠細胞;Y3-Ag 1.2.3二異辛胺(>Diisooctylamine質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
PRLR Others Human 人 PRLR / Prolactin Receptor 人細胞裂解液 (陽性對照) 馬來酸二甲酯(>Dimethyl maleate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
操作流程:
1.1主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù),按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液=(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d,繪制細胞生長曲線