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產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
保存條件 | 凍存則用6mL凍存液(90%FBS+10%DMSO)終止消化,吹打均勻,分為6支凍存管,用程序降溫盒于-80℃凍存,過夜轉(zhuǎn)移至液氮中保存。 |
品牌 | 莼試 |
貨號 | CSX4202 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 詳見說明書 |
細胞形態(tài) | CM2-1培養(yǎng)液中,貼壁,上皮細胞樣,多角形、圓形或橢圓形 |
是否是腫瘤細胞 | 是 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 貼壁生長 |
物種來源 | 詳見說明書 |
包裝規(guī)格 | 詳見說明書 |
純度 | 詳見說明書% |
是否進口 | 是 |
人胃粘膜細胞培養(yǎng)冷凍保存細胞之方法:
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
細胞凍存步驟:
資源名稱 人胃粘膜細胞培養(yǎng)
種屬:GES 1
類型:貼壁生長
形態(tài):CM2-1培養(yǎng)液中,貼壁,上皮細胞樣,多角形、圓形或橢圓形
分離基物胃粘膜;SV40轉(zhuǎn)化
提供形式:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶1瓶;或者凍存形式:2ml凍存管2支,干冰費另計。
安全等級:1
模式菌株:未知
培養(yǎng)方法
傳代方法:將舊培養(yǎng)液吸除,PBS清洗兩遍后,加入6mL(/100mm皿)胰酶,在顯微鏡下觀察,期間禁止搖晃培養(yǎng)皿,細胞剛有脫落時,則吸除大部分胰酶,留約0.5mL,移至培養(yǎng)箱消化,約3min取出。傳代用12mL CM2-1培養(yǎng)液終止消化,輕輕吹打均勻細胞,后可分3~6皿培養(yǎng);
生長條件:37℃,5%CO2,CM2-1培養(yǎng)液。CM2-1培養(yǎng)液:90%RPMI-1640+10%FBS。RPMI-1640:1640培養(yǎng)基,含谷氨酰胺。
存儲條件:凍存則用6mL凍存液(90%FBS+10%DMSO)終止消化,吹打均勻,分為6支凍存管,用程序降溫盒于-80℃凍存,過夜轉(zhuǎn)移至液氮中保存。
細胞分類:
第一種:
是凍存產(chǎn)品,由氮直液接拿出,干冰運輸給客戶。一般不推薦這種,也較少使用這種方式,因為復(fù)蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大,一旦細胞狀態(tài)不好,很難說是細胞自身不行,還是復(fù)蘇沒操作好;另外溫度對細胞、基因功能狀態(tài)影響很大,也不是細胞儲存的zui好方式,快遞時間也很難控制,多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量;干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種:產(chǎn)品僅用于科研
是我們復(fù)蘇好細胞,QC通過后,T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶,排除復(fù)蘇造成影響,常溫運輸也對細胞影響也不大,只需加25元運費(順豐)。
質(zhì)量保證:我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。
細胞培養(yǎng)過程:
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080),85%;北美胎牛血清(United States,GIBCO,貨號16000-044),15%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?/span>10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。
以下是人胃粘膜細胞培養(yǎng)的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
CM-H054人子宮成纖維細胞完全培養(yǎng)基100mL乙酸鑭五水(>99%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRLanthanum (III) acetate, pentahydrate
MDA-MB-231, 人癌細胞 ,P3-X63-Ag8細胞 SW 1271 [SW-1271; SW1271](人)L-刀豆氨酸硫酸鹽(>質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRL-Canavanine sulfate salt
小鼠正常肝細胞;NCTC 1469 [NCTC1469]馬來酸氟吡汀質(zhì)量規(guī)格:>98%Flupirtine maleate
HA Others H3N2 甲型 H3N2 (A/Brisbane/10/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) 馬來酸氟吡汀(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品Flupirtine maleate
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細胞;KM933氟維司群質(zhì)量規(guī)格:>99%,進分,ER(雌激素受體)拮抗劑Fulvestrant
CCD-1095Sk細胞,人浸潤性導(dǎo)管癌旁皮膚細胞 鼠細胞,H22-H8D8細胞 腦成纖維細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)2,4,6-三(七氟丙基)-1,3,5-三嗪(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)2,4,6-3(heptafluoropropyl)-1,3,5-triazine
BC3H1(小鼠細胞) 5×106cells/瓶×2α-巰基甘油(>98.0%(GC)(T))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T)α-Thioglycerol
HUASMC Pellet 人臍動脈平滑肌細胞團塊 > 1 mio.cells 人上皮細胞裂解物HPEpiCL3,5-二甲氧基-4-羥基肉桂酸(>99.0%(GC)(T))質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC)(T)3,5-Dimethoxy-4-hydroxycinnamic Acid
CL-0162MS1(小鼠胰島內(nèi)皮細胞)5×106cells/瓶×24'-羥基偶氮苯-2-羧酸(>98.0%(HPLC)(T))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T)4'-Hydroxyazobenzene-2-carboxylic Acid
F7 Others Mouse 小鼠 Coagulation Factor VII / FVII / F7 CHO細胞裂解液 (陽性對照) 2,2-二甲基琥珀酸(>99%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR2,2-Dimethylsuccinic acid
Pcc4 小鼠wo7iumCaprylate正辛酸鈉250毫克AR,90%
CDH17 Others Human 人 CDH17 / Cadherin-17 / LI-cadherin 人細胞裂解液 (陽性對照) 3-羌基-2,4,6-三溴本加醋 (TBHBA) 3-xy7noxy-2,4,6-tribromobqnzoic ccid 14348-40-4
人神經(jīng)膠質(zhì)細胞瘤細胞;U251Rosiglitazone馬來酸羅格列酮100毫克BR
20. 細胞系統(tǒng)Dysprosium(III)oxide三氧化二鏑25毫升CP,95%
CM-H128人角膜上皮細胞完全培養(yǎng)基100mL143-24-8四乙二醇二;二甲氧基四縮乙二醇;四甘醇二;雙二乙氧基Tetraetxylene glycol dimetxyl ;Dimetxoxytetraglycol;Dimetxoxytetraetxyleneglycol;TetraglyMe;Bis(2-metxoxy-ethoxyetxyl)
人胃粘膜細胞培養(yǎng)雜交瘤(B類);Z1510A2G6A2C7伐地那非-d5Vardenafil-d5質(zhì)量規(guī)格:美國進口
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細胞;PUMC-mips-A4 胰蛋白酶(含10mL 酶解緩沖液) 1mL鹽酸貝他定Bestatin 質(zhì)量規(guī)格:美國進口
C2C12, 小鼠肌原細胞 MouseN-去甲基二鹽酸三氟拉嗪N-Desmethyl Trifluoperazine Di質(zhì)量規(guī)格:美國進口
TNFRSF10A Others Human 人 TNFRSF10A / CD261 / APO2 人細胞裂解液 (陽性對照) 雙硫侖-d20Disulfiram-d20質(zhì)量規(guī)格:美國進口
人內(nèi)根鞘細胞HHIRSC脫氧膽酸鈉鹽Deoxycholic Acid, Salt質(zhì)量規(guī)格:美國進口
收到人胃粘膜細胞培養(yǎng)處理方法
產(chǎn)品僅用于科研1、首先,觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸浮)、細胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞:將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細胞密度超過80%,可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至5ml;若細胞密度未超過80%,將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。