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產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
保存條件 | 凍存則用6mL凍存液(90%FBS+10%DMSO)終止消化,吹打均勻,分為6支凍存管,用程序降溫盒于-80℃凍存,過夜轉移至液氮中保存。 |
品牌 | 莼試 |
貨號 | CSX4177 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 詳見說明書 |
細胞形態(tài) | CM2-1培養(yǎng)液中,貼壁,上皮細胞樣,梭形、圓形 |
是否是腫瘤細胞 | 是 |
CAS編號 | |
保質期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 貼壁生長 |
物種來源 | 詳見說明書 |
包裝規(guī)格 | 詳見說明書 |
純度 | 詳見說明書% |
是否進口 | 是 |
培養(yǎng)操作步驟:
人視網(wǎng)膜上皮細胞形態(tài)1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。產(chǎn)品僅用于科研
產(chǎn)品名稱 | 類型 | 佛號 |
人視網(wǎng)膜上皮細胞形態(tài) | 貼壁生長 | CSX4177 |
資源名稱 人視網(wǎng)膜上皮細胞
種屬:ARPE-19
類型:貼壁生長
形態(tài):CM2-1培養(yǎng)液中,貼壁,上皮細胞樣,梭形、圓形
分離基物視網(wǎng)膜色素上皮;自發(fā)永生
提供形式:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶1瓶;或者凍存形式:2ml凍存管2支,干冰費另計。
安全等級:1
模式菌株:未知
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:90%RPMI-1640+10%FBS
傳代方法:將舊培養(yǎng)液吸除,PBS清洗兩遍后,加入6mL(/100mm皿)胰酶,在顯微鏡下觀察,期間禁止搖晃培養(yǎng)皿,細胞剛有脫落時,則吸除大部分胰酶,留約0.5mL,移至培養(yǎng)箱消化,約2min取出。傳代用12mL CM2-1培養(yǎng)液終止消化,輕輕吹打均勻細胞,后可分3~6皿培養(yǎng);
生長條件:37℃,5%CO2,CM2-1培養(yǎng)液。CM2-1培養(yǎng)液:90%RPMI-1640+10%FBS。RPMI-1640:1640培養(yǎng)基,含谷氨酰胺。
存儲條件:凍存則用6mL凍存液(90%FBS+10%DMSO)終止消化,吹打均勻,分為6支凍存管,用程序降溫盒于-80℃凍存,過夜轉移至液氮中保存。
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用*化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備 記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應用的學科領域較為寬廣,如細胞學、免疫學、學、生物化學、遺傳學、分子生物學等;
適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。
以下是公司正在在熱銷的產(chǎn)品:
小鼠細胞;CT26.WT [CT26WT] 小鼠腸上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL鋁試劑質量規(guī)格:ACSAluminon
RA, 大鼠星形膠質細胞 Rattus酸性鉻藍K質量規(guī)格:指示劑級Acid chrome blue K
ACVR1B Others Human 人 ALK4 / ACVR1B 人細胞裂解液 (陽性對照) 富馬酸喹硫平質量規(guī)格:>99%Quetiapine Fumarate
EB病毒轉化的人B細胞;KMY0919富馬酸喹硫平(標準品)質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品Quetiapine Fumarate
SIAE Others Human 人 sialate O-acetylesterase / SIAE 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 雷特格韋鉀質量規(guī)格:含量>98.5%,BRRaltegravir K
CD86 Others Mouse 小鼠 CD86 / B7-2 人細胞裂解液 (陽性對照) 醋酸磺胺米隆Mafenide Acetate質量規(guī)格:>98%,BR
人結膜成纖維細胞cDNAHConF cDNA硼替佐米中間體IBortezomib intermediates I質量規(guī)格:>97%
IL6ST Others Rat 大鼠 gp130 / IL6ST / CD130 人細胞裂解液 (陽性對照) 保特佐米蒎烷二醇酯BortezoMib Pinanediol Ester質量規(guī)格:>97%
293 人胚腎細胞甲磺司特Suplatast tosilate質量規(guī)格:>98%,BR
CL-0281HELF(人胚)5×106cells/瓶×21丙基-α-D-吡喃半乳糖苷Allyl α-D-galactopyranoside質量規(guī)格:>97%,BR
CM-M124小鼠脈絡膜細胞完全培養(yǎng)基100mL羧酸,英文名或英文縮寫:Chromium picolinate,級別:AR,98%,規(guī)格:100微升
293A,人胚腎上皮細胞系(腺病毒包裝級別)6-安己晴 6-cMINO CcPROnitnILq 43-74-8
EB病毒轉化的人B細胞;KMYB 人椎間盤髓核細胞完全培養(yǎng)基 100mL碳酸鈰(Ⅲ),英文名或英文縮寫:Cerium caonate hydrate,級別:5N,規(guī)格:100克
內皮細胞培養(yǎng)基ECM-prf葡萄糖酸銅25克
IL23 Others Marmoset 狨猴 IL23A & IL12B Heterodimer 人細胞裂解液 (陽性對照) (麗春紅)
人視網(wǎng)膜上皮細胞形態(tài)Hepa 1-6細胞,小鼠細胞 PC-12(腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞) EB病毒轉化的人B細胞;KMY0923伏格列波糖(標準品)Voglibose質量規(guī)格:含量測定
CCL8 Protein Human 重組人 CCL8 / MCP-2 蛋白 (SUMO 標簽)琥珀酸甲潑尼龍(標準品)Methylprednisolone hemisuccinate質量規(guī)格:含量測定
SK-Hep-1(人細胞) 5×106cells/瓶×2 狗 IL17RD 人細胞裂解液 (陽性對照) 六甲蜜胺(標準品)Altretamine質量規(guī)格:含量測定
人胚;MRC-5甲氧氯普胺(標準品)Metoclopramide質量規(guī)格:含量測定
IL10RB Others Rat 大鼠 IL10RB / IL10R2 人細胞裂解液 (陽性對照) 奧扎格雷鈉(標準品)Ozagrel 質量規(guī)格:供含量測定用
操作流程:
1.1主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù),按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液=(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。產(chǎn)品僅用于科研
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d,繪制細胞生長曲線
人視網(wǎng)膜上皮細胞形態(tài)來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業(yè)的實驗室,可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。