細(xì)胞培養(yǎng)過程：

產(chǎn)品僅用于科研冷凍保存細(xì)胞之方法：
正常小鼠睪丸Sertoli細(xì)胞培養(yǎng)冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí)， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

資源名稱　正常小鼠睪丸Sertoli細(xì)胞培養(yǎng)
種屬:TM4

提供形式:T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶/凍存管

模式菌株:未知

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:DMEM+10%FBS

生長(zhǎng)條件:95%空氣+5%二氧化碳 37攝氏度

生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)

存儲(chǔ)條件:50%DMEM+40%FBS+10%DMSO 液氮

細(xì)胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運(yùn)輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因?yàn)閺?fù)蘇手法對(duì)于細(xì)胞狀態(tài)影響較大，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好，很難說是細(xì)胞自身不行，還是復(fù)蘇沒操作好；另外溫度對(duì)細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細(xì)胞儲(chǔ)存的zui好方式，快遞時(shí)間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運(yùn)輸也對(duì)細(xì)胞影響也不大，只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞凍存步驟：

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
產(chǎn)品僅用于科研一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號(hào)11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號(hào)16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。

收到正常小鼠睪丸Sertoli細(xì)胞培養(yǎng)處理方法
1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請(qǐng)拍照，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí)，若細(xì)胞密度超過80%，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作。
以下是正常小鼠睪丸Sertoli細(xì)胞培養(yǎng)的相關(guān)熱銷產(chǎn)品：
EPC, 大鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞1-環(huán)己基二乙酸單酰胺(>質(zhì)量規(guī)格：>98%，BR1,1-Cyclohexanediacetic acid monoamide

LTC4S Others Human 人 LTC4S / LTC4 syhase 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 1,2-乙二硫醇(>98.5%，BR)質(zhì)量規(guī)格：>98.5%，BR1,2-Ethanedithiol

人惡性非霍奇金瘤患者的自然殺傷細(xì)胞;NK-92MI [NK92MI]琥珀酸舒馬曲普坦(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Sumatriptan succinate

SP2/0細(xì)胞，細(xì)胞 人經(jīng)典小細(xì)胞細(xì)胞,NCI-H1688細(xì)胞 CL-0404NCI-H596(人肺腺鱗癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2硫酸鏈霉素質(zhì)量規(guī)格：>720IU/MG,BRStreptomycin Sulphate

中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞;TPO-CHO-I硫酸鏈霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：效價(jià)測(cè)定Streptomycin Sulphate
CL-0048Ca Ski(人上皮細(xì)胞)5×106cells/瓶×21-己基-2,3-二甲基咪唑啉化物(>98.0%(HPLC)(T))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T)1-Hexyl-2,3-dimethylimidazolium Iodide

BTLA Others Cynomolgus 食蟹猴 BTLA 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 異丙基三苯基化膦(>98.0%(HPLC)(T))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T)Isopropyltriphenylphosphonium Iodide

谷氨酰胺溶液 200 mML-Gue甲基三苯基化1(>98.0%(T))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)Methyltriphenylphosphonium Iodide

SNU-398細(xì)胞，人細(xì)胞 人類胚胎*表皮細(xì)胞,H293T細(xì)胞 視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)1-甲基-3-丙基化咪唑鎓(>95.0%(HPLC)(T))質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(HPLC)(T)1-Methyl-3-propylimidazolium Iodide

大耳山羊腎細(xì)胞;LDG-2乙基阿魏酸鹽質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Ethyl Ferulate
小鼠*上皮細(xì)胞(MREpiC)(5×105)定量濾紙100毫克保存：-20℃

大鼠*外分泌腺細(xì)胞;AR42J2,4,6-三(1炳氧基)-1,3,5-三嗪 2,4,6-Tricllyloxy-1,3,5-triczi 101-37-1

雜交瘤(B類);IB3C10H12A12G2H8F3 小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL移液器吸頭25U2～8℃

HUVEC-12, 人臍內(nèi)皮細(xì)胞系 Human乳香膠25克RT

TNFRSF11B Others Human 人 TNFRSF11B / OCIF 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 14463-68-42-1酸鈉鹽2-NAPHTHYL PHOSPHATE MONOwo7ium SALT
正常小鼠睪丸Sertoli細(xì)胞培養(yǎng)人胚肝二倍體細(xì)胞;CCC-HEL-1甘氨鵝脫氧膽酸鈉Glycochenodeoxycholic Acid  Salt質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR

大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞(RA)(5×105)BGJ398(NVP-BGJ398)BGJ398(NVP-BGJ398)質(zhì)量規(guī)格：>98%,FGFR抑制劑

非洲綠猴腎細(xì)胞系/IgR;VERO/IgRBMN-673BMN673質(zhì)量規(guī)格：>98%

KM小鼠子瘤株;U14 小鼠腎小球內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL星孢菌素Staurosporine質(zhì)量規(guī)格：>98%,進(jìn)分

MM, 小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞 Mouse苯唑西林鈉Oxacillin 質(zhì)量規(guī)格：>850μg/mg,BR