細(xì)胞培養(yǎng)過程：
圖
產(chǎn)品僅用于科研冷凍保存細(xì)胞之方法：
人小腸上皮細(xì)胞（干細(xì)胞庫保藏）說明書冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

資源名稱　人小腸上皮細(xì)胞（干細(xì)胞庫保藏）說明書
種屬:FHs 74 Int

類型:小腸

形態(tài):上皮樣

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:人小腸上皮細(xì)胞FHs 74 Int培養(yǎng)液配方（100 ml）： Hybri-Care Medium (ATCC, 46-X) 90 ml FBS (Biochrom, S4115) 10 ml rhEGF（Sigma, SRP 3027-500μg） 30 ng/ml

細(xì)胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因為復(fù)蘇手法對于細(xì)胞狀態(tài)影響較大，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好，很難說是細(xì)胞自身不行，還是復(fù)蘇沒操作好；另外溫度對細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細(xì)胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運輸也對細(xì)胞影響也不大，只需加25元運費(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞凍存步驟：

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
產(chǎn)品僅用于科研一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。

收到人小腸上皮細(xì)胞（干細(xì)胞庫保藏）說明書處理方法
1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細(xì)胞密度超過80%，可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作。
以下是人小腸上皮細(xì)胞（干細(xì)胞庫保藏）說明書的相關(guān)熱銷產(chǎn)品：
TEK Others Cynomolgus 食蟹猴 Tie2 / TEK 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 磺胺甲惡唑（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品Sulfamethoxazole(SMZ)

人細(xì)胞;Hela硫酸頭孢匹羅質(zhì)量規(guī)格：>760μg/MG,BR Cefpirome Sulfate

HEK-293細(xì)胞，Ad5DNA轉(zhuǎn)化的胚腎細(xì)胞 恒河猴胚腎細(xì)胞,FRhK-4細(xì)胞 CL-0251MC3T3-E1(小鼠胚胎成骨細(xì)胞前體細(xì)胞)5×106cells/瓶×2尼美舒利質(zhì)量規(guī)格：>99%Nimesulide

A875(人色素瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2硝酸咪康唑質(zhì)量規(guī)格：>99%Miconazole Nitrate

HBEpC-c 人上皮細(xì)胞(HBEpC) 500,000cells 主動脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)硝酸咪康唑(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：>99%,標(biāo)準(zhǔn)品Miconazole Nitrate
CL-0178OVCAR-3(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2藜蘆醛(>99%,BR)質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR3,4-Dimethoxybenzaldehyde

FZD5 Others Mouse 小鼠 Frizzled-5 / FZD5 CHO細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 3-羥基苯(>質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR3-Hydroxybenzaldehyde

人前脂肪細(xì)胞-皮下裂解物HPA-s L間羥基肉桂酸(>質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR3-Hydroxycinnamic acid

小耳豬肺細(xì)胞;SEP-L1 癌細(xì)胞，MDA-MB-435S細(xì)胞 MA891細(xì)胞，小鼠癌細(xì)胞4,4-二羥基二苯砜(>質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR4,4-Dihydroxydiphenyl sulfone

人EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞;CGM12-溴代萘質(zhì)量規(guī)格：>98%2-Bromonaphthalene
IL4R Others Rat 大鼠 IL4R / Il4ra 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 順式-4-羥基-D-脯酸，英文名或英文縮寫：cis-4-xy7noxy-D-proline，級別：BR，99%，規(guī)格：25克

大鼠小腸粘膜上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL間本二安言醋鹽 Bqnzqnq-1,3-dicminq dixy7nochloridq 241-69-2

K-562人慢性髓原細(xì)胞 K-562 chronic myelogenous leukemia cells 1640+10% FBST4RNA連接酶，英文名或英文縮寫：T4 RNA Ligase，級別：BR，規(guī)格：25克

FGF21 Protein Human 重組人 FGF21 蛋白 (His 標(biāo)簽)PROTEINGELLOADINGBUFFER,2X2X蛋白電泳上樣緩沖液超級1MLRT

Caki-2(人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人腎小管上皮細(xì)胞HRPTEpiC6106-4-3L-谷酸鈉鹽L(+)-Monowo7ium glutamate monohydrate
人小腸上皮細(xì)胞（干細(xì)胞庫保藏）說明書IL1RN Others Rat 大鼠 IL-1RA / IL1RN 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 枸櫞酸他莫昔芬Tamoxifen  質(zhì)量規(guī)格：>99.0%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)

人膀胱上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL枸櫞酸他莫昔芬（標(biāo)準(zhǔn)品）Tamoxifen  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品

H22細(xì)胞，小鼠細(xì)胞 Neuro-2A(腦神經(jīng)瘤細(xì)胞) EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KMY0909坦度替尼;MLN518Tandutinib質(zhì)量規(guī)格：>98.0%;FLT3拮抗劑

CXCL1 Protein Human 重組人 CXCL1 / MGSA / NAP-3 蛋白 (His & SUMO 標(biāo)簽)坦度替尼（標(biāo)準(zhǔn)品）Tandutinib質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

SK-BR-3(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 狗 CD2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 拉寧Teicoplanin 質(zhì)量規(guī)格：potency>900ug/mg,BR