細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程：

產(chǎn)品僅用于科研冷凍保存細(xì)胞之方法：
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(來(lái)自NIH3T3)形態(tài)冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí)， 以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

資源名稱(chēng)　小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(來(lái)自NIH3T3)形態(tài)
種屬:PA12

形態(tài):成纖維細(xì)胞樣

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:DMEM-H:Dulbecco＇sModifiedEagle＇sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS　

傳代方法:1:3傳代；3~4天1次。

生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)　

存儲(chǔ)條件:基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

細(xì)胞分類(lèi)：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運(yùn)輸給客戶(hù)。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因?yàn)閺?fù)蘇手法對(duì)于細(xì)胞狀態(tài)影響較大，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好，很難說(shuō)是細(xì)胞自身不行，還是復(fù)蘇沒(méi)操作好；另外溫度對(duì)細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細(xì)胞儲(chǔ)存的zui好方式，快遞時(shí)間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞，QC通過(guò)后，T-25灌滿(mǎn)培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶(hù)，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運(yùn)輸也對(duì)細(xì)胞影響也不大，只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買(mǎi)到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源，100%保證5代以?xún)?nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞凍存步驟：

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
產(chǎn)品僅用于科研一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號(hào)11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號(hào)16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。

收到小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(來(lái)自NIH3T3)形態(tài)處理方法
1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請(qǐng)拍照，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落；先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%，可正常傳代；若未超過(guò)80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí)，若細(xì)胞密度超過(guò)80%，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過(guò)80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作。
以下是小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(來(lái)自NIH3T3)形態(tài)的相關(guān)熱銷(xiāo)產(chǎn)品：
IL13 Others Mouse 小鼠 IL13 / ALRH 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 鹽酸金霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：效價(jià)測(cè)定Chlortetracycline HCl

人臍帶單核細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL西洛他唑質(zhì)量規(guī)格：>99%,USP34Cilostazol

7WCY1.0細(xì)胞，人APP-PS1(C410Y)雙基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞株 非01群霍亂弧菌 豹貓肺成纖維樣細(xì)胞;LCL4加替沙星質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)Gatifloxacin

CCL1 Protein Human 重組人 I-309 / CCL1 / TCA-3 蛋白加替沙星（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品Gatifloxacin

NR8383(大鼠肺泡巨噬細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人 PRAP1 / Proline-rich acidic 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 吉非替尼質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)Gefitinib
CL-0228T-47D(人管癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2Amberlite® IRA-900 陰離子交換樹(shù)脂質(zhì)量規(guī)格：Amberlite® IRA-900

HAVCR2 Others Mouse 小鼠 TIM-3 / HAVCR2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) Amberlite® XAD16非離子型大孔樹(shù)脂(20-60 mesh)質(zhì)量規(guī)格：20-60 meshAmberlite® XAD16

人食道上皮細(xì)胞cDNAHEEpiC cDNA殺螟丹(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%Aramite

LCC2細(xì)胞，人癌Tamoxifen耐藥株 草魚(yú)*細(xì)胞,L8824細(xì)胞 肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)殺螟丹標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=3%)質(zhì)量規(guī)格：100μg/ml,u=3%Aramite solution

293ET(人胚腎細(xì)胞(SV40T和EBNA1基因修飾細(xì)胞)) 5×106cells/瓶×2Amberlite?IRA402 強(qiáng)堿型陰離子交換樹(shù)脂(氯型)質(zhì)量規(guī)格：氯型Amberlite? IRA402
ACO2 Others Human 人 ACO2 / Aconitase 2 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) COOMASSIEBRILLIANTBLUER-250考馬斯亮藍(lán) R-250超級(jí)藍(lán)色至紅色結(jié)晶粉末RTsigma

長(zhǎng)尾綠猴胚胎細(xì)胞;41794 4-二溴三本安 96% 4,4'-DIBROMOTRIPHqNYLcMINq 81090-23-1

786-O[786-0]細(xì)胞，腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞 單核細(xì)胞細(xì)胞,J-111細(xì)胞 人小細(xì)胞細(xì)胞;NCI-H209BDS培養(yǎng)基25克

KM小鼠子瘤株;U27ADENOSINE5'-MONOPHOSPHATE,DIwo7iumSALT5'- 一嶙酸腺苷二鈉,六水超級(jí)白色精細(xì)結(jié)晶粉末COLDsigma

CD86 Others Human 人 CD86 / B7-2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 6066-82-6N-羥基琥珀;N-羥基丁二N-xy7noxysucciniMide
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(來(lái)自NIH3T3)形態(tài)ACVR1 Others Canine 狗 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 鮭魚(yú)精DNADNA from salmon sperm 質(zhì)量規(guī)格：進(jìn)分，Sigma31149,蛋白小于5%

非洲綠猴腎細(xì)胞系/IgRCD4-;VERO/IgRCD4-5-氟脫氧胞苷5-Fluoro-2'-deoxycytidine質(zhì)量規(guī)格：98%,進(jìn)分

CW-2細(xì)胞，人細(xì)胞 人色素瘤細(xì)胞,A875細(xì)胞 人急性早幼粒細(xì)胞;HL-605-氟-2‘-脫氧尿苷;氟尿苷5-Fluoro-2'--deoxyuridine質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

HCT-15(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2鳥(niǎo)苷;鳥(niǎo)嘌呤核苷Guanosine質(zhì)量規(guī)格：≥98%,細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)

APCS Others Mouse 小鼠 APCS / SAP 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 鳥(niǎo)嘌呤核苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Guanosine質(zhì)量規(guī)格：≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品