細胞培養(yǎng)過程：

產(chǎn)品僅用于科研冷凍保存細胞之方法：
綿羊前體脂肪細胞 冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

資源名稱　綿羊前體脂肪細胞
類型:貼壁生長

提供形式:T25細胞培養(yǎng)瓶/凍存管

模式菌株:未知

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:90%高糖DMEM/F-12+10%FBS

生長條件:95%空氣+5%二氧化碳 37攝氏度

存儲條件:90%FBS+10%DMSO 液氮

細胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因為復蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大，一旦細胞狀態(tài)不好，很難說是細胞自身不行，還是復蘇沒操作好；另外溫度對細胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種：
是我們復蘇好細胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶，排除復蘇造成影響，常溫運輸也對細胞影響也不大，只需加25元運費(順豐)。
質量保證：我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。
細胞凍存步驟：

細胞培養(yǎng)步驟：
產(chǎn)品僅用于科研一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。

收到綿羊前體脂肪細胞 處理方法
1、首先，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如貼壁特性（貼壁/懸浮）、細胞形態(tài)、所用基礎培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng)基，預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內液體全部轉移至50ml無菌離心管內，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細胞密度超過80%，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml；若細胞密度未超過80%，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。
以下是綿羊前體脂肪細胞 的相關熱銷產(chǎn)品：
大鼠神經(jīng)膠質細胞完全培養(yǎng)基 100mL齊多夫定質量規(guī)格：>98%,USP34,BR,可用于細胞培養(yǎng)Zidovudine

MKN-45人細胞 Human gasic cancer cells MKN-45 1640+10% FBS齊多夫定（標準品）質量規(guī)格：HPLC>98%,標準品Zidovudine

IFNG Protein Mouse 重組小鼠 IFNG / Ierferon Gamma 蛋白 (His 標簽)納他霉素(標準品)質量規(guī)格：含量測定,標準品Natamycin,Pimaricin

NCI-H157(人非小細胞) 5×106cells/瓶×2 SRSV/3T3(SRSV轉化的3T3細胞)硝苯地平質量規(guī)格：>99%,CP,ARNifedipine

MesenFectagen? 間充質干細胞轉染試劑盒硝苯地平（標準品）質量規(guī)格：HPLC>98%,標準品Nifedipine
CL-0350Hela S3(人細胞)5×106cells/瓶×2膽硫酸酯鈉鹽質量規(guī)格：>98%,BR cholesteryl sulfate

EPHB2 Others Human 人 EphB2 / Hek5 人細胞裂解液 (陽性對照) O-叔丁基-L-絲氨酸甲酯鹽酸鹽質量規(guī)格：0.98O-tert-Butyl-L-serine methyl ester

人總RNAHPF NAL-纈氨酸甲酯鹽酸鹽質量規(guī)格：>98%,BRL-Valine methyl ester 

Hs-578T細胞，人癌細胞 SD大鼠骨髓間充質干細胞,SDBMSC細胞 Hep-2, 人細胞系L-抗壞血酸鈉質量規(guī)格：>98%,BR L-ascorbate

NCI-H661(人大細胞細胞) 5×106cells/瓶×2焦1酸鈉(AR)質量規(guī)格：>99%,AR pyrophosphate
CFR Others Rat 大鼠 CFR / CFR-alpha 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (S)-腺苷，環(huán)3',5'-（氫化硫代1酸酯）三乙基胺質量規(guī)格：美國進口(S)-Adenosine, cyclic 3',5'-(hydrogenphosphorothioate) triethylammonium

豬腎細胞;PK-152'-脫氧-β-L-腺苷質量規(guī)格：美國進口2'-Deoxy-β-L-adenosine 

R 1610細胞，中國倉鼠體細胞 人*癌細胞,PC-3細胞 CM-R101大鼠腦動脈平滑肌細胞完全培養(yǎng)基100mL異鳥苷水合物質量規(guī)格：美國進口Isoguanosine Hydrate

大鼠嗜堿性粒細胞性細胞;RBL-2H33,5-O-(1,1,3,3-四異丙基-1,3-二硅氧烷)腺苷質量規(guī)格：美國進口3',5'-O-(1,1,3,3-Tetraisopropyl- 1,3-Disloxanediyl)Adenosine 

IL4R Others Human 人 IL4R / CD124 人細胞裂解液 (陽性對照) 21-乙酰氧基孕1醇酮質量規(guī)格：BR,美國進口21-Acetoxypregnenolone
綿羊前體脂肪細胞 非洲綠猴腎細胞;VERO紅霉素A1醇Erythromycin A Enol Ether質量規(guī)格：美國進口

RKO細胞，人細胞 人皮膚色素瘤細胞,SK-MEL-1細胞 人B細胞瘤細胞;RAMOS紅霉素乳糖醛酸Erythromycin lactobionate質量規(guī)格：美國進口

HCT-8(人盲腸腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2脫氫尼索地平Dehydro Nisoldipine質量規(guī)格：美國進口

ANPEP Others Human 人 ANPEP / CD13 人細胞裂解液 (陽性對照) 4-羥基尼索地平4-Hydroxy Nisoldipine質量規(guī)格：美國進口

人胚胎*成纖維樣細胞;HEH2外消旋布洛芬酰胺rac-Ibuprofen Amide質量規(guī)格：美國進口