資源名稱　小鼠腎小管上皮細(xì)胞產(chǎn)品僅用于科研
種屬:TCMK-1

類型:貼壁生長

形態(tài):CM8-1培養(yǎng)液中，貼壁，上皮樣細(xì)胞，菱形細(xì)長

提供形式:復(fù)蘇形式：T25培養(yǎng)瓶1瓶；或者凍存形式：2ml凍存管2支，干冰費(fèi)另計(jì)。

安全等級:1

模式菌株:未知

培養(yǎng)方法

傳代方法:將舊培養(yǎng)液吸除，PBS清洗兩遍后，加入6mL（/100mm皿）胰酶，在顯微鏡下觀察，期間禁止搖晃培養(yǎng)皿，細(xì)胞剛有脫落時，則吸除大部分胰酶，留約0.5mL，移至培養(yǎng)箱消化，約1min取出。傳代用12mL CM8-1培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打均勻細(xì)胞，后可分3~6皿培養(yǎng)；

生長條件:37℃，5%CO2，CM8-1培養(yǎng)液。CM8-1培養(yǎng)液：90%EMEM+10%FBS。EMEM：EMEM培養(yǎng)液

生長特性:這個細(xì)胞貼壁不牢，路上運(yùn)輸細(xì)胞易成塊脫落

存儲條件:凍存則用6mL凍存液（90%FBS+10%DMSO）終止消化，吹打均勻，分為6支凍存管，用程序降溫盒于-80℃凍存，過夜轉(zhuǎn)移至液氮中保存。
小鼠腎小管上皮細(xì)胞形態(tài)來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實(shí)驗(yàn)等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室，可無菌操作并提供相關(guān)科研項(xiàng)目解決方案以及實(shí)驗(yàn)服務(wù)。

培養(yǎng)操作步驟：
小鼠腎小管上皮細(xì)胞形態(tài)1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布； 
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）； 
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時； 
4．將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中； 
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。 
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時，可采用*化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備  記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等； 
適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對較經(jīng)濟(jì)可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對象。

操作流程：
產(chǎn)品僅用于科研1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計(jì)算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長曲線

以下是公司正在在熱銷的產(chǎn)品：
EPCAM Others Cynomolgus 食蟹猴 EpCAM / OP-1 / TACSTD1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 尼莫地平質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,可用于細(xì)胞培養(yǎng)Nimodipine

人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;SW480 [SW 480;SW-480]尼莫地平（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Nimodipine

tTA基因修飾的小鼠*癌細(xì)胞(B類);Pan02-CAG-tTA-4B3 胰凝乳蛋白酶(含10mL酶解緩沖液) 1mL福辛普利鈉質(zhì)量規(guī)格：度≥99.0%（HPLC）Fosinopril

BxPC-3, 人原位*腺癌細(xì)胞株 Human呋塞米（速尿）質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRFurosemide

CD99 Others Mouse 小鼠 CD99 / PILR1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 呋塞米（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：含量測定Furosemide
CL-0339G-401(人Wilms細(xì)胞)5×106cells/瓶×2N-芐基甘氨酸鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格：0.98Bzl-Gly-OH·HCl

PHKG1 Others Human 人 PHKG1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 甘氨酸芐酯鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格：0.98Glycine benzyl ester

人食道平滑肌細(xì)胞總RNAHESMC NAL-異亮氨酸叔丁酯鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRL-Isoleucine t-butyl ester

RD細(xì)胞，惡性胚胎橫紋肌瘤 人細(xì)胞系,Tul-1細(xì)胞 原代軟骨細(xì)胞特制基礎(chǔ)無血清培養(yǎng)基Many types of cells包裝：500/100mlL-谷氨酰胺(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品L-Glutamine

豹貓肺成纖維樣細(xì)胞;LCL2谷胱甘肽（還原型）質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRGlutathione (Reduced);GSH
EPCAM Others Rat 大鼠 EpCAM / OP-1 / TACSTD1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 9H,9H-三十氟-8,10-十七烷二酮(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)9H,9H-Triacontafluoro-8,10-heptadecanedione

人晶狀體上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL9-溴菲(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)9-Bromophenanthrene

NRK-52E細(xì)胞，大鼠腎細(xì)胞 HEL(紅細(xì)胞) 豬腎細(xì)胞;PK-153-溴菲(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)3-Bromophenanthrene

EFNA3 Protein Human 重組人 Ephrin-A3 / EFNA3 / EFL2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)3,6-二甲基菲(>95.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)3,6-Dimethylphenanthrene

D283 Med(人腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 腸粘膜上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)2,5-雙(4-氨苯基)-1,3,4-惡二唑(>98.0%(HPLC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)2,5-Bis(4-aminophenyl)-1,3,4-oxadiazole
小鼠腎小管上皮細(xì)胞形態(tài)IL20RB Others Rat 大鼠 IL20RB 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 紅菲繞啉(升華提)(>99.0%(HPLC)(T))Bathophenanthroline (purified by sublimation)質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(HPLC)(T)

人腎皮層上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL浴銅靈(>98.0%(T))Bathocuproine質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)

B16-Fo細(xì)胞，鼠色素瘤細(xì)胞系 WI-38(胚肺細(xì)胞) 人晶體上皮細(xì)胞永生系;SRA01/04(HLE)新亞銅試劑半水合物(>98.0%(T))Neocuproine Hemihydrate質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)

CCL8 Protein Mouse 重組小鼠 CCL8 / MCP-2 蛋白 (His & NusA 標(biāo)簽)紅菲咯啉(>99.0%(T))Bathophenanthroline質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(T)

SGC7901(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 HER2 / ErbB2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 4,7-二羥基-1,10-菲啰啉(>98.0%(HPLC))4,7-Dihydroxy-1,10-phenanthroline質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)