抗ALV-A雞胚成纖維細(xì)胞系說明書冷凍保存細(xì)胞之方法：

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
細(xì)胞凍存步驟：

資源名稱　抗ALV-A雞胚成纖維細(xì)胞系說明書
種屬:DF-1/A

形態(tài):成纖維細(xì)胞樣

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle＇sBalancedSalts)10%FBS

生長特性:貼壁生長
細(xì)胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因為復(fù)蘇手法對于細(xì)胞狀態(tài)影響較大，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好，很難說是細(xì)胞自身不行，還是復(fù)蘇沒操作好；另外溫度對細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細(xì)胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種：產(chǎn)品僅用于科研
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運輸也對細(xì)胞影響也不大，只需加25元運費(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞培養(yǎng)過程：

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。
以下是抗ALV-A雞胚成纖維細(xì)胞系說明書的相關(guān)熱銷產(chǎn)品：
NUGC-3人細(xì)胞 Human gasic cancer cells NUGC-3 1640+10% FBS亞胺培南質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRImipenem monohydrate

IFNG Protein Human 重組人 IFN-gamma / IFNG / γ-IFN 蛋白亞胺培南（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Imipenem monohydrate

NCI-H2087(人非小細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 Mo-MuLv/3T3(Mo-MuLv感染的3T3細(xì)胞)核苷酸膠體染料質(zhì)量規(guī)格：BRGreen-DNA Dye,SYBR Green I

NIH/3T3, 小鼠成纖維細(xì)胞系D-葡萄糖無水質(zhì)量規(guī)格：>99.5%,分子生物學(xué)級D-Glucose

HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/Egypt/ 3300-NAMRU3/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 咪唑質(zhì)量規(guī)格：ARImidazole
CL-0456TM4(正常小鼠Sertoli細(xì)胞)5×106cells/瓶×2質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)N,O-Bis(trimethylsilyl)trifluoroacetamide

SIGIRR Others Human 人 SIGIRR / TIR8 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) TMS-咪唑(=N-三甲基硅基咪唑)(>98.0%(T))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)TMS-Imidazole (=N-Trimethylsilylimidazole)

人膀胱基質(zhì)成纖維細(xì)胞RNAHBdSF miRNA5 μgN,O-雙(三甲硅基)乙酰胺(>75.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>75.0%(GC)N,O-Bis(trimethylsilyl)acetamide

T24細(xì)胞，人膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞 大鼠細(xì)胞(wistar 大鼠),CBRH7919細(xì)胞 RN-c, 大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元巴氯芬(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Baclofen

Ishikawa(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2巴洛沙星(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：> 98%,水合物標(biāo)準(zhǔn)品Balofloxacin Dihydrate
GDNF Others Rat 大鼠 GDNF 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 7-乙基喜樹堿(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品7-Ethylcamptothecin

CL-0347HCC38(人導(dǎo)管癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×27-乙基喜樹堿質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR7-Ethylcamptothecin

COS-7L, 非洲綠猴腎成纖維細(xì)胞 人癌細(xì)胞，MCF7細(xì)胞 PT67(小鼠逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細(xì)胞)(-)-Blebbistatin質(zhì)量規(guī)格：>98%(-)-Blebbistatin

人侵襲性脈絡(luò)膜色素瘤細(xì)胞;C918奈達鉑;順糖氨鉑質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRNedaplatin

OSMR Others Human 人 OSMR / IL31RB 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 5-磺基水楊酸質(zhì)量規(guī)格：ARsulfosalicyclic acid
抗ALV-A雞胚成纖維細(xì)胞系說明書人侵襲性脈絡(luò)膜色素瘤細(xì)胞;MuM-2B 大鼠皮下脂肪細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL環(huán)嗪酮（標(biāo)準(zhǔn)品）Hexazinone質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,98%

LM-8 小鼠氯吡嘧磺隆（標(biāo)準(zhǔn)品）Halosulfuron-methyl質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5%

WFDC2 Others Human 人 WFDC2 / HE4 / WAP5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 噻螨酮（標(biāo)準(zhǔn)品） Hexythiazox質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5%

人*成纖維細(xì)胞HSF氟吡禾靈（標(biāo)準(zhǔn)品）Haloxyfop質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品

IL2RG Others Rat 大鼠 IL2RG / CD132 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 吡蟲啉（標(biāo)準(zhǔn)品）Imidacloprid質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.5%
收到抗ALV-A雞胚成纖維細(xì)胞系說明書處理方法
產(chǎn)品僅用于科研1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細(xì)胞密度超過80%，可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達80%左右時再進行傳代操作。