細(xì)胞培養(yǎng)過程：

產(chǎn)品僅用于科研冷凍保存細(xì)胞之方法：
大鼠肝細(xì)胞培養(yǎng)冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí)， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

資源名稱　大鼠肝細(xì)胞培養(yǎng)
種屬:BRL

類型:肝

形態(tài):上皮細(xì)胞樣

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:DMEM培養(yǎng)基(GIBCO,貨號(hào)12800017，添加NaHCO3 1.5g/L)，90%；胎牛血清，10%。 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度。

生長特性:貼壁生長

細(xì)胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運(yùn)輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因?yàn)閺?fù)蘇手法對(duì)于細(xì)胞狀態(tài)影響較大，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好，很難說是細(xì)胞自身不行，還是復(fù)蘇沒操作好；另外溫度對(duì)細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細(xì)胞儲(chǔ)存的zui好方式，快遞時(shí)間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運(yùn)輸也對(duì)細(xì)胞影響也不大，只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞凍存步驟：

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
產(chǎn)品僅用于科研一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號(hào)11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號(hào)16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。

收到大鼠肝細(xì)胞培養(yǎng)處理方法
1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請(qǐng)拍照，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí)，若細(xì)胞密度超過80%，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作。
以下是大鼠肝細(xì)胞培養(yǎng)的相關(guān)熱銷產(chǎn)品：
MTT細(xì)胞活力和增殖檢測試劑盒MTT鹽酸芐絲肼質(zhì)量規(guī)格：>98%Benserazide HCl

CD2 Others Canine 狗 CD2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 卡格列凈；坎格列凈質(zhì)量規(guī)格：>95%,高效的選擇性亞型2鈉-葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(SGLT2) 抑制劑Canagliflozin

人上皮細(xì)胞;Ca Ski潑尼質(zhì)量規(guī)格：>98%,USP30,BRPrednisone

雜交瘤(B類);C3110D2E11 細(xì)胞，Lncap細(xì)胞 H4-II-E-C3細(xì)胞，大鼠肝細(xì)胞瘤潑尼(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Prednisone

SW 1990 [SW-1990, SW1990] , 人*癌細(xì)胞 Human強(qiáng)力霉素堿/強(qiáng)力霉素一水合物質(zhì)量規(guī)格：>900μg/mg,USP,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)Doxycycline monohydrate/Doxycycline base
CL-0436SF17(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2鹽酸決奈達(dá)隆質(zhì)量規(guī)格：>99%,鹽酸鹽Dronedarone HCL

CCNA1 Others Human 人 CCNA1 / Cyclin-A1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 決奈達(dá)隆(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Dronedarone

人肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞RNAHPAEC miRNA5 μg雷諾嗪質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRRanolazine HCl

H08910細(xì)胞，細(xì)胞 人細(xì)胞,H125細(xì)胞 MLF, 小鼠成纖維細(xì)胞阿扎那韋硫酸鹽質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRAtazanavir sulfate

豚鼠皮膚細(xì)胞;GP-S1阿扎那韋硫酸鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Atazanavir sulfate
TGFBR2 Others Rat 大鼠 TGFBR2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 5-羥基-2-金剛烷酮質(zhì)量規(guī)格：>98.5%5-hydroxy-2-adamantanone

人腎系膜細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL右佐匹*質(zhì)量規(guī)格：>99%Es

BALB/3T3 clone A31細(xì)胞，小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 L1210(細(xì)胞) EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KMY0901右佐匹*(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：>99%,標(biāo)準(zhǔn)品Es

CCL17 Protein Human 重組人 CCL17 / TARC / SCYA17 蛋白 (His 標(biāo)簽)醋酸曲安奈德質(zhì)量規(guī)格：>97%,BRTriamcinolone Acetonide Acetate

SiHa(人子宮頸鱗癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠 SerpinE1 / PAI-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 4-正辛氧基苯(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)4-n-Octyloxybenzaldehyde
大鼠肝細(xì)胞培養(yǎng)人皮膚色素瘤細(xì)胞;SK-MEL-1環(huán)胞甙鹽酸鹽；鹽酸環(huán)胞苷；安西他濱鹽酸鹽Cyclocytidine質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

PDCD1LG2 Others Mouse 小鼠 B7-DC / PD-L2 / CD273 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 5'-三1酸胞苷三鈉鹽Cytidine-5'-triphosphate (CTP), 3質(zhì)量規(guī)格：>98%,分子生物學(xué)級(jí)

Eca-109 人細(xì)胞細(xì)胞弛素A(>Cytochalasin A質(zhì)量規(guī)格：>98%，BR

HOS人細(xì)胞 Human osteosarcoma cell line HOS EMEM+10% FBS細(xì)胞弛素C(>Cytochalasin C質(zhì)量規(guī)格：>98%，BR

CD70 Protein Rat 重組大鼠 CD70 / CD27L / TNFSF7 蛋白 (His 標(biāo)簽)細(xì)胞弛素 D(>Cytochalasin D質(zhì)量規(guī)格：>98%，BR