培養(yǎng)操作步驟：
人類成纖維細(xì)胞系形態(tài)1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布； 
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）； 
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)； 
4．將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中； 
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。產(chǎn)品僅用于科研 

資源名稱　人類成纖維細(xì)胞系
種屬:CNLMG-B5537SKIN

形態(tài):成纖維細(xì)胞樣　

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle＇sBalancedSalts)10%FBS

生長特性:貼壁生長

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用*化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備  記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等； 
適用的對(duì)象范圍廣，從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物，一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。
以下是公司正在在熱銷的產(chǎn)品：
SERPINB6 Others Human 人 SerpinB6 / PI-6 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 無水硫酸鈉(for HPLC,≥99.0%(T))質(zhì)量規(guī)格：for HPLC,≥99.0%(T) sulfate anhydrous

人口腔表皮樣癌細(xì)胞;KB碳酸氫鈉(for HPLC,≥99.0%)質(zhì)量規(guī)格：for HPLC,≥99.0% bicarbonate

HeLa 229細(xì)胞，細(xì)胞 人低分化細(xì)胞,MKN-45細(xì)胞 鼬肺上皮細(xì)胞;MV-1-Lu馬來酸阿扎他啶質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRAzatadine Maleate

tTA基因修飾的小鼠*癌細(xì)胞(B類);Pan02-CAG-tTA-4B3鹽酸班布特羅(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Bambuterol HCl

IL18BP Others Mouse 小鼠 IL18BP 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 鹽酸班布特羅質(zhì)量規(guī)格：≥98%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)Bambuterol HCl
CL-0437SF763(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2草甘膦標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=2%)N-(Phosphonomethyl)glycine solution質(zhì)量規(guī)格：10μg/ml,u=2%

細(xì)胞名稱 M-37細(xì)胞 G-7(小鼠骨骼肌肌肉母瘤細(xì)胞)辛(分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%)Phoxim質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%

人細(xì)胞;Hela P10s-11F除草標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=5%)Nitrofen solution質(zhì)量規(guī)格：10μg/ml,u=5%

DLL4 Others Human 人 DLL4 / Delta4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 2-萘氧乙酸(標(biāo)準(zhǔn)品)2-Naphthoxyacetic acid質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品

人急性母細(xì)胞性細(xì)胞;MOLT-4滅菌丹標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=2%)N-(Trichloromethylthio)phthalimide solution質(zhì)量規(guī)格：100μg/ml,u=2%
牦牛皮膚細(xì)胞;BMU-S1牛肉浸膏shēng huà shì jì容量：500克

CDC37 Others Mouse 小鼠 CDC37 / CDC37A 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 2,4-二基;4-基虧哪啶 2,4-DiMqthylinoneolinq;4-Mqthylinonecldinq 1198-37-4

腎小球內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)油酸鉀shēng huà shì jì容量：RT100克

草魚*細(xì)胞;L8824 人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤，WERI-Rb-1細(xì)胞 KB(口腔表皮樣癌細(xì)胞)錄化shēng huà shì jì容量：1公斤

人細(xì)胞;SF7673398-40-12-甲基-DL-絲酸ALPHA-metxYL-DL-SERINE
人類成纖維細(xì)胞系形態(tài)PROC Others Human 人 PROC1 / Protein C / PROC 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 環(huán)吡酮-d11Ciclopirox-d11質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

小鼠皮層神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞(EGFP標(biāo)記)環(huán)吡酮β-D-葡萄糖苷酸Ciclopirox beta-D-Glucuronide質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

3T6細(xì)胞，小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 人細(xì)胞,gpc-1細(xì)胞 人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞RNAHRPEpiC miRNA5 μg4-羥基纈沙坦（非對(duì)映）4-Hydroxy Valsartan (Mixture of Diastereomers)質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

恒河猴腎細(xì)胞;RM-3雌激素酮醋酸鹽Estrone Acetate質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

EPCAM Others Human 人 EpCAM 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 4-甲氧基-13C,d3-雌激素酮4-Methoxy-13C,d3-estrone質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
操作流程：
1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長至60%～70%融合時(shí)，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。產(chǎn)品僅用于科研
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計(jì)算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長曲線
人類成纖維細(xì)胞系形態(tài)來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實(shí)驗(yàn)等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室，可無菌操作并提供相關(guān)科研項(xiàng)目解決方案以及實(shí)驗(yàn)服務(wù)。