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產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
保存條件 | |
品牌 | 莼試 |
貨號 | CSX4086 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 詳見說明書 |
細胞形態(tài) | 上皮細胞樣 |
是否是腫瘤細胞 | 是 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 貼壁生長 |
物種來源 | 詳見說明書 |
包裝規(guī)格 | 詳見說明書 |
純度 | 詳見說明書% |
是否進口 | 是 |
發(fā)綠色熒光的小鼠胚胎干細胞培養(yǎng)冷凍保存細胞之方法:
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
細胞凍存步驟:
資源名稱 發(fā)綠色熒光的小鼠胚胎干細胞培養(yǎng)
種屬:G1
形態(tài):上皮細胞樣
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
生長特性:貼壁生長
細胞分類:
第一種:
是凍存產(chǎn)品,由氮直液接拿出,干冰運輸給客戶。一般不推薦這種,也較少使用這種方式,因為復(fù)蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大,一旦細胞狀態(tài)不好,很難說是細胞自身不行,還是復(fù)蘇沒操作好;另外溫度對細胞、基因功能狀態(tài)影響很大,也不是細胞儲存的zui好方式,快遞時間也很難控制,多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量;干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種:產(chǎn)品僅用于科研
是我們復(fù)蘇好細胞,QC通過后,T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶,排除復(fù)蘇造成影響,常溫運輸也對細胞影響也不大,只需加25元運費(順豐)。
質(zhì)量保證:我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。
細胞培養(yǎng)過程:
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080),85%;北美胎牛血清(United States,GIBCO,貨號16000-044),15%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?/span>10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。
以下是發(fā)綠色熒光的小鼠胚胎干細胞培養(yǎng)的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
THPO Protein Mouse 重組小鼠 Thrombopoietin / THPO / TPO 蛋白 (His 標(biāo)簽)CHAPSO;3-[(3-膽氨丙基)二甲基氨基]-2-羥基-1-丙磺酸質(zhì)量規(guī)格:>99%,分子生物學(xué)級;CHAPSO
人張氏肝細胞;Chang liver 人上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL二硫赤蘚醇(DTE);1,4-二硫代赤蘚醇質(zhì)量規(guī)格:>99%,進分sigma1,4-Dithioerythritol
Saos-2,人成細胞精噁唑禾草靈(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品Fenoxaprop-P
ART4 Others Cynomolgus 食蟹猴 ART4 人細胞裂解液 (陽性對照) 6-羥基煙酸(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98.0%(HPLC))質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98.0%(HPLC)6-Hydroxynicotinic Acid
人胚;MRC-5正庚醇(分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.8%(GC))質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.8%(GC)1-Heptanol
CM-H076人心房肌細胞完全培養(yǎng)基100mL4-甲基傘形酮酰-alpha-D-吡喃糖苷質(zhì)量規(guī)格:分子生物學(xué)級MU-alpha-GAL
OSM Others Mouse 小鼠 Oncostatin M / OSM 人細胞裂解液 (陽性對照) 粘酸(>98%,BC)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BCMucic acid
小鼠角膜內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL碲標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,基體:HCI)質(zhì)量規(guī)格:100μg/ml,基體:HCITellurium standard
NCI-H929-UBC-EGFP(穩(wěn)定株)人細胞 NCI-H929-UBC-EGFP (stable sain) human myeloma cell 1640+20% FBS(熱滅活)銩標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/mL,基體:10%HCL)質(zhì)量規(guī)格:1000μg/mL,基體:10%HCLThulium standard
IL25 Protein Human 重組人 IL25 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)釩標(biāo)準(zhǔn)溶液(500mg/L,溶劑:水)質(zhì)量規(guī)格:500mg/L,溶劑:水Vanadium standard
LRIG1 Others Mouse 小鼠 LRIG1 / LIG-1 人細胞裂解液 (陽性對照) L-鼠李糖;鼠李糖一水質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BRL(+)-Rhamnose monohydrate
MOLT-4 人急性母細胞細胞鼠尾草酚(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥95%,標(biāo)準(zhǔn)品Carnosol
NCI-H1975人 Human lung adenocarcinoma cell line NCI-H1975 RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS鼠尾草酸(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Carnosic acid
ADIPOQ Protein Mouse 重組小鼠 Adiponectin / Acrp30 / ADIPOQ 蛋白 (His 標(biāo)簽)雙去氧基姜黃素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Bisdemethoxycurcumin
SV-40轉(zhuǎn)化;WI38/VA13 人胰島β細胞完全培養(yǎng)基 100mLL-犬尿氨酸(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品L-Kynurenine
發(fā)綠色熒光的小鼠胚胎干細胞培養(yǎng)人間充質(zhì)干細胞-臍帶磺胺-5-甲氧嘧啶(98%)Sulfameter質(zhì)量規(guī)格:>98%
人胚胎,皮膚,肌肉;M-20 人外周血白細胞完全培養(yǎng)基 100mL雙甲脒(標(biāo)準(zhǔn)品)Amitraz質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,分析標(biāo)準(zhǔn)品
人臍動脈平滑肌細胞HUASMC雙甲脒Amitraz質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR
EPCAM Others Rat 大鼠 EpCAM / OP-1 / TACSTD1 人細胞裂解液 (陽性對照) 檸檬酸一水Citric acid monohydrate質(zhì)量規(guī)格:>99%,AR
大鼠食管上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mLSalubrinalSalubrinal質(zhì)量規(guī)格:>98%,eIF2α選擇性抑制劑
收到發(fā)綠色熒光的小鼠胚胎干細胞培養(yǎng)處理方法
產(chǎn)品僅用于科研1、首先,觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞:將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細胞密度超過80%,可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至5ml;若細胞密度未超過80%,將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。