抗SARS病毒N蛋白小鼠7培養(yǎng)冷凍保存細(xì)胞之方法：

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
細(xì)胞凍存步驟：

資源名稱　抗SARS病毒N蛋白小鼠7培養(yǎng)
形態(tài):淋巴母細(xì)胞樣

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

傳代方法:保持細(xì)胞密度在1×105～1×106cells/ml之間，每周換液2～3次

生長特性:半貼壁生長

存儲條件:基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
細(xì)胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運(yùn)輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因?yàn)閺?fù)蘇手法對于細(xì)胞狀態(tài)影響較大，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好，很難說是細(xì)胞自身不行，還是復(fù)蘇沒操作好；另外溫度對細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細(xì)胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。
第二種：產(chǎn)品僅用于科研
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運(yùn)輸也對細(xì)胞影響也不大，只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞培養(yǎng)過程：

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
以下是抗SARS病毒N蛋白小鼠7培養(yǎng)的相關(guān)熱銷產(chǎn)品：
Hep G2 人細(xì)胞1酸二氫銨（分析標(biāo)準(zhǔn)品,用于凱氏定氮法氮測定,≥99.5%）質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,用于凱氏定氮法氮測定,≥99.5%Ammonium phosphate monobasic

SW 982 [SW-982, SW982]人滑膜細(xì)胞 SW 982 [SW-982, SW982] human synovial sarcoma cells L-15(GIBCO)+10%FBS1酸二氫銨(for HPLC,≥99.0%(T))質(zhì)量規(guī)格：for HPLC,≥99.0%(T)Ammonium phosphate monobasic

內(nèi)皮生長因子殺蟲脲(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品Triflumuron

大鼠腹部脊髓神經(jīng)元(RVSCI)(1×106) HNE2, 人細(xì)胞系 Human戊菌隆(分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5%)質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5%Pencycuron

SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-1噻螨酮標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=3%)質(zhì)量規(guī)格：100μg/ml,u=3%Hexythiazox solution
CM-M043小鼠小腸平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL苯溴馬?。?biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：含量測定BENZBROMARONE

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T6-Swiss albino 小鼠頜下腺上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL鹽酸布替萘芬（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC法含量測定Butenafine HCl

小鼠神經(jīng)干細(xì)胞 Mouse鹽酸托烷司瓊（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Tropisetron

PTX3 Others Human 人 PTX3 / TNFAIP5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸托烷司瓊質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRTropisetron

BALB/C小鼠肝瘤株;BNL 1ME A.7R.1鹽酸魯拉西酮質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRLurasidone HCl
hDPSCs, 人前牙髓干細(xì)胞 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞，3T6swiss細(xì)胞 Hs 1.Tes(正常人細(xì)胞)卵嶙脂吐溫80營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基1米

人侵襲性脈絡(luò)膜色素瘤細(xì)胞;MuM-2C2-脫氧-2--D-葡萄糖 2-Fluoro-2-deoxy-D-glucose 29702-43-0 25MG 通用試劑

NCSTN Others Human 人 NCSTN / Nicasin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 17Alpha-羌基皇體同 xy7noxyprogqstqronq 68-96-

人胚胎心肌組織來源細(xì)胞;CCC-HEH-2β-N-乙?；咸烟擒彰笢y試盒1000支/盒RT

ACE2 Others Rat 大鼠 ACE2 / ACEH 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 化乙酰膽堿 (-20℃)NA
抗SARS病毒N蛋白小鼠7培養(yǎng)水貂肺上皮細(xì)胞;Mv.1.Lu(NBL-7)己酮可可堿（標(biāo)準(zhǔn)品）Pentoxifylline質(zhì)量規(guī)格：含量測定

黃胸鼠;YCR 高轉(zhuǎn)移細(xì)胞，95-D細(xì)胞 STO細(xì)胞，鼠胚成纖維細(xì)胞系氯波必利（標(biāo)準(zhǔn)品）Clebopride質(zhì)量規(guī)格：UV法含量測定

PC-12(高分化)，PC12，大鼠腎上腺髓質(zhì)嗜鉻瘤分化細(xì)胞株(高分化) Rattus醉魚草皂苷IVb（標(biāo)準(zhǔn)品）Buddlejasaponin Ivb質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品

EDAR Others Human 人 EDAR / DL 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 厄多司坦（標(biāo)準(zhǔn)品）Erdosteine質(zhì)量規(guī)格：含量測定

人氣管平滑肌細(xì)胞cDNAHTSMC cDNA吡美莫司;匹美莫司Pimecrolimus質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR
收到抗SARS病毒N蛋白小鼠7培養(yǎng)處理方法
產(chǎn)品僅用于科研1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細(xì)胞密度超過80%，可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作。