細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程：

產(chǎn)品僅用于科研冷凍保存細(xì)胞之方法：
抗睪酮小鼠7培養(yǎng)冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí)， 以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

資源名稱(chēng)　抗睪酮小鼠7培養(yǎng)
種屬:T01

形態(tài):淋巴母細(xì)胞樣

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

傳代方法:保持細(xì)胞密度在1×105～1×106cells/ml之間，每周換液2～3次

生長(zhǎng)特性:半貼壁生長(zhǎng)

存儲(chǔ)條件:基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

細(xì)胞分類(lèi)：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運(yùn)輸給客戶(hù)。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因?yàn)閺?fù)蘇手法對(duì)于細(xì)胞狀態(tài)影響較大，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好，很難說(shuō)是細(xì)胞自身不行，還是復(fù)蘇沒(méi)操作好；另外溫度對(duì)細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細(xì)胞儲(chǔ)存的zui好方式，快遞時(shí)間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞，QC通過(guò)后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶(hù)，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運(yùn)輸也對(duì)細(xì)胞影響也不大，只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買(mǎi)到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源，100%保證5代以?xún)?nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞凍存步驟：

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
產(chǎn)品僅用于科研一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號(hào)11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號(hào)16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。

收到抗睪酮小鼠7培養(yǎng)處理方法
1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請(qǐng)拍照，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落；先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸浮）、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%，可正常傳代；若未超過(guò)80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí)，若細(xì)胞密度超過(guò)80%，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過(guò)80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作。
以下是抗睪酮小鼠7培養(yǎng)的相關(guān)熱銷(xiāo)產(chǎn)品：
H22(小鼠細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2厚樸酚(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Magnolol

HWP visceral Pellet 人類(lèi)內(nèi)臟白前脂肪細(xì)胞團(tuán)塊 > 1 mio.cells 人真皮微內(nèi)皮細(xì)胞總RNAHDMEC NA埃索美拉唑鎂(三水)質(zhì)量規(guī)格：>99%,BREsomeprazole magnesium trihydrate

T-109B彈性蛋白酶(含100mL酶解緩沖液)10mL雙(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品Dichlorophene

F7 Others Mouse 小鼠 Coagulation Factor VII / FVII / F7 CHO細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 異丙凈(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品Dipropetryn

成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)添加物(不含動(dòng)物成分)FGS-acf異菌脲標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=4%)質(zhì)量規(guī)格：100μg/ml,u=4%[3-(3,5-Dichlorophenyl)-2,4-dioxoimidazolidinyl]-N-(methylethyl)carboxamide standard solution
CM-R095大鼠成年表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL兩性霉素B(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定Amphotericin B

NP Others H7N9 甲型 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) Nucleocapsid / NP 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 醋酸增素質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRAngiotensin Acetate

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞-處理MEF-mt鎂試劑II質(zhì)量規(guī)格：ARMagnesonII

非洲綠猴腎細(xì)胞;Vero E6 人類(lèi)惡性色素瘤，A375細(xì)胞 LS 174T(腺癌細(xì)胞)高鐵試劑質(zhì)量規(guī)格：AR,98.5%Ferron

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KMY0922酚試劑(3-甲基-2-苯并噻唑啉酮腙鹽酸鹽)質(zhì)量規(guī)格：AR,>98%3-Methyl-2-benzothialinone
ACVR1 Others Canine 狗 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 大內(nèi)皮素-1 （1-39），豬質(zhì)量規(guī)格：>95%,BRBig Endothelin -1 (1-39),porcine

人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;HCT-8 [HRT-18]腦鈉素-32，大鼠質(zhì)量規(guī)格：>95%,BRBNP-32, rat

Hep-3B細(xì)胞，人細(xì)胞系 小鼠細(xì)胞,LLC細(xì)胞 大額牛與婆羅門(mén)牛雜交F1代皮膚成纖維樣細(xì)胞;BOS-6鈴蟾肽質(zhì)量規(guī)格：>95%,BRBombesin

MFC(小鼠細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2緩激肽質(zhì)量規(guī)格：>95%,BRBradykinin

Promocell C-23025 Fibroblast Growth Medium 3, 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基3型(即用型) 500ml大麥芽堿(標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥95%，標(biāo)準(zhǔn)品Hordenine
抗睪酮小鼠7培養(yǎng)MN-c, 小鼠皮質(zhì)神經(jīng)元甲基綠Methyl Green質(zhì)量規(guī)格：BS

腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞;AAV-293 人腎足突細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL茜素綠;酸性綠25Alizarin green質(zhì)量規(guī)格：BS

人平滑肌細(xì)胞RNAHPSMC miRNA5 μg萘酚綠BNaphthol Green B質(zhì)量規(guī)格：BS

SCN2B Others Human 人 SCN2B 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 固綠FCFFast Green FCF質(zhì)量規(guī)格：BS

大額牛腎細(xì)胞;BFR-K1子種綠A；藍(lán)AAlphazurine A質(zhì)量規(guī)格：BS