抗乳鐵蛋白小鼠7說明書冷凍保存細(xì)胞之方法：

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí)， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
細(xì)胞凍存步驟：

資源名稱　抗乳鐵蛋白小鼠7說明書
種屬:5B4

形態(tài):淋巴母細(xì)胞樣

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

傳代方法:保持細(xì)胞密度在1×105～1×106cells/ml之間，每周換液2～3次

生長特性:半貼壁生長

存儲條件:基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
細(xì)胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運(yùn)輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因?yàn)閺?fù)蘇手法對于細(xì)胞狀態(tài)影響較大，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好，很難說是細(xì)胞自身不行，還是復(fù)蘇沒操作好；另外溫度對細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細(xì)胞儲存的zui好方式，快遞時(shí)間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。
第二種：產(chǎn)品僅用于科研
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運(yùn)輸也對細(xì)胞影響也不大，只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞培養(yǎng)過程：

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
以下是抗乳鐵蛋白小鼠7說明書的相關(guān)熱銷產(chǎn)品：
Hela(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0426RKO-E6(人轉(zhuǎn)基因細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 人胚;MRC-5萎銹靈(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.9%Carboxine

TNFa轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細(xì)胞;JEG-3-VP16-TNFa環(huán)(Standard for GC,>99.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC,>99.0%(GC)Cyclohexanol

CD79B Others Mouse 小鼠 CD79B / B29 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 四甲基錫(>96.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>96.0%(GC)Tetramethyltin

MKN-45 低分化二氯二茂鋯(>97.0%(T))質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(T)Zirconocene Dichloride

Calu-1人細(xì)胞 Calu-1 human lung cancer cells McCOY's 5A+10%FBSChirabite-AR[用于核磁共振]質(zhì)量規(guī)格：用于核磁共振Chirabite-AR
COC1/CDDP細(xì)胞，人順鉑耐藥株 大黃魚腎細(xì)胞,PCK細(xì)胞 臍平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)(S)-(+)-2,2,2-三氟-1-(9-蒽基)乙醇(>99.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(GC)(S)-(+)-2,2,2-Trifluoro-1-(9-anthryl)ethanol

C3H/10T1/2, Clone 8(小鼠胚胎成纖維細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2N-(2-羧基苯甲酰)-(-)-10,2-樟腦磺內(nèi)酰胺(>98.0%(HPLC)(T))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T)N-(2-Carboxybenzoyl)-(-)-10,2-camphorsultam

HTSMC Pellet 人類氣管平滑肌細(xì)胞團(tuán)塊 > 1 mio.cells 人臍平滑肌細(xì)胞裂解物HUVSMCL對茴香酸(>99.0%(GC)(T))質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(GC)(T)p-Anisic Acid

CL-0122HUVEC(HUV-EC-C) (人臍內(nèi)皮細(xì)胞)5×106cells/瓶×29-蒽羧酸(>97.0%(GC)(T))質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC)(T)9-Anthracenecarboxylic Acid

HGF Others Human 人 HGF / Hepatocyte Growth Factor CHO細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 左旋氨氯地平/苯磺酸左旋氨氯地平質(zhì)量規(guī)格：>97%(S)-Amlodipine
615小鼠網(wǎng)織細(xì)胞性瘤株;L615CITRICACID,TRIwo7iumSALT,DIHYDRATE檸檬酸三鈉,二水試劑級白色粉末RTsigma

DKK1 Others Rhesus 恒河猴 DKK-1 / Dkk1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 酰香草同 ccqtovcnillonq 498-0-

人絨毛間葉成纖維細(xì)胞cDNAHVMF cDNA葡聚糖凝膠 Sephade... Sephadex G-75 Superfine 37224-29-6 100G 分離試劑

EDA2R Others Rat 大鼠 XEDAR / EDA2R 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) xy7noGENPEROXIDEACS級透明無色液體COLD不sigma

胎兒真皮成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL(糖原II)
抗乳鐵蛋白小鼠7說明書EFNA1 Others Mouse 小鼠 EFNA1 / Ephrin-A1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 堿式碳酸銅(銅度：52.5~56.5%)Copper(II) carbonate basic質(zhì)量規(guī)格：度(銅)：52.5~56.5%

人前脂肪細(xì)胞-內(nèi)臟總RNAHPA-v NA氧化銅粉(>99%,BR)Copper(II) oxide質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

IL6ST Others Cynomolgus 食蟹猴 IL6ST / gp130 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 焦1銅Copper(II) pyrophosphate質(zhì)量規(guī)格：(Cu):36.0~38.0%,Tech Grade

豹貓肺成纖維樣細(xì)胞;LCL21酸銅三水(>Copper(II) tartrate, trihydrate質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

CFPAC-1細(xì)胞，人*癌細(xì)胞 人惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞,RD細(xì)胞 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T6-Swiss albino2'-脫氧腺苷5'二1酸三鈉鹽(>97%,BR)dADP質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR
收到抗乳鐵蛋白小鼠7說明書處理方法
產(chǎn)品僅用于科研1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí)，若細(xì)胞密度超過80%，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作。