上海莼試生物技術(shù)有限公司
   
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產(chǎn)品展廳
HBL-1細(xì)胞完全培養(yǎng)基說明書
  • 品牌:莼試
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
  • 貨號:CSX4023
  • 發(fā)布日期: 2020-06-08
  • 更新日期: 2025-03-14
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
保存條件
品牌 莼試
貨號 CSX4023
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
組織來源 詳見說明書
細(xì)胞形態(tài)
是否是腫瘤細(xì)胞
CAS編號
保質(zhì)期 詳見說明書
器官來源 詳見說明書
免疫類型 詳見說明書
品系 詳見說明書
生長狀態(tài)
物種來源 詳見說明書
包裝規(guī)格 詳見說明書
純度 詳見說明書%
是否進(jìn)口

HBL-1細(xì)胞完全培養(yǎng)基說明書冷凍保存細(xì)胞之方法:

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4 30~60 分鐘-20 30 分鐘* → -80 16~18 小時(或隔夜)液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 –80 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
細(xì)胞凍存步驟:

資源名稱 HBL-1細(xì)胞完全培養(yǎng)基說明書
安全等級:1

模式菌株:未知

培養(yǎng)方法

生長條件:90%RPMI-1640+10%FBS
細(xì)胞分類:
第一種:
是凍存產(chǎn)品,由氮直液接拿出,干冰運(yùn)輸給客戶。一般不推薦這種,也較少使用這種方式,因?yàn)閺?fù)蘇手法對于細(xì)胞狀態(tài)影響較大,一旦細(xì)胞狀態(tài)不好,很難說是細(xì)胞自身不行,還是復(fù)蘇沒操作好;另外溫度對細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大,也不是細(xì)胞儲存的zui好方式,快遞時間也很難控制,多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量;干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。
第二種:產(chǎn)品僅用于科研
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞,QC通過后,T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶,排除復(fù)蘇造成影響,常溫運(yùn)輸也對細(xì)胞影響也不大,只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。
質(zhì)量保證:我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZJCRB等,購買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進(jìn)口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞培養(yǎng)過程:

細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1
)準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080),85%;北美胎牛血清(United StatesGIBCO,貨號16000-044)15%。
2
)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3
)凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1
)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2
)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1.
棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.
2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.
6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.
將細(xì)胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3
)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
以下是HBL-1細(xì)胞完全培養(yǎng)基說明書的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
CD8A Others Rat 大鼠 CD8A / Lyt2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 草酸亞鐵二水(>99%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRIron (II) oxalate, dihydrate

腸動脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)氯化(>99%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRLead (II) chloride

Hep G2細(xì)胞,細(xì)胞 人細(xì)胞(HPV-18永生化細(xì)胞),HeLa229細(xì)胞 人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞cDNAHUMSC cDNA碳酸鋇(>99%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRBarium carbonate

羅猴胎腎細(xì)胞;MA104苯甲酰胺(>質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRBenzamide

CSF3 Others Human G-CSF / GCSF 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 比布里希猩紅(>90%,BS)質(zhì)量規(guī)格:>90%,BSBiebrich scarlet
CXCL5 Protein Human 重組人 CXCL5 蛋白3,5-二氨基-6-氯吡嗪-2-羧酸甲酯(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:檢查Methyl 3,5-diamino-6-chloropyrazine-2-carboxylate

NRK(大鼠腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 PRAP1 / Proline-rich acidic 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 苯噻啶(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:檢查Pizotifen

615小鼠株;Ca763β-環(huán)糊精(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定β-Cyclodextrin

PROCR Others Mouse 小鼠 Epcr / PROCR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 卡托普利二硫化物(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:檢查Captopril Disulfide

Calu-1 人細(xì)胞鹽酸阿利克侖質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Aliskiren
人胚腎細(xì)胞;293 [HEK-293]TRYPSININHIBITOR,SOYBEAN胰蛋白酶抑制劑,大豆試劑級

TLR4 Others Human TLR4 / CD284 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 流醋鉍 BisMuth sulfctq;BisMuthous sulfctq 7787-68-0

CL-0331CTLL-2(小鼠T細(xì)胞)5×106cells/瓶×2Acriflavine黃素100毫克AR,99%

BRL 3A, 大鼠肝正常細(xì)胞 人小細(xì)胞,NCI-H209細(xì)胞 HIT-T15(倉鼠beta胰島細(xì)胞)DANSYLCHLORIDE丹磺酰錄蛋白組學(xué)級10G605-65-2Frozen

人導(dǎo)管癌細(xì)胞;HCC38Palmiticacid 10g原裝/25g原裝 Sigma P0500
HBL-1細(xì)胞完全培養(yǎng)基說明書人肝間充質(zhì)干細(xì)胞()(HMSC-HE)(5×105)井岡霉素Validamycin質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

CM-R016大鼠*星狀細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL腐草霉素Phleomycin質(zhì)量規(guī)格:≥97%,進(jìn)分

綠色熒光蛋白標(biāo)記小鼠前細(xì)胞;MFC-GFP 小鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL寡霉素Oligomycin, from Streptomyces質(zhì)量規(guī)格:>92%,進(jìn)分

mEPC, 小鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞-骨髓 Mouse紡錘菌素Netropsin di質(zhì)量規(guī)格:≥98%,進(jìn)分

P4HB Others Mouse 小鼠 P4HB / ERBA2L 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 頭孢菌素C鋅鹽Cephalosporin C  salt質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
收到HBL-1細(xì)胞完全培養(yǎng)基說明書處理方法
產(chǎn)品僅用于科研1、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2
、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3
、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸浮)、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4
、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5
、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6
、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細(xì)胞密度超過80%,可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作。


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