耐藥細胞形態(tài)冷凍保存細胞之方法：

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
細胞凍存步驟：

資源名稱　耐藥細胞形態(tài)
種屬:bads200

形態(tài):上皮細胞樣

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:DMEM-H:Dulbecco＇sModifiedEagle＇sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

生長特性:貼壁生長
細胞分類：
第一種：
是凍存產品，由氮直液接拿出，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因為復蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大，一旦細胞狀態(tài)不好，很難說是細胞自身不行，還是復蘇沒操作好；另外溫度對細胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產品的質量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種：產品僅用于科研
是我們復蘇好細胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶，排除復蘇造成影響，常溫運輸也對細胞影響也不大，只需加25元運費(順豐)。
質量保證：我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產品全部經過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。
細胞培養(yǎng)過程：

細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。
以下是耐藥細胞形態(tài)的相關熱銷產品：
HPrSMC-c 人類平滑肌細胞(HPrSMC) 500,000cells 原代神經膠質細胞特制基礎培養(yǎng)基Many types of cells包裝：500/250/100mlABEI；N-（4-氨丁基）-N-乙基異魯米諾質量規(guī)格：>97%,進分N-(4-Aminobutyl)-N-ethylisoluminol

腸內皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)TTAC；十四烷基三甲基氯化銨質量規(guī)格：>99%,ARTetradecyltrimethylammonium chloride

TNFSF11 Others Cynomolgus 食蟹猴 RANKL / OPGL / TNFSF11 人細胞裂解液 (陽性對照) 腺嘌呤質量規(guī)格：>98%,BRAdenine

人小細胞細胞;NCI-H209腺嘌呤（標準品）質量規(guī)格：HPLC>98%,標準品Adenine

貓腎細胞;CRFK 人胚腎細胞,293[HEK-293]細胞 Fox-NY細胞，小鼠細胞琥乙紅霉素質量規(guī)格：potency>765 μg of erythromycin (C37H67NO13) per mg,USP35Erythromycin ethylsuccinate
FaDu細胞，人咽鱗癌細胞 人細胞與倉鼠肺細胞雜交細胞,FD4細胞 CL-0379MCF 7B(人癌細胞)5×106cells/瓶×2H-Ser-OmeoHClL-絲酸鹽酸鹽5克特，98%

中國倉鼠卵巢細胞(亞系*);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ1 Cdna-TGF-β1 Dinding Protein cDNA1,4-二異炳基本 97% 1,4-DIISOPROPYLBqNZqNq 100-18-2

IL1RAPL1 Others Human 人 IL-1R8 人細胞裂解液 (陽性對照) 隊羌基肉桂醋酯 Mqthyl 4-xy7noxycinncmctq 3943-97-3

A-375 [A375], 人惡性素瘤細胞株Fmoc-D-Trp-OHN-芴甲氧羰基-D-色酸100克特，99%

NINJ1 Others Rat 大鼠 Ninjurin-1 / NINJ1 人細胞裂解液 (陽性對照) 9000-90-2ALPHA-淀粉酶alpha-Amylase
PROCR Others Cynomolgus 食蟹猴 Epcr / PROCR 人細胞裂解液 (陽性對照) NP-40LYSISBUFFERNP-40裂解液#N/A500ML#N/A

正常小鼠Leydig細胞;TM3偏釩醋銨;釩醋銨;二縮原釩醋銨 cMMoniuM Mqtcvcncdctq;cMMoniuM Monovcncdctq;cMMoniuM vcncdctq(V) 7803-22-6

LTEP-sm細胞，人小細胞細胞 小鼠皮膚細胞,JB6-C41細胞 CL-0122HUVEC(HUV-EC-C) (人臍內皮細胞)5×106cells/瓶×2Indazole1,2-二氮雜茚500克CP，98%

TE-1(人細胞) 5×106cells/瓶×2咪康唑5克RT

HUtMEC-c 人子宮微內皮細胞(HUtMEC) 500,000cells 臍內皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)(2-)甘酸)
耐藥細胞形態(tài)P3X63Ag8(小鼠細胞) 5×106cells/瓶×2 SARS 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 來那替尼Neratinib(HKI-272)質量規(guī)格：>98.5%,BR,可用于細胞培養(yǎng)

人腎上腺皮質癌細胞;SW-13甲基原薯蕷皂苷(標準品)Methyl Protodioscin質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

ADAM8 Others Cynomolgus 食蟹猴 ADAM8 人細胞裂解液 (陽性對照) 纖細薯蕷皂苷(標準品)Gracillin質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

CL-0457TT(人甲狀腺導管癌細胞)5×106cells/瓶×2鹽酸育亨賓Yohimbine HCl質量規(guī)格：>98%,BR

L-6TG細胞，肌母細胞 人細胞,JCA-1細胞 人胚;MRC-5鹽酸育亨賓（標準品）Yohimbine HCl質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品
收到耐藥細胞形態(tài)處理方法
產品僅用于科研1、首先，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現象。若有，請拍照，并及時與技術支持聯系（所拍照片將作為后續(xù)服務依據）。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓毎螒B(tài)、所用基礎培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務依據）；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng)基，預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內液體全部轉移至50ml無菌離心管內，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細胞密度超過80%，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml；若細胞密度未超過80%，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。