資源名稱　小鼠腦微內(nèi)皮細胞產(chǎn)品僅用于科研
種屬：MBMEC

類型：貼壁

分離基物：腦微；內(nèi)皮細胞

安全等級：1

模式：菌株未知

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基：H-DMEM，90%；FBS，10%；雙抗

生長條件：Temperature: 37.0°C Atmosphere: air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%

存儲條件：Freeze medium: FBS/NBS, 92%; DMSO, 8%（for reference） Storage temperature: liquid nitrogen vapor phase
小鼠腦微內(nèi)皮細胞說明書來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實驗室，可無菌操作并提供相關(guān)科研項目解決方案以及實驗服務(wù)。

培養(yǎng)操作步驟：
小鼠腦微內(nèi)皮細胞說明書1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布； 
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）； 
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時； 
4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中； 
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。 
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用*化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設(shè)備  記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學科領(lǐng)域較為寬廣，如細胞學、免疫學、學、生物化學、遺傳學、分子生物學等； 
適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學性狀相似的實驗對象。

操作流程：
產(chǎn)品僅用于科研1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù)，按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液＝(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細胞生長曲線

以下是公司正在在熱銷的產(chǎn)品：
CDK1 Others Mouse 小鼠 CDC2 Kinase / CDK1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 醋酸精氨酸加壓素質(zhì)量規(guī)格：度98%Argipressin Acetate

食管上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)阿替洛爾質(zhì)量規(guī)格：度大于98%,USPgradeAtenolol

草魚腎細胞;GIK 人細胞，PLC/PRF/5細胞 NIH:OVCAR-3(細胞)巖藻糖；L-巖藻糖質(zhì)量規(guī)格：≥99%,BRL-(-)-Fucose

人細胞;SF763果膠酶質(zhì)量規(guī)格：3萬U/gPectinase

CTHRC1 Others Human 人 CTHRC1 人細胞裂解液 (陽性對照) β-淀粉酶(70萬u/ml液體)質(zhì)量規(guī)格：BR,70萬u/ml液體beta-Amylase
GRN Others Mouse 小鼠 GRN / Granulin 人細胞裂解液 (陽性對照) 枸櫞酸莫沙比利(標準品)質(zhì)量規(guī)格：≥98%,標準品用于含量測定Mosapride

CM-R053大鼠卵巢上皮細胞完全培養(yǎng)基100mL枸櫞酸莫沙比利質(zhì)量規(guī)格：≥98.5%,BR,二水合物Mosapride

HA Others H7N9 甲型 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照) 青霉素G鈉鹽質(zhì)量規(guī)格：>1500U/mg,USP,BRPenicillin G,  salt

大鼠顆粒細胞RGC青霉素G鈉(標準品)質(zhì)量規(guī)格：效價測定Penicillin G,  salt

NCI-H1703[H1703]細胞，人細胞 人細胞,5637(HTB-9)細胞 人視網(wǎng)膜色素上皮細胞HRPEpiC米格列奈鈣質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRMitiglinide calcium Hydrate
豚鼠皮膚細胞;GP-S1N-去甲酰-N-芐氧羰基奧利司他質(zhì)量規(guī)格：美國進口N-Deformyl-N-benzyloxycarbonyl Orlistat

IFNA14 Others Mouse 小鼠 IFNA14 / Ierferon alpha-14 人細胞裂解液 (陽性對照) (2S,3R,5S)-5-[(N-甲酰-L-亮氨酰)氧]-2-己基-3-羥基十六烷酸(奧利司他雜質(zhì))質(zhì)量規(guī)格：美國進口(2S,3R,5S)-5-[(N-Formyl-L-leucyl)oxy]-2-hexyl-3-hydroxyhexadecanoic Acid (Orlistat Impurity)

JF305 *癌C17鞘氨醇質(zhì)量規(guī)格：美國進口C17 Sphingosine

DU 145人細胞 DU 145 human prostate cancer cell F-12+10%FBSD-赤-鞘氨醇 C-15質(zhì)量規(guī)格：美國進口D-erythro-Sphingosine C-15

CTF1 Protein Human 重組人 Cardioophin-1 / CTF1 蛋白草酸亞錫(>質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRTin (II) oxalate
小鼠腦微內(nèi)皮細胞說明書GFRA3 Others Mouse 小鼠 GFRA3 / GFR-alpha-3 人細胞裂解液 (陽性對照) 釕標準溶液(1000μg/ml,介質(zhì)：2.0mol/L HCl)Ruthenium solution質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml,介質(zhì)：2.0mol/L HCl

293A，人胚腎上皮細胞系(腺病毒包裝級別)銠標準溶液(1000μg/ml,溶劑:2.0Mol/L HCl)Rhodium solution質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml,溶劑:2.0Mol/L HCl

LAN-5細胞，神經(jīng)母細胞瘤細胞 人胎盤絨毛癌細胞,JAR細胞 人表皮角質(zhì)細胞RNAHEK miRNA5 μg錸標準溶液(1000μg/ml;溶劑：1.5mol/L硝酸)Rhenium standard質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml;溶劑：1.5mol/L硝酸

SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞;COS-7二氧化硅標準溶液(1000μg/ml,介質(zhì)：0.05mol/L NaOH)Silicon dioxide solution質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml,介質(zhì)：0.05mol/L NaOH

EFNA5 Others Human 人 EphrinA5 人細胞裂解液 (陽性對照) 銀標準溶液(1000μg/ml)Silver standard質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml