人膀胱移行細胞細胞形態(tài)冷凍保存細胞之方法：

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
細胞凍存步驟：

資源名稱　人膀胱移行細胞細胞形態(tài)
種屬：RT4

分離基物：；男性

提供形式：T25細胞培養(yǎng)瓶/凍存管

模式：菌株未知

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基：90%RPMI-1640+10%FBS

生長條件：95%空氣+5%二氧化碳37攝氏度

生長特性：貼壁生長

存儲條件：90%FBS+10%DMSO 液氮
細胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因為復(fù)蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大，一旦細胞狀態(tài)不好，很難說是細胞自身不行，還是復(fù)蘇沒操作好；另外溫度對細胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種：產(chǎn)品僅用于科研
是我們復(fù)蘇好細胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運輸也對細胞影響也不大，只需加25元運費(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。
細胞培養(yǎng)過程：

細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?/span>10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。
以下是人膀胱移行細胞細胞形態(tài)的相關(guān)熱銷產(chǎn)品：
小鼠胚胎成纖維細胞(MEF)(5×105) U266B1 [U266], 人細胞 Human卡托普利（標準品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標準品Captopril

大鼠背脊髓神經(jīng)元RN-dsc卡比多巴質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR,可用于細胞培養(yǎng),一水合物(S)-Carbidopa

CD1B & B2M Others Human 人 CD1B & B2M Heterodimer 人細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸丙卡巴肼/鹽酸甲基芐肼質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,USP,BR,可用于細胞培養(yǎng) Procarbazine HCl

獼猴肌肉細胞;MMm7鹽酸丙卡巴肼(標準品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品Procarbazine HCl

大鼠細胞;CBRH-7919 [CBRH7919] 小細胞細胞，NCI-H446[H446]細胞 RenCa細胞，小鼠細胞鹽酸丙卡特羅質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,CP2005,半水合物Procaterol HCl
HA Others H1N1 甲型 H1N1 (A/Ohio/UR06-0091/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照) N-甲酰-DL-色氨酸質(zhì)量規(guī)格：0.98Nalpha-Formyl-DL-tryptophan

CL-0396NCI-H226(人肺鱗癌細胞)5×106cells/瓶×2L-酪氨酸叔丁酯質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRL-Tyrosine tert-butyl ester

CFR Others Human 人 CFR / CFR-alpha 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) O-芐基-L-酪氨酸質(zhì)量規(guī)格：0.98O-Benzyl-L-tyrosine

人脈絡(luò)叢上皮細胞RNAHCPEpiC miRNA5 μgN-乙酰-L-賴氨酸/N6-三氟乙酰基-L-賴氨酸質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRN-6-Trifluoroacetyl-L-lysine

6T-CEM細胞，T細胞 人巨細胞性細胞,801-D細胞 細胞O-芐基-L-絲氨酸質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRO-Benzyl-L-serine
人*微內(nèi)皮細胞裂解物HCMECL3-溴-1,10-鄰二氮雜菲(>98.0%(HPLC)(T))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T)3-Bromo-1,10-phenanthroline

TIMD4 Others Human 人 TIMD4 / TIM4 人細胞裂解液 (陽性對照) 5-氯-1,10-菲咯啉(>98.0%(T))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)5-Chloro-1,10-phenanthroline

BHK 敘利亞倉鼠腎細胞2-氯-1,10-鄰二氮雜菲(>98.0%(HPLC)(T))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T)2-Chloro-1,10-phenanthroline

CL-0158MGC80-3(人細胞)5×106cells/瓶×24,7-二甲基-1,10-鄰二氮雜菲(>98.0%(T))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)4,7-Dimethyl-1,10-phenanthroline

mCF, 小鼠*成纖維細胞3-O-β-D-葡萄糖( 1→4)-[ a -L-鼠李糖(1→2)]- a-L-阿拉伯糖 常春藤配基- 28-O-鼠李糖(1→4)葡萄糖(1→6)葡萄糖苷質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品V
人膀胱移行細胞細胞形態(tài)HEC-1-A(人子宮內(nèi)膜腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0410P3X63Ag8.653(小鼠細胞)5×106cells/瓶×2 獼猴皮膚細胞;MMS71酸二氫鉀（標準品）Potassium Dihydrogen Phosphate質(zhì)量規(guī)格：比色法含量測定

人髓母細胞瘤細胞;D341Med長春胺（標準品）Vincamine質(zhì)量規(guī)格：含量測定

EGF Others Mouse 小鼠 EGF / Epidermal Growth Factor 人細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸咪達普利（標準品）Imidapril 質(zhì)量規(guī)格：HPLC法含量測定

MGC-803 人細胞1酸哌喹（標準品）Piperaquine phosphate質(zhì)量規(guī)格：含量測定

NCI-H1395人 Human lung adenocarcinoma cell line NCI-H1395 RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS西沙必利（標準品）Cisapride Monohydrate質(zhì)量規(guī)格：含量測定
收到人膀胱移行細胞細胞形態(tài)處理方法
產(chǎn)品僅用于科研1、首先，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸浮）、細胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細胞密度超過80%，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml；若細胞密度未超過80%，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。