資源名稱　人腎母細胞瘤細胞產(chǎn)品僅用于科研
種屬：SK-NEP-1

類型：半貼壁生長

形態(tài)：CM5-1培養(yǎng)液中，半貼壁，不規(guī)則型，有圓形、短梭性

分離基物：腎，肋膜滲出液

提供形式：復蘇形式：T25培養(yǎng)瓶1瓶；或者凍存形式：2ml凍存管2支，干冰費另計。

安全等級：1

模式：菌株未知

應(yīng)用領(lǐng)域微結(jié)構(gòu)有少許微絨毛，連接復合物，形態(tài)：完整的高爾基體，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)多為光滑型，脂滴，沒有病毒棵粒。

培養(yǎng)方法

傳代方法：將舊培養(yǎng)液吸除，PBS清洗兩遍后，無需使用胰酶消化，直接加入 12mL（/100mm 皿）培養(yǎng)液，用吸管吹打細胞至完全脫 落，輕輕吹打均勻，可分 3~6 皿培養(yǎng)。

生長條件：37℃，5%CO2，CM5-1培養(yǎng)液。CM5-1培養(yǎng)液：85%McCoy’s 5a+15%FBS。McCoy’s 5a：MC’5A培養(yǎng)基：，含谷氨酰胺。

存儲條件：凍存則將細胞轉(zhuǎn)移至離心管中，(110g，3min)離心，離心完成后用 6mL 凍存液（90%FBS+10%DMSO）重懸細胞，吹打均勻，分為 6 支凍存管，用程序降溫盒于-80℃凍存，過夜轉(zhuǎn)移至液氮中保存。
人腎母細胞瘤細胞說明書來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實驗室，可無菌操作并提供相關(guān)科研項目解決方案以及實驗服務(wù)。

培養(yǎng)操作步驟：
人腎母細胞瘤細胞說明書1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布； 
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）； 
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時； 
4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中； 
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。 
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用*化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設(shè)備  記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學科領(lǐng)域較為寬廣，如細胞學、免疫學、學、生物化學、遺傳學、分子生物學等； 
適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。

操作流程：
產(chǎn)品僅用于科研1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù)，按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液＝(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細胞生長曲線

以下是公司正在在熱銷的產(chǎn)品：
人脈絡(luò)絲成纖維細胞 (HCPF)( 5×105 )鹽酸多柔比星/鹽酸阿霉素質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRDoxorubicin HCl/Adriamycin

腸平滑肌細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)鹽酸多柔比星/鹽酸阿霉素(標準品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品Doxorubicin HCl/Adriamycin

人色素瘤細胞;A875 大鼠腸上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL鹽酸丁卡因（標準品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC法含量測定Tetracaine HCl

DH82 狗腎惡性癥細胞苯甲唑啉鹽酸鹽/鹽酸妥拉唑林質(zhì)量規(guī)格：>98%,進口原裝Tolazoline HCl

CD19 Others Human 人 CD19 / Leu-12 人細胞裂解液 (陽性對照) 1酸托特羅定質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,M受體(毒蕈堿型乙酰膽堿受體)拮抗劑Tolterodine Tartrate
HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/Anhui/1/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照) 利格列汀;利拉利汀質(zhì)量規(guī)格：>99%,二肽肽酶-4(DPP-4)抑制劑Linagliptin

CL-0329Chang liver (CCL13) (人張氏肝細胞)5×106cells/瓶×2L-谷氨酸-α-芐酯質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRL-Glutamic Acid 1-Benzyl Ester

CNDP1 Others Mouse 小鼠 CNDP1 人細胞裂解液 (陽性對照) L-亮氨酸乙酯鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格：>98%H-Leu-OEt·HCl

小鼠肺動脈成纖維細胞完全培養(yǎng)基 100mLL-苯丙氨酸質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRL-Phenylalanine

Psi2 DAP小鼠胚胎成纖維細胞 Psi2 DAP mouse embryo fibroblasts DMEM培養(yǎng)基+10%FBSL-天冬酰胺;L-天冬酰一水  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR,一水L-Asparagine Monohydrate
人小梁網(wǎng)細胞HTMC2-(羥甲基)-15-冠5-(>96.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>96.0%(GC)2-(Hydroxymethyl)-15-crown 5-Ether

CRP Others Rat 大鼠 CRP / C-reactive 人細胞裂解液 (陽性對照) 2-(羥甲基)-18-冠6-(>93.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>93.0%(GC)2-(Hydroxymethyl)-18-crown 6-Ether

HMF 人肌肉組織來源細胞1,4,8,11-四氮雜環(huán)十四烷(>98.0%(T))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)1,4,8,11-Tetraazacyclotetradecane

CM-R019大鼠腮腺細胞完全培養(yǎng)基100mL1,4,7-三氮雜環(huán)壬烷三鹽酸鹽(>98.0%(N)(T))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(N)(T)1,4,7-Triazacyclononane Tri

RBE, 人肝細胞2-(6-氨基-9H-嘌呤-9-yl)乙醇-d4質(zhì)量規(guī)格：美國進口2-(6-Amino-9H-purin-9-yl)ethanol-d4
人腎母細胞瘤細胞說明書人表皮色素細胞-淺色素(HEM)( 5×105 )1酸二氫鈉一水(ACS級) phosphate, monobasic, monohydrate質(zhì)量規(guī)格：ACS級,>98.5%

人絨毛間充質(zhì)成纖維細胞葡萄糖酸鈣Calcium gluconate, hydrate質(zhì)量規(guī)格：>99%

人胎盤絨膜癌細胞;BeWo 大鼠膀胱成纖維細胞完全培養(yǎng)基 100mL十二烷基-β-D-麥芽糖苷;月桂?；溠刻擒?/span>N-Dodecyl-b-maltoside質(zhì)量規(guī)格：>99%,分子生物學級

N-H 小鼠細胞鹽酸氨基脲Aminourea 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

TNFSF13B Others Human 人 BAFF / TNFSF13B 人細胞裂解液 (陽性對照) 硫酸鏈霉素滅菌溶液，30 mg/mlStreptomycin sulfate solution, 30 mg/ml質(zhì)量規(guī)格：Sterile滅菌溶液,30mg/ml