細(xì)胞培養(yǎng)過程：

產(chǎn)品僅用于科研冷凍保存細(xì)胞之方法：
人小細(xì)胞細(xì)胞 冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

資源名稱　人小細(xì)胞細(xì)胞
種屬：NCI-H446 [H446]

類型：肺；轉(zhuǎn)移灶：肋膜滲出癌；小細(xì)胞

形態(tài)：上皮細(xì)胞

安全等級：1

模式：菌株未知

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基：含1.5g/L 碳酸氫鈉， 4.5g/L 葡萄糖， 10mM HEPES，1.0mM 丙酮酸鈉和2mM L-谷氨酰胺的RPMI 1640，90%；胎牛血清或新生牛血清，10%。

細(xì)胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運(yùn)輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因?yàn)閺?fù)蘇手法對于細(xì)胞狀態(tài)影響較大，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好，很難說是細(xì)胞自身不行，還是復(fù)蘇沒操作好；另外溫度對細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細(xì)胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運(yùn)輸也對細(xì)胞影響也不大，只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞凍存步驟：

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
產(chǎn)品僅用于科研一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。

收到人小細(xì)胞細(xì)胞 處理方法
1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細(xì)胞密度超過80%，可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作。
以下是人小細(xì)胞細(xì)胞 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品：
AGS 人胃腺癌細(xì)胞米屈肼質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR,二水合物Mildronate,Meldonium

MADB-106-RFP-puro(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)大鼠癌細(xì)胞 MADB-106-RFP-puro (leiviral consuct stable sain) of rat breast carcinoma cell 1640+10%FBS+1%P/S+2ug/ml puromycin米屈肼(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Mildronate,Meldonium

TGFB1 Protein Rat 重組大鼠 Late TGF-beta 1 / TGFB1 蛋白 (His 標(biāo)簽)鹽酸貝那普利/苯那普利質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRBenazepril

人腎皮質(zhì)上皮細(xì)胞(HRCEpiC)( 5×105 ) mCF, 小鼠*成纖維細(xì)胞 Mouse鹽酸貝那普利/苯那普利(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：含量測定Benazepril

大鼠癌細(xì)胞;MADB106苯扎貝特質(zhì)量規(guī)格：>98%Bezafibrate
HA Others H1N1 甲型 H1N1 (A/California/04/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 2,4,5,6-四氨基嘧啶硫酸鹽(≥98.0%)質(zhì)量規(guī)格：≥98.0%2,4,5,6-Tetraaminopyrimidine sulfate salt

人主動脈平滑肌細(xì)胞裂解物HASMCL煙酸甲酯(99%)質(zhì)量規(guī)格：0.99Methyl nicotinate

SK-HEP-1細(xì)胞，人細(xì)胞 人低轉(zhuǎn)移細(xì)胞,95-C細(xì)胞 腦動脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)N-甲基-N-(三甲基硅基)乙酰胺(97%)質(zhì)量規(guī)格：0.97N-Methyl-N-(trimethylsilyl)acetamide

兔主動脈平滑肌細(xì)胞;CCC-SMC-1苔酚一水合物(98%)質(zhì)量規(guī)格：0.98Orcinol monohydrate

TIMP1 Others Human 人 TIMP-1 / TIMP1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 2,2’-脫水尿苷；環(huán)尿苷質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR2,2'-O-Cyclouridine
人前脂肪細(xì)胞-內(nèi)臟RNAHPA-v miRNA5 μg，英文名或英文縮寫：Lead，級別：AR，52.5%，規(guī)格：25克

兔主動脈平滑肌細(xì)胞;SMC 細(xì)胞，L1210細(xì)胞 SH2細(xì)胞，小鼠B細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞β.β氧二炳晴 2-Cycnoqthyl qtqr 1626-48-0

人胚肺細(xì)胞VA13細(xì)胞;WI-38 VA13亞系2RA4-硝基本，英文名或英文縮寫：4-nitnoaniline，級別：BS，規(guī)格：25克

HA Others H16N3 甲型 H16N3 (A/black-headed gull/Sweden/5/99) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 二本基乙炔，英文名或英文縮寫：Dipxenylacetylene，級別：CP，規(guī)格：5克

人少突膠質(zhì)前體細(xì)胞總RNAHOPC NA616-47-71-甲基咪唑;N-甲基咪唑;1-甲基甘噁啉1-metxyliMidazole;1-metxylglyoxaline
人小細(xì)胞細(xì)胞 小鼠肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞;P8151酸奧司他韋Oseltamivir phosphate 質(zhì)量規(guī)格：>98%

KB細(xì)胞，口腔表皮樣癌細(xì)胞 人細(xì)胞,KYSE510細(xì)胞 家貓腎細(xì)胞;CATK11酸奧司他韋(標(biāo)準(zhǔn)品)Oseltamivir phosphate 質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

tTA基因修飾的小鼠(B類);F9-CAG-tTA-3E5鹽酸地布卡因Dibucaine HCl質(zhì)量規(guī)格：>98%,USP,BR

HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/Vietnam/1194/2004) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 多奈哌齊Donepezil 質(zhì)量規(guī)格：>98%

人視網(wǎng)膜星形膠質(zhì)細(xì)胞HRA多尼培南(標(biāo)準(zhǔn)品)Doripenem 質(zhì)量規(guī)格：>99%,標(biāo)準(zhǔn)品,一水合物