兔乳腺上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基：培養(yǎng)冷凍保存細(xì)胞之方法：

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
細(xì)胞凍存步驟：

資源名稱　兔乳腺上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基：培養(yǎng)
提供形式：100mL

模式：菌株未知
細(xì)胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因為復(fù)蘇手法對于細(xì)胞狀態(tài)影響較大，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好，很難說是細(xì)胞自身不行，還是復(fù)蘇沒操作好；另外溫度對細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細(xì)胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種：產(chǎn)品僅用于科研
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運輸也對細(xì)胞影響也不大，只需加25元運費(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞培養(yǎng)過程：

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
以下是兔乳腺上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基：培養(yǎng)的相關(guān)熱銷產(chǎn)品：
大鼠肺細(xì)胞;WL1霉酚酸; 麥考酚酸;MPA質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRMycophenolic acid

TFPI2 Others Mouse 小鼠 TFPI2 / PP5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 霉酚酸; 麥考酚酸（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>97%,標(biāo)準(zhǔn)品Mycophenolic acid

KU812 人外周血嗜堿性細(xì)胞鹽酸甲哌卡因質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRMepivacaine HCl

MS751人子宮頸表皮癌細(xì)胞 MS751 human cervical epidermoid carcinoma cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS安普那韋 質(zhì)量規(guī)格：>97%Amprenavir

HGF Protein Mouse 重組小鼠 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白魯比替康; 9-硝基喜樹堿質(zhì)量規(guī)格：>99%Rubitecan
HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/Cambodia/S1211394/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 醋酸鋰，二水(AR)Lithium acetate dihydrate質(zhì)量規(guī)格：>99%,AR

人腦內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL聚蔗糖400Ficol 400質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

BSC-1細(xì)胞，猴腎細(xì)胞系 CHRF(人巨核細(xì)胞) 敘利亞倉鼠腎細(xì)胞;BHK-21二硝基水楊酸3,5-Dinitrosalicylic acid質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

EFNA5 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (His 標(biāo)簽)丙二酸鈉 malonate質(zhì)量規(guī)格：>98%

BC-022(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠漿細(xì)胞瘤;MPC-111酸二氫鈉二水 phosphate, monobasic, dihydrate質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,分子生物學(xué)級
NHDF-c adult 正常人皮膚成纖維細(xì)胞(NHDF)來自成年捐獻(xiàn)者 500,000cells 成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)尿苷二嶙酸葡糖醛酸1克RT

內(nèi)臟脂肪細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)6-錄嘌呤 6-Chloropurinq 1987/4/3

TFPI2 Others Mouse 小鼠 TFPI2 / PP5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) EDTADIwo7iumSALTDIHYDRATE乙二安四乙酸二鈉,二水蛋白組學(xué)級1KG6381-92-6RT

大鼠主動脈平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL胭脂紅1克RT，避光

293-L.P.人胚腎細(xì)胞 Human embryonic kidney cell line 293-L.P. MEM+10% FBS(-N，N-雙
兔乳腺上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基：培養(yǎng)人外根殼細(xì)胞RNAHHORSC miRNA5 μg1酸西他列汀一水Sitagliptin phosphate monohydrate質(zhì)量規(guī)格：≥98.5%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)

CFHR2 Others Human 人 CFHR2 / FHR2 / HFL3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 1酸西他列汀一水（標(biāo)準(zhǔn)品）Sitagliptin phosphate monohydrate質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

人臍平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL壯觀霉素,鹽酸大觀霉素Spectinomycin  質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

BRL大鼠Buffalo細(xì)胞，大鼠肝細(xì)胞 SH-SY5Y(神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞) 人肺粘液上皮樣癌細(xì)胞;NCI-H292壯觀霉素(標(biāo)準(zhǔn)品)Spectinomycin  質(zhì)量規(guī)格：含量測定

CSF2 Protein Rat 重組大鼠 GM-CSF / CSF2 蛋白 (His 標(biāo)簽)鹽酸坦洛新/鹽酸坦索羅辛Tamsulosin  質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,EP6.5
收到兔乳腺上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基：培養(yǎng)處理方法
產(chǎn)品僅用于科研1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸浮）、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細(xì)胞密度超過80%，可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作。