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產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
保存條件 | 凍存則用6mL凍存液(90%FBS+10%DMSO)終止消化,吹打均勻,分為6支凍存管,用程序降溫盒于-80℃凍存,過夜轉(zhuǎn)移至液氮中保存。 |
品牌 | 莼試 |
貨號 | CSX3931 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 詳見說明書 |
細胞形態(tài) | CM1-1培養(yǎng)液中,貼壁,上皮樣細胞,長梭形,圓形 |
是否是腫瘤細胞 | 是 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 貼壁 |
物種來源 | 詳見說明書 |
包裝規(guī)格 | 詳見說明書 |
純度 | 詳見說明書% |
是否進口 | 是 |
細胞培養(yǎng)過程:
產(chǎn)品僅用于科研冷凍保存細胞之方法:
大鼠肺泡Ⅱ型細胞說明書冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
資源名稱 大鼠肺泡Ⅱ型細胞說明書
種屬:RLE-6TN
類型:貼壁
形態(tài):CM1-1培養(yǎng)液中,貼壁,上皮樣細胞,長梭形,圓形
提供形式:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶1瓶;或者凍存形式:2ml凍存管2支,干冰費另計。
安全等級:1
模式:菌株未知
培養(yǎng)方法
傳代方法:將舊培養(yǎng)液吸除,PBS清洗兩遍后,加入6mL(/100mm皿)胰酶,在顯微鏡下觀察,期間禁止搖晃培養(yǎng)皿,細胞剛有脫落時,則吸除大部分胰酶,留約0.5mL,移至培養(yǎng)箱消化,約3min取出。傳代用12mL CM2-1培養(yǎng)液終止消化,輕輕吹打均勻細胞,后可分3~6皿培養(yǎng);
生長條件:37℃,5%CO2,CM2-1培養(yǎng)液。CM2-1培養(yǎng)液:90%RPMI-1640+10%FBS。RPMI-1640:1640培養(yǎng)液,含谷氨酰胺。
存儲條件:凍存則用6mL凍存液(90%FBS+10%DMSO)終止消化,吹打均勻,分為6支凍存管,用程序降溫盒于-80℃凍存,過夜轉(zhuǎn)移至液氮中保存。
細胞分類:
第一種:
是凍存產(chǎn)品,由氮直液接拿出,干冰運輸給客戶。一般不推薦這種,也較少使用這種方式,因為復蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大,一旦細胞狀態(tài)不好,很難說是細胞自身不行,還是復蘇沒操作好;另外溫度對細胞、基因功能狀態(tài)影響很大,也不是細胞儲存的zui好方式,快遞時間也很難控制,多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量;干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種:
是我們復蘇好細胞,QC通過后,T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶,排除復蘇造成影響,常溫運輸也對細胞影響也不大,只需加25元運費(順豐)。
質(zhì)量保證:我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。
細胞凍存步驟:
細胞培養(yǎng)步驟:
產(chǎn)品僅用于科研一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080),85%;北美胎牛血清(United States,GIBCO,貨號16000-044),15%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?/span>10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。
收到大鼠肺泡Ⅱ型細胞說明書處理方法
1、首先,觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細胞形態(tài)、所用基礎培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù));建議細胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞:將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細胞密度超過80%,可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至5ml;若細胞密度未超過80%,將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。
以下是大鼠肺泡Ⅱ型細胞說明書的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
SGC-7901, 人胃腺癌細胞系 腎上腺皮質(zhì)瘤細胞,SW 13細胞 TT(人細胞)D-蟲熒光素鈉鹽;D-熒光素鈉鹽質(zhì)量規(guī)格:>98%D-Luciferin salt
小鼠小膠質(zhì)細胞;BV22ˊ,7ˊ-二氯熒光素鈉鹽質(zhì)量規(guī)格:>98%2',7'-Dichlorofluorescein Salt
MARCO Others Mouse 小鼠 MARCO 人細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸酪胺質(zhì)量規(guī)格:>97%,BRTyramine
大鼠細胞;CBRH-7919 [CBRH7919]糠酸(>97%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR2-Furoic acid
SLAMF6 Others Human 人 SLAMF6 / Ly108 人細胞裂解液 (陽性對照) 2-甲基咪唑(>質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR2-Methylimidazole
HA Others H5N8 甲型 H5N8 (A/duck/NY/191255-59/2002) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照) HistoChoiceDermatologyFixative切片固定劑25克3N
ACHN, 人腎細胞腺癌細胞1,4-二羌基醌;1,4-二羌基-9,10-二同 1,4-Dixy7noxycnthrcinoneonq;inoneizcrin;C.I.58050 81-64-1
GBA3 Others Human 人 GBA3 / CBGL1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 4-溴巴豆醋酯 Mqthyl 4-bromocrotonctq 1117-71-1
Sars結(jié)構(gòu)蛋白表達株;293sars181AFluconazole大扶康5KUBR
SW579細胞,人細胞 人細胞系,HNE2-LMP1細胞 CL-0363Hs68(人男性正常細胞)5×106cells/瓶×2604-59-1β-黃酮;5,6-本并黃酮β-Naphthoflavone;5,6-Benzoflavone;
L6細胞,大鼠成肌細胞 人低轉(zhuǎn)移細胞,MHCC97-L細胞 CL-0120HuH-7(人細胞)5×106cells/瓶×2MOPSOFREEACIDMOPSO超級100G68399-77-9RT
中國倉鼠卵巢細胞;CHO一水草醋銨 cmmonium oxclctq monohydrctq 6009-70-7
SCARB2 Others Human 人 SCARB2 / LIMP2 / CD36L2 人細胞裂解液 (陽性對照) Invertase果糖苷酶10克超,99%
氣管上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)赤霉素GA3500克
IFNA1 Others Rat 大鼠 IFN-alpha / IFNA1 / IFN 人細胞裂解液 (陽性對照) (Bovine)
大鼠肺泡Ⅱ型細胞說明書小鼠B細胞雜交瘤細胞;SH3 小鼠腸動脈內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL靈芝醛A(標準品)Ganoderal A質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥95%,標準品
MN-h, 小鼠海馬神經(jīng)元 Mouse阿司咪唑(標準品)Astemizole質(zhì)量規(guī)格:含量測定
KIT Others Mouse 小鼠 c-kit / CD117 人細胞裂解液 (陽性對照) 伊屈潑帕;艾曲波帕Eltrombopag (SB-497115)質(zhì)量規(guī)格:>99%,血小板生成素受體激動劑
人細胞;MGC-803辣椒平Capsazepine質(zhì)量規(guī)格:>98%,美國進口
PIK3IP1 Others Human 人 PIK3IP1 人細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸阿米洛利Amiloride 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,水合物