小鼠T細(xì)胞（雞OVA基因修飾） 冷凍保存細(xì)胞之方法：

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí)， 以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
細(xì)胞凍存步驟：

資源名稱　小鼠T細(xì)胞（雞OVA基因修飾）
種屬：E.G7-OVA

類型：懸浮生長(zhǎng)

形態(tài)：CM2-1培養(yǎng)液中，懸浮，淋巴母細(xì)胞樣，圓形

提供形式：復(fù)蘇形式：15ml離心管1支；或者凍存形式：2ml凍存管2支，干冰費(fèi)另計(jì)。

安全等級(jí)：1

模式：菌株未知

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基：現(xiàn)已由DMEM-H訓(xùn)化為1640培養(yǎng)基：

傳代方法：將培養(yǎng)好的懸浮細(xì)胞輕輕吹打均勻，分配至3~6個(gè)新鮮培養(yǎng)液皿中，輕輕搖勻后放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)；

生長(zhǎng)條件：37℃，5%CO2，CM2-1培養(yǎng)液。CM2-1培養(yǎng)液：90%RPMI-1640+10%FBS。RPMI-1640：1640培養(yǎng)液，含谷氨酰胺。

生長(zhǎng)特性：用DMEM培養(yǎng)，細(xì)胞有碎片，在驗(yàn)證用1640培養(yǎng)基：培養(yǎng)。

存儲(chǔ)條件：凍存則用6mL凍存液（90%FBS+10%DMSO）終止消化，吹打均勻，分為6支凍存管，用程序降溫盒于-80℃凍存，過(guò)夜轉(zhuǎn)移至液氮中保存。
細(xì)胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運(yùn)輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因?yàn)閺?fù)蘇手法對(duì)于細(xì)胞狀態(tài)影響較大，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好，很難說(shuō)是細(xì)胞自身不行，還是復(fù)蘇沒(méi)操作好；另外溫度對(duì)細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細(xì)胞儲(chǔ)存的zui好方式，快遞時(shí)間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。
第二種：產(chǎn)品僅用于科研
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞，QC通過(guò)后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運(yùn)輸也對(duì)細(xì)胞影響也不大，只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。
細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程：

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號(hào)11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號(hào)16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
以下是小鼠T細(xì)胞（雞OVA基因修飾） 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品：
大鼠肝細(xì)胞;BRL 3A氯替潑諾(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99.0%,標(biāo)準(zhǔn)品Loteprednol Etabonate

人周細(xì)胞 (HBVP) ( 5×105 )洛伐他汀質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)Lovastatin,Monacolin K

肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)鹽酸羅沙替丁醋酸酯質(zhì)量規(guī)格：>98%Roxatidine acetate HCl

人細(xì)胞;SMMC-7721 大鼠小腸平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL培美曲塞酸質(zhì)量規(guī)格：>98%Pemetrexed

CBRH-7919 大鼠細(xì)胞培美曲塞酸(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Pemetrexed
HA Others H7N9 甲型 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) N-三苯甲基羧酸洛沙坦質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口N-Trityl Losartan Carboxylic Acid

CL-0270CRT(人神經(jīng)細(xì)胞)5×106cells/瓶×2O-乙酰洛沙坦質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口O-Acetyl Losartan

KB-C1.5細(xì)胞，細(xì)胞 人T瘤轉(zhuǎn)基因細(xì)胞,Jurkat D,E細(xì)胞 人上皮細(xì)胞;Hep-2洛沙坦N2-葡萄糖苷酸質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Losartan N2-Glucuronide

769-P(人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2洛沙坦質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Losartan

ACVRL1 Others Rat 大鼠 ALK-1 / ACVRL1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 洛匹那韋代謝產(chǎn)物M-3/M-4質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Lopinavir Metabolite M-3/M-4
MIApaca-2細(xì)胞，人*癌細(xì)胞 人成纖維細(xì)胞,HT1080細(xì)胞 615小鼠瘤株;HP615DCCIN，N-二環(huán)己基碳1克AR，99%

HuH-6(人肝母細(xì)胞瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2流醋鈰;流醋鈰銨 CqRIUM(IV) SULFcTq TqTRcHYDRcTq 1094-4-2

Promocell C-22010 Endothelial Cell Growth Medium, 內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基(即用型) 500ml2,5-二本惡唑shēng huà shì jì容量：500毫升

人骨骼肌細(xì)胞裂解物HSkMCLAMMONIUMOXALATEMONOHYDRATE草酸*500G6009-70-7RT

PRKCD Others Mouse 小鼠 PKC delta / PRKCD 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (8-羥基)
小鼠T細(xì)胞（雞OVA基因修飾） 人胃腺癌細(xì)胞;BGC-823硫代硫酸鉀(>Potassium thiosulfate質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

IL1R1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IL1R1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 草酸鈦鉀二水(>98%,BC)Potassium titanyl oxalate ,dehydrate質(zhì)量規(guī)格：>98%,BC

CM-H130人視網(wǎng)膜微內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL對(duì)苯二(>p-Phthaldehyde質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

MKN-28細(xì)胞，人細(xì)胞 人細(xì)胞,U-2 OS細(xì)胞 幼蚊細(xì)胞;C6/36丙基紅(>80%,Ind Grade)Propyl red質(zhì)量規(guī)格：>80%,Ind Grade

DLD-1(人腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2吡唑(>Pyrazole質(zhì)量規(guī)格：>98%，BR
收到小鼠T細(xì)胞（雞OVA基因修飾） 處理方法
產(chǎn)品僅用于科研1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請(qǐng)拍照，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落；先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%，可正常傳代；若未超過(guò)80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí)，若細(xì)胞密度超過(guò)80%，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過(guò)80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作。