細胞培養(yǎng)過程：

產(chǎn)品僅用于科研冷凍保存細胞之方法：
人細胞（未分化）說明書冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

資源名稱　人細胞（未分化）說明書
種屬：HGC-27

類型：貼壁生長

形態(tài)：上皮細胞樣

分離基物：人，胃，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移

提供形式：T25細胞培養(yǎng)瓶/凍存管

模式：菌株未知

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基：80%RPMI-1640+20%FBS

傳代方法：1:3~1:4傳代，2~3天1次

生長條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度。

存儲條件：90%FBS+10%DMSO 液氮

細胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因為復(fù)蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大，一旦細胞狀態(tài)不好，很難說是細胞自身不行，還是復(fù)蘇沒操作好；另外溫度對細胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運輸也對細胞影響也不大，只需加25元運費(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。
細胞凍存步驟：

細胞培養(yǎng)步驟：
產(chǎn)品僅用于科研一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?/span>10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。

收到人細胞（未分化）說明書處理方法
1、首先，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細胞密度超過80%，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml；若細胞密度未超過80%，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。
以下是人細胞（未分化）說明書的相關(guān)熱銷產(chǎn)品：
HA Others H7N9 甲型 H7N9 (A/Anhui/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照) 司他夫定質(zhì)量規(guī)格：>98,BR,可用于細胞培養(yǎng)Stavudine

T-103AI型膠原酶(含10mL酶解緩沖液)1mL司他夫定(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：>98,標(biāo)準(zhǔn)品Stavudine

TU 686細胞，人細胞 人臍內(nèi)皮細胞,ECV-304細胞 中國倉鼠卵巢細胞-二氫葉酸還原酶缺陷型;CHO/dhFr-鹽酸四環(huán)素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Tetracycline

C-33 A(人子細胞) 5×106cells/瓶×2/羧芐西林鈉質(zhì)量規(guī)格：>90%,BRCarbenicillin di

CNDP1 Others Human 人 CNDP1 人細胞裂解液 (陽性對照) 羧芐西林鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：含量測定，標(biāo)準(zhǔn)品Carbenicillin di
HCT/Taxol 人紫杉醇耐藥咪唑（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：檢查Imidazole

ACE2 Others Mouse 小鼠 ACE2 / ACEH 人細胞裂解液 (陽性對照) 瑞他帕林;瑞他莫林質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRRetapamulin

敘利亞倉鼠腎細胞;BHK-21乳果糖（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：含量測定Lactulose

TLR2 Others Human 人 TLR2 / CD282 (aa 1-587) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 酞丁安（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：UV法含量測定FTIBAMZONE

CL-0025AR42J(大鼠*外分泌細胞)5×106cells/瓶×2氯美扎酮（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：UV法溶出度檢查Chlormezanone
人海馬趾神經(jīng)細胞HN-hNaringin柚甙100克熔點和沸點測定儀專用級

LAMP3 Others Cynomolgus 食蟹猴 LAMP3 / DC-LAMP 人細胞裂解液 (陽性對照) AmberliteIRA-411陰... Amberlite IRA410 ion-exchange resin Null 250G 吸附樹脂

豹貓肺成纖維樣細胞;LCL3完全佐劑(+4℃) FRqUND'S COMPLqTq cDJUVcNT 9007-81-

SPC-A1細胞，人 綠猴腎細胞,Vero細胞 CM-M034小鼠肝動脈內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基100mLSilveracetate醋酸銀25克BR，98%

Sf-9(昆蟲細胞) 5×106cells/瓶×2104-01-84-甲氧基;對甲氧基4-metxoxy;HoMoanisic acid;p-metxoxy-α-toluic acid
人細胞（未分化）說明書FSTL1 Others Mouse 小鼠 FSTL1 人細胞裂解液 (陽性對照) 硫酸天仙子胺水合物Hyoscyamine Sulfate Hydrate質(zhì)量規(guī)格：美國進口

大額牛與婆羅門牛雜交F1代皮膚成纖維樣細胞;BOS-6維生素D3 β-D-葡萄糖苷酸Vitamin D3 β-D-Glucuronide質(zhì)量規(guī)格：美國進口

大鼠細胞;UMR-106 ，LTEP-a-2細胞 MSCS細胞，猴的骨髓間充質(zhì)干細胞D,L-福莫特羅-D6 (主要的)D,L-Formoterol-D6 (Major)質(zhì)量規(guī)格：美國進口

PANC-1, 人*癌細胞 Human鹽酸芐基肼Benzylhydrazine 質(zhì)量規(guī)格：美國進口

IFNAR2 Others Human 人 IFNAR2 / IFNABR 人細胞裂解液 (陽性對照) 芐基肼Benzylhydrazine質(zhì)量規(guī)格：美國進口