資源名稱　人小梁網(wǎng)細(xì)胞產(chǎn)品僅用于科研
種屬：gtm3

類型：貼壁生長

安全等級：1

模式：菌株未知

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基：DMEM+10%FBS（建議SERANA胎牛血清S-FBS-EU-015或GIBCO 16000-044胎牛血清）

傳代方法：1:2~1:4，2-3天

生長條件：氣相：空氣95%，二氧化碳5% 溫度：37℃

存儲條件：90%FBS+10%DMSO
人小梁網(wǎng)細(xì)胞形態(tài)來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實驗等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實驗室，可無菌操作并提供相關(guān)科研項目解決方案以及實驗服務(wù)。

培養(yǎng)操作步驟：
人小梁網(wǎng)細(xì)胞形態(tài)1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布； 
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）； 
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時； 
4．將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中； 
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。 
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實際需要進(jìn)行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時，可采用*化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備  記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等； 
適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟(jì)可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實驗對象。

操作流程：
產(chǎn)品僅用于科研1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長曲線

以下是公司正在在熱銷的產(chǎn)品：
人海馬神經(jīng)元 人細(xì)胞，NCI-H226[H226]細(xì)胞 P388D1(瘤細(xì)胞)5‘-1酸吡哆醛，一水質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRPyridoxal 5-phosphate

人色素瘤細(xì)胞;A875NADPH;還原輔酶Ⅱ四鈉鹽;(羅氏)質(zhì)量規(guī)格：>95%,羅氏進(jìn)分Coenzyme II reduced tetra salt(NADPH)

AXL Others Mouse 小鼠 Axl Kinase 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 胰蛋白胨質(zhì)量規(guī)格：FMB GradeTryptone

大鼠腦細(xì)胞;C6生物素;D-生物素;維生素 H 輔酶 R質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRD-Biotin

IL10RB Others Mouse 小鼠 IL10RB / IL10R2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 甘油質(zhì)量規(guī)格：>99%,分子生物學(xué)級Glycerol
HFDPC Pellet 人卵泡毛細(xì)胞團(tuán)塊 > 1 mio.cells 成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基FM非諾貝特質(zhì)量規(guī)格：>99%,EP6.0Fenofibrate

CL-0414PC-3M-IE8(人高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株)5×106cells/瓶×2非諾貝特（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Fenofibrate

FGF9 Others Canine 狗 FGF9 / FGF-9 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 丙磺舒質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRProbenecid

人表皮角質(zhì)細(xì)胞-RNAHEK-a miRNA5 μg阿侖1酸鈉質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Alendronate

兔腎細(xì)胞;RK13 細(xì)胞，SW620細(xì)胞 Mouse podocyte細(xì)胞，小鼠腎足細(xì)胞別嘌醇質(zhì)量規(guī)格：>99%,超Allopurinol
人羊膜間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞雌激素酮-2,4,16,16-d4 3-硫酸鈉鹽質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Estrone-2,4,16,16-d4 3-sulfate  salt

5E Others Rat 大鼠 CD73 / 5E 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 2-羥基雌激素酮質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口2-Hydroxy Estrone

人胚肺二倍體細(xì)胞;KMB-17雌激素酮 3-硫酸鉀鹽質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Estrone 3-sulfate potassium salt

A498細(xì)胞，人細(xì)胞系 蝙蝠肺細(xì)胞,Tb 1 Lu細(xì)胞 CL-0430RS1(大鼠皮膚成纖維樣細(xì)胞)5×106cells/瓶×2雌激素酮 3-甲酯質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口Estrone 3-methyl ether

EA.hy926(人臍細(xì)胞融合細(xì)胞) 5×106cells/瓶×24'-己基苯乙酮(>96.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>96.0%(GC)4'-Hexylacetophenone
人小梁網(wǎng)細(xì)胞形態(tài)QG-56細(xì)胞，肺扁平上皮癌細(xì)胞 人口腔上皮癌長春新堿耐藥株,KB/V細(xì)胞 小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-C2硫唑嘌呤Azathioprine質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)

小鼠腹水瘤細(xì)胞;S-180鹽酸巴尼地平Barnidipine HCl質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

IFNGR1 Others Human 人 IFN-gamma R1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸頭孢吡1 Cefepime 質(zhì)量規(guī)格：含量82.5%~91.1%（每毫克頭孢吡1含量，干品）

人小腦顆粒細(xì)胞裂解物HCGCL鹽酸頭孢吡1 (標(biāo)準(zhǔn)品)Cefepime 質(zhì)量規(guī)格：效價測定

EPCAM Others Rat 大鼠 EpCAM / OP-1 / TACSTD1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 洛索洛芬鈉Loxoprofen 質(zhì)量規(guī)格：≥98.5%(按照干品計算)